Page 45 - 2021年15期

ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effects of the water extract from Carpesium cernuum（AECC）on the proliferation，
metastasis and invasion of prostate cancer PC3 cells. METHODS：Cells were divided into control group and different concentration
groups of AECC（5，10，20，40，80 μg/L），and then treated with relevant medicine or medium for different time（24，48，72 h）.
The survival rates of cells were detected. Cells were divided into control group，and AECC low，medium and high concentration
groups（20，40，80 μg/L）. After cultured for 24 h，Hoechst 33258 staining and flow cytometry were used to detect the apoptosis of
cells. The number of cell metastasis and invasion were detected by Transwell assay. RT-qPCR and Western blot assay were applied
to detect the mRNA and protein expression of β-catenin signaling pathway related migration and apoptosis proteins（β-catenin，
MMP-7，c-Myc，caspase-3，Bcl-2 and Bax）in AECC low and medium concentration groups. RESULTS：With the increase of the
concentration and culture time，the survival rates of cells in AECC different concentration groups were significantly lower than
control group （P＜0.05 or P＜0.01），and showed a decreasing trend. Compared with control group，the early apoptosis rate
（except the medium concentration group）and the number of cell metastasis and invasion in AECC groups，the mRNA and protein
expression of MMP-7，c-Myc（except for the low concentration group）and Bcl-2（except for mRNA of the low concentration
group）in AECC low and medium concentration groups were decreased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）. Late apoptosis rate of
AECC groups，the mRNA and protein expression of β-catenin，caspases-3（except for the low concentration group），Bax（except
for mRNA of the low concentration group）in AECC low and medium concentration groups were increased significantly（P＜0.05
or P＜0.01）. CONCLUSIONS：AECC could inhibit the proliferation，metastasis and invasion of PC3 cells；the mechanism of
which may be associated with regulating the expression of β-catenin signaling pathway related migration and apoptotic factors.
KEYWORDS Carpesium cernuum；Prostate cancer PC3 cells；β-catenin；Proliferation；Metastasis；Invasion

前列腺癌是发病率较高的男性恶性肿瘤之一。随 表达，从而促进胱天蛋白酶 3（caspases-3）和 B 细胞淋巴
着我国社会人口老龄化，前列腺癌发病率和病死率正逐 瘤 2（Bcl-2）相关 X 蛋白（Bax）等凋亡蛋白的表达，进而
[1]
年上升，严重影响男性的生活质量和生命安全 。世界 抑制细胞增殖、迁移与侵袭 [10－12] 。由此可见，β-catenin信
卫生组织统计报告显示，2020年全球范围内前列腺癌患 号通路与前列腺癌的增殖、迁移与侵袭密切相关。基于
[2]
者有 141 万例，死亡病例为 37.5 万例 。前列腺癌的发 此，本文拟研究 AECC 对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵
展进程快、易发生转移，后期可形成去势抵抗性前列腺 袭的影响，以期为烟管头草的临床应用提供实验依据。
癌，给患者的预后和治疗带来挑战 。目前，临床常用的 1 材料
[3]
治疗方法为雄激素剥夺疗法，其中阿比特龙、恩杂鲁胺 1.1 主要仪器
等一线治疗用药可延长患者总生存期，但在临床上表现 本研究所用主要仪器有 3111 型二氧化碳细胞培养
[4]
出明显的副作用和耐药等问题，影响其临床疗效 。因 箱（美国Thermo Fisher Scientific公司）、ME204E型分析
此，寻求安全有效的抗前列腺癌药物具有重要意义。 天平（瑞士 Mettler-Toledo 公司）、SYNERGY-H4 型多功
烟管头草 Carpesium cernuum L.为菊科天名精属多 能酶标仪（美国 Bio-Rad 公司）、ECLIPSE TS100-F 型倒
年生草本植物，别名烟袋草、杓儿菜，民族药中也称为野 置生物显微镜（日本 Nikon 公司）、DMI8 型荧光显微镜
烟叶，广泛分布于我国西南、华中等地，常药用其秋季采 （德国 Leica 公司）、AllegraX-15R 型高速离心机（美国
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摘的干燥全草 。烟管头草味辛，具有清热解毒、破瘀止 Beckman 公司）、NovoCyte 型流式细胞仪（美国 ACEA
TM
血、消肿止痛等功效，主要用于治疗感冒发热、牙痛、咽 Biosciences 公司）、StepOne Plus 型荧光定量聚合酶链
喉肿痛、尿路感染、淋巴结核、皮肤瘙痒、毒蛇咬伤、血 式反应（PCR）仪（美国Abi公司）、JY300HE型电泳仪（北
淋、乳腺炎等病症 [6－7] 。贵州省土家族地区的中医常将 京君意东方电泳设备有限公司）、Odyssey CLX 型双色
烟管头草以水煎煮，用于治疗前列腺癌、乳腺癌、胃癌、 红外激光扫描成像系统（美国 LifeGen Technologies 公
[8]
直肠癌、肺癌、肝癌等多种癌症，且均具有一定疗效 。 司）。
本课题组前期研究发现，烟管头草水提物（以下简称 1.2 主要药品与试剂
“AECC”）对前列腺增生细胞具有显著的抑制作用 ，但 烟管头草全草采自贵州省安顺市镇宁县，经贵州中
[9]
其对前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭的影响及作用机 医药大学药学院孙庆文教授鉴定为菊科天名精属植物
制并不明确。 烟管头草 C. cernuum L.的全草。其他药品与试剂有
肿瘤细胞的黏附能力是影响前列腺癌增殖、侵袭与 DEME 高糖培养基（美国 Thermo Fisher Scientific 公司，
迁移的重要因素，其中β-连环蛋白（β-catenin）是肿瘤细 批号 8121156），胎牛血清（杭州天杭四季青公司，批号
胞中一类重要的黏附分子，其可抑制迁移相关蛋白基质 201020703），胰酶（以色列BI公司，批号2043176），Trizol
金属蛋白酶 7（MMP-7）和骨髓瘤病毒癌基因（c-Myc）的 提取试剂（上海沃凯生物科技公司，批号 213406），

中国药房 2021年第32卷第15期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 ·1831 ·