Page 53 - 2021年14期

2.2 溶液的制备 2.3 专属性考察
2.2.1 混合对照品溶液 精密称取各对照品适量，置于 分别取“2.2.1”项下的混合对照品溶液、供试品溶液
同一10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，混匀，制 （编号 210128，大黄批号为 200613、厚朴批号为 200413、
成每 1 mL 分别含柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芦荟大黄 枳实批号为 200719、羌活批号为 200606，下同）、各缺味
素、大黄酸、羌活醇、大黄素、和厚朴酚、异欧前胡素、厚 三化汤阴性溶液，分别按照“2.1”项下色谱条件进样分
朴酚、大黄酚、大黄素甲醚 5.54、0.38、4.56、0.12、0.21、 析，记录色谱图。结果显示，供试品溶液与混合对照品
0.22、0.20、0.24、0.08、0.12、0.17、0.11 mg 的混合对照品
溶液在相同的保留时间处有相同的色谱峰，阴性溶
溶液。
液对测定无干扰；以 12 种成分计的理论板数均大于
2.2.2 三化汤供试品溶液 分别称取大黄、厚朴、枳实、
5 000；待测成分色谱峰峰形较好，且与相邻色谱峰的
羌活药材粗粉各 31 g，采用传统砂锅加水 600 mL 浸泡
分离度均大于 1.5，说明该方法专属性良好。三化汤中
30 min，武火煮沸后再以文火熬至约300 mL，滤过，收集
12 种成分测定的 HPLC 图见图 1（图中，各小图为局部
续滤液。滤液经浓缩、冷冻干燥后，制得三化汤供试品
放大图）。
粉末。精密称取该粉末0.25 g，置于50 mL锥形瓶中，精
2.4 线性关系考察
密加入70％甲醇25 mL，称定质量，超声（功率250 W，频
率 40 kHz）处理 30 min，放冷，再次称定质量，用 70％甲 取“2.2.1”项下混合对照品溶液，用甲醇分别稀释0、
醇补足减失的质量，摇匀。以0.45 μm微孔滤膜滤过，取 5、10、50、100倍后，分别按照“2.1”项下色谱条件进样测
续滤液，即得三化汤供试品溶液。 定，记录峰面积。以各待测成分质量浓度为横坐标（x，
2.2.3 缺味三化汤阴性溶液 按照“2.2.2”项下制备方 μg/mL）、相应峰面积为纵坐标（y）进行线性回归。结果，
法，分别制备不含大黄、不含厚朴、不含枳实、不含羌活 各待测成分在其各自质量浓度范围内与其峰面积的线
2
的缺味三化汤阴性溶液。 性关系均良好（R ≥0.999 6），详见表1。
600 1 3 150 700 1 3 80
125
500 mV 100 5 600 mV 60 4 5 11
75
400 U， 50 4 6 7 11 500 U， 40 6 8 12
mV 300 25 8 9 10 12 mV 400 20 0 7 9 10
U， 0 U， 300
200 35 40 45 50 55 60 65 70 75 35 40 45 50 55 60 65 70 75
2 t，min 200 t，min
100 5
4 6 78 9 10 11 100 2 4 5 11 12
0 12 0 6 78 9 10
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85
t，min t，min
A.混合对照品溶液 B.供试品溶液
900
1 250 1 3 40 1 3 100
30 6 800 75 5
1 000 mV U， 20 8 9 700 mV U， 50 4 11
600
mV 750 10 10 mV 500 25 0 6 7 9 12
U， 500 0 U， 400
55
35 40 45 50 55 60 65 70 75 300 35 40 45 50 t，min 60 65 70 75
250 t，min 200
2 100 2 4 5 6 7 9 11 12
0 6 8 9 10 0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85
t，min t，min
C.缺大黄阴性溶液 D.缺厚朴阴性溶液
800 100 900
700 1 3 80 5 800 60 4 5
600 mV U， 60 4 11 700 mV 40 6 11
40
mV 500 20 7 8 10 12 mV 600 U， 20 78 9 10 12
500
400
U， 300 0 35 40 45 50 55 60 65 70 75 U， 400 0 35 40 45 50 55 60 65 70 75
200 t，min 300 t，min
200
100 2 4 5 11 12 100 4 5 6 78 9 10 11 12
0 78 10 0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85
t，min t，min
E.缺羌活阴性溶液 F.缺枳实阴性溶液
注：1.柚皮苷；2.橙皮苷；3.新橙皮苷；4.芦荟大黄素；5.大黄酸；6.羌活醇；7.大黄素；8.和厚朴酚；9.异欧前胡素；10.厚朴酚；11.大黄酚；12.大黄素
甲醚
Note：1. naringin；2. hesperidin；3. neohesperidin；4. aloe emodin；5. rhein；6. notopterol；7. emodin；8. honokiol；9. isoimperatorin；10. magno-
lol；11. chrysophanol；12. physcion
图1 三化汤中12种成分测定的高效液相色谱图
Fig 1 HPLC chromatograms of 12 components in Sanhua tang
中国药房 2021年第32卷第14期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 14 ·1711 ·