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表1 崖桑皮和桑白皮样品药材信息 柱温为30 ℃,进样量为10 μL。
Tab 1 Medicinal materials information of Mori Aus- 表2 梯度洗脱程序
tralis Cortex and Mori Cortex Tab 2 Gradient elution procedure
编号 基原 采集地点 编号 基原 采集地点 时间,min A,% B,% 时间,min A,% B,%
Y1 华桑M. cathayana 重庆市巴南区安澜镇 Y31 鸡桑M. australis 重庆市万州区分水镇 0~3 91 9 44~54 52→47 48→53
Y2 华桑M. cathayana 重庆市奉节县竹园镇 Y32 鸡桑M. australis 重庆市万州区分水镇 3~10 91→88 9→12 54~59 47→35 53→65
Y3 华桑M. cathayana 重庆市奉节县竹园镇 Y33 鸡桑M. australis 重庆市开州区临江镇 10~17 88→87 12→13 59~75 35 65
Y4 华桑M. cathayana 重庆市奉节县竹园镇 Y34 鸡桑M. australis 重庆市开州区临江镇 17~22 87→78 13→22 75~80 35→21 65→79
Y5 华桑M. cathayana 重庆市奉节县竹园镇 Y35 鸡桑M. australis 重庆市开州区临江镇 22~31 78→66 22→34 80~85 21→91 79→9
Y6 华桑M. cathayana 重庆市开州区临江镇 Y36 鸡桑M. australis 重庆市开州区临江镇 31~44 66→52 34→48 85~88 91 9
Y7 华桑M. cathayana 重庆市南岸区黄桷垭镇 Y37 鸡桑M. australis 重庆市开州区临江镇 2.3 方法学考察
Y8 华桑M. cathayana 重庆市南岸区黄桷垭镇 Y38 鸡桑M. australis 重庆市开州区临江镇
Y9 华桑M. cathayana 重庆市南岸区黄桷垭镇 Y39 鸡桑M. australis 重庆市南岸区黄桷垭镇 2.3.1 系统适用性试验 分别精密吸取“2.1”项下混合
Y10 华桑M. cathayana 重庆市云阳县双河镇 Y40 鸡桑M. australis 重庆市南岸区黄桷垭镇 对照品溶液、供试品溶液(编号Y41)和阴性样品溶液适
Y11 华桑M. cathayana 重庆市云阳县双河镇 Y41 鸡桑M. australis 重庆市万州区百安坝街道 量,按“2.2”项下色谱条件进样测定,记录峰面积,所得色
Y12 华桑M. cathayana 重庆市云阳县双河镇 Y42 鸡桑M. australis 重庆市云阳县双河镇
Y13 华桑M. cathayana 重庆市云阳县双河镇 Y43 鸡桑M. australis 重庆市云阳县双河镇 谱图如图1所示。结果,理论板数按桑辛素峰计算大于
Y14 华桑M. cathayana 重庆市云阳县双河镇 Y44 鸡桑M. australis 重庆市云阳县双河镇 8 000,各待测成分峰与相邻峰之间的分离度均大于1.5;
Y15 华桑M. cathayana 重庆市云阳县双河镇 Y45 鸡桑M. australis或 成都市荷花池药材市场
Y16 华桑M. cathayana 重庆市开州区大进镇 华桑M. cathayana 阴性样品溶液对测定无干扰。
Y17 鸡桑M. australis 重庆市开州区大进镇 Y46 鸡桑M. australis或 成都市荷花池药材市场 250
Y18 鸡桑M. australis 重庆市北碚区天生街道 华桑M. cathayana 200
Y19 鸡桑M. australis 重庆市北碚区天生街道 Y47 鸡桑M. australis或 重庆市万州区南站药材批发市场 mAU 150
Y20 鸡桑M. australis 重庆市北碚区天生街道 华桑M. cathayana 100
Y21 鸡桑M. australis 重庆市北碚区天生街道 S2 桑M. alba 重庆市奉节县竹园镇 50
Y22 鸡桑M. australis 重庆市巴南区安澜镇 S3 桑M. alba 重庆市万州区分水镇 0 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80
Y23 鸡桑M. australis 重庆市开州区大进镇 S4 桑M. alba 重庆市万州区百安坝街道 t,min
Y24 鸡桑M. australis 重庆市开州区大进镇 S5 桑M. alba 重庆市万州区百安坝街道 A.混合对照品溶液
Y25 鸡桑M. australis 重庆市奉节县竹园镇 S6 桑M. alba 重庆市万州区百安坝街道 200
Y26 鸡桑M. australis 重庆市奉节县竹园镇 S7 桑M. alba 重庆市万州区百安坝街道 150
Y27 鸡桑M. australis 重庆市奉节县竹园镇 S8 桑M. alba 重庆市万州区百安坝街道 mAU 100
Y28 鸡桑M. australis 重庆市奉节县竹园镇 S9 桑M. alba 重庆市万州区百安坝街道
50
Y29 鸡桑M. australis 重庆市奉节县竹园镇 S10 桑M. alba 重庆市云阳县双河镇
0
Y30 鸡桑M. australis 重庆市万州区分水镇 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75
t,min
A、绿原酸、紫云英苷、山柰酚、桑辛素和异槲皮素对照品 B.供试品溶液(编号Y41)
各适量,置于同一量瓶中,用 70%甲醇溶液溶解并配制 200
150
成上述成分质量浓度分别为 0.287、0.466、0.148、0.118、 mAU 100
50
0.058、0.328、0.185 mg/mL 的混合对照品溶液,用 0.22 0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75
µm微孔滤膜滤过,备用。 t,min
C.阴性样品溶液
2.1.2 供试品溶液 精密称取药材粉末0.5 g,置于具塞
注:1.新绿原酸;2.桑皮苷 A;3.绿原酸;4.异槲皮素;5.紫云英苷;
锥形瓶中,精密加入70%甲醇溶液25 mL,混匀,称定质
6.山柰酚;7.桑辛素
量,在室温条件下超声(功率300 W,频率40 kHz,下同) Note:1. neochlorogenic acid;2. mulberroside A;3. chlorogenic
提取 30 min,冷却至室温,用 70%甲醇溶液补足减失的 acid;4.isoquercitrin;5. astragalin;6. kaempferol;7. morusin
质量,以 4 000 r/min 离心 10 min,取上清液,用 0.22 µm 图1 混合对照品、供试品和阴性样品溶液的HPLC图
微孔滤膜滤过,即得供试品溶液。 Fig 1 HPLC chromatogram of mixed control,test
sample and negative sample
2.1.3 阴性样品溶液 精密量取70%甲醇溶液25 mL,
置于具塞锥形瓶中,按“2.1.2”项下“称定质量……用 2.3.2 线性关系考察 分别精密吸取“2.1.1”项下混合
0.22 µm微孔滤膜滤过”步骤操作,制得阴性样品溶液。 对照品溶液适量,用70%甲醇溶液稀释得到系列对照品
2.2 色谱条件 溶液,按“2.2”项下色谱条件依次进样测定,记录峰面
色谱柱为Diamonsil C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),流 积。以各对照品峰面积(y)与其相应的质量浓度(x)进
动相为 0.1%甲酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(洗脱程 行线性回归,结果如表 3 所示。由表 3 可知,7 种活性成
序如表2所示),流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm, 分的r均不小于0.999 0,表明线性关系良好。
·1856 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 中国药房 2021年第32卷第15期