Page 41 - 2021年15期

（S1号样品醇提物）适量，按“2.1.2”项下色谱条件连续进 2.1.9 共有峰指认 取“2.1.4”项下对照品溶液，按
样 6 次，记录色谱图。将 10 号色谱峰（出峰时间适中且 “2.1.2”项下色谱条件进样分析，得到如图 2 所示的石斛
峰形较好，下同）作为参照峰（S），计算各共有峰的相对 酚对照品色谱图。由图1可知，12批不同产地金钗石斛
保留时间和相对峰面积。结果，各共有峰的相对保留时 醇提物一共有 18 个共有峰，通过与图 2 进行对比，指认
间的 RSD 为 0.04％～0.45％（n＝6），相对峰面积的 RSD 出12号峰为石斛酚。
为0.55％～2.97％（n＝6），表明仪器精密度良好。 0.018
0.016
2.1.6 重复性试验 取S1号样品醇提物6份，按“2.1.3” 0.014
0.012
项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.2”项下色谱条件进 mV 0.010
U， 0.008
样分析，记录色谱图。将10号色谱峰作为参照峰（S），计 0.006
0.004
算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，各共 0.002 0
有峰的相对保留时间的 RSD 为 0.02％～0.39％（n＝6）， 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80
t，min
相对峰面积的 RSD 为 1.13～2.98％（n＝6），表明该方法
图2 石斛酚对照品的HPLC图谱
重复性良好。
Fig 2 HPLC chromatogram of dendrophenol control
2.1.7 稳定性试验 取“2.1.3”项下供试品溶液（S1号样
品醇提物），于室温放置 0、2、4、8、12、16、24 h 后，按 2.1.10 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度
“2.1.2”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。将10号色 评价系统（2012 年版）》对 12 批金钗石斛醇提物的指纹
谱峰作为参照峰（S），计算各共有峰的相对保留时间和 图谱进行相似度评价。结果，12批金钗石斛醇提物样品
相对峰面积。结果，各共有峰的相对保留时间的RSD为 指纹图谱的相似度在0.911～0.996范围内，表明这12批
0.01％～0.67％（n＝7），相对峰面积 RSD 为 1.75％～ 样品的一致性较好，详见表2。
2.58％（n＝7），表明供试品溶液在室温放置 24 h 内稳定 表2 12批金钗石斛醇提物指纹图谱的相似度
性良好。 Tab 2 Similarity of the fingerprints of the ethanol ex-
2.1.8 12 批不同产地金钗石斛醇提物样品 HPLC 指纹 tracts from 12 batches of D. nobile
图谱的生成 取“2.1.1”项下制备的 12 批金钗石斛醇提 编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12
S1 1.000
物粉末，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按
S2 0.985 1.000
“2.1.2”项下色谱条件进样分析，记录色谱图。采用《中 S3 0.982 0.996 1.000
药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 年版）》，将色谱 S4 0.974 0.991 0.985 1.000
S5 0.927 0.933 0.911 0.958 1.000
峰峰形较明显、信号强度较好的S1号样品醇提物的色谱
S6 0.949 0.963 0.971 0.964 0.958 1.000
图作为参照色谱图，运用全谱峰匹配法和中位数法，将 S7 0.975 0.986 0.981 0.992 0.964 0.962 1.000
时间窗设置为0.1，经过多点校正后，自动匹配生成12批 S8 0.981 0.989 0.990 0.985 0.937 0.978 0.989 1.000
S9 0.970 0.986 0.977 0.994 0.963 0.963 0.994 0.985 1.000
不同产地金钗石斛醇提物的HPLC叠加指纹图谱和对照 S10 0.972 0.987 0.980 0.995 0.960 0.966 0.995 0.988 0.996 1.000
图谱R，详见图1。 S11 0.969 0.973 0.957 0.975 0.980 0.928 0.979 0.973 0.981 0.981 1.000
S12 0.981 0.982 0.971 0.973 0.957 0.946 0.980 0.984 0.979 0.982 0.993 1.000
150 2.2 金钗石斛醇提物对脂多糖诱导的 RAW264.7 巨噬
140
130 R 细胞抗炎作用的考察
120
110 S12 本研究参考文献[15]的方法，探究金钗石斛醇提物
100 S11
S10
90
mV 80 S9 S8 对脂多糖诱导的炎症模型RAW264.7巨噬细胞中炎症因
U， 70
60 S7 子（IL-4、IL-6）含量的影响，以此评价其抗炎作用。
S6
50 2.2.1 细胞培养 RAW264.7巨噬细胞采用含10％胎牛
40 S5
30 S4
20 S3 血清和 1％青霉素-链霉素双抗的 DMEM 高糖培养基
S2
10
0 S1 （简称“培养基”），于 37 ℃、5％CO2细胞培养箱中培养
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 （以下培养条件相同），取对数生长期的细胞进行后续
t，min
图1 12批不同产地金钗石斛醇提物的HPLC叠加指纹 实验。
图谱和对照图谱R 2.2.2 金钗石斛醇提物对细胞培养液中 IL-4、IL-6 含量
4
Fig 1 HPLC superimposed fingerprint diagram and 的影响 取 RAW264.7 巨噬细胞，按 5×10 个/孔接种于
comparison diagram R of ethanol extract from 96 孔板，然后分为正常对照组、模型组、地塞米松组（阳
12 batches of D. nobile from different habitats 性对照，100 μg/mL，给药质量浓度根据文献[17]设置）和

中国药房 2021年第32卷第15期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 ·1827 ·