Page 47 - 《中国药房》2021年12期

determination was performed on Symmetry C18 column with phosphate buffer solution（pH 6.8）-acetonitrile（84 ∶ 16，V/V）as mobile
phase at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was 245 nm，and column temperature was 35 ℃. The sample size
was 20 µL. RESULTS：The contents of mannose，rhamnose，galacturonic acid，glucose，galactose and arabinose were 0.50-0.94，
0.76-1.60，3.35-7.86，87.33-275.77，1.95-8.96，2.35-14.04 mg/g，respectively. Total contents of monosaccharide from 2，3，4
years old A. membranaceus were 98.26-139.92，173.81-295.71，122.37-182.41 mg/g，respectively. There was significant difference
in the contents of glucose between 3 old years A. membranaceus and 2，4 old years A. membranaceus（162.71-275.77 mg/g vs.
87.33-107.70，111.54-167.26 mg/g，P＜0.05）. CONCLUSIONS：Above 6 monosaccharides are detected in 2，3，4 years old A.
membranaceus，among which the content of glucose is the highest. The content of glucose in 3 years old A. membranaceus is
higher than that in 2 and 4 years old A. membranaceus.
KEYWORDS Astragalus membranaceus；Polysaccharides；Monosaccharides；Pre-column derivatization；HPLC

黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus 海亚荣生化仪器厂），HWS-24 型电热恒温水浴锅（上海
（Fisch.）Bge. var. mongholicus（Bge.）Hsiao 或膜荚黄芪 一恒科学仪器有限公司），BSA-124S 型分析天平（赛多
[1]
Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根 ，主产 利斯科学仪器有限公司），DHG-9140A型电热恒温鼓风
[2]
于我国山西、内蒙古等地 。作为常用传统中药之一，黄 干燥箱（上海精宏实验设备有限公司），X-30R型高速冷
芪味甘、性平，具有补气固表、利水生津、托毒排脓、敛疮 冻离心机（美国Beckman Coulter公司）等。
生肌等功效，临床上主要用于治疗气虚乏力、食少便 1.2 主要药品与试剂
溏、中气下陷、久泻脱肛、血虚萎黄、内热消渴等症 [1，3] 。 无水葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖对
现有研究指出，黄芪具有调节免疫、保护心血管与神经 照品（批号分别为 YG8510、YR8080、YG8010、YG8420、
系统、抗肿瘤、护肝等药理作用，其主要化学成分包括黄 YA8500，HPLC 均大于 98％）均购自南京翼飞雪生物科
酮类、皂苷类、多糖类化合物 [4－5] 。 技有限公司；半乳糖醛酸对照品（批号B21894，HPLC大
作为大宗药材之一，黄芪在临床上使用较广，已有 于98％）、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP，分析纯）均购
研究表明不同生长年限黄芪药材的成分含量存在较大 自上海源叶生物科技有限公司；三氟乙酸（TFA，分析
差异，其中黄酮类和皂苷类成分的含量随生长年限的 纯）购自上海麦克林生化科技有限公司；氢氧化钠
延长而逐年升高，而多糖类成分的含量则变化趋势不 （NaOH，批 号 20181113，分 析 纯）、三 氯 甲 烷（批 号
一 [6－9] 。黄芪药材中的黄芪多糖是一种重要的生物活性 20191216，分析纯）、正丁醇（批号 20210119，分析纯）均
物质，具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖、抑制人肝癌细胞增 购自国药集团化学试剂有限公司；乙腈（色谱纯）购自德
殖、调节免疫等作用 [10－13] 。由于非专属且可控性不强， 国Merck公司；其余试剂均为分析纯，水为超纯水。
黄芪多糖未能作为质控指标以评价黄芪种质资源 。 9 批黄芪药材分别产自我国山西、甘肃、内蒙古等
[14]
多糖的生物活性与其单糖组成密切相关，且单糖组成及 地，经南京中医药大学药学院陆兔林教授鉴定为蒙古黄
其含量测定是进行多糖质量控制的重要依据 。近年 芪 A. membranaceus（Fisch.）Bge. var. mongholicus（Bge.）
[15]
来对黄芪多糖的探索研究也成为了医学界的研究热点 Hsiao的干燥根，其来源信息见表1。
之一。目前，研究者多利用紫外分光光度法测定总多糖 表1 黄芪药材来源信息
含量，并以此作为药材品质评价的手段，然而总多糖含 Tab 1 Source information of A. membranaceus
量缺乏特异性，故2020年版《中国药典》（一部）并未收载 编号 产地 生长年限，年
黄芪多糖的相关检测标准 。为此，本研究对不同生长 H-01 山西五寨县 2
[16]
H-02 甘肃渭源县 2
年限黄芪药材中的黄芪多糖进行水解，并对其进行柱前
H-03 内蒙古武川县 2
衍生化处理；再基于文献[15，17－20]的研究结果，采用 H-04 山西五寨县 3
高效液相色谱法（HPLC）对黄芪药材中甘露糖、鼠李糖、 H-05 甘肃渭源县 3
H-06 内蒙古武川县 3
半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖等6种单糖的含
H-07 山西五寨县 4
量进行测定，考察黄芪药材中这6种单糖含量随生长年 H-08 甘肃渭源县 4
限变化的规律，旨在为不同生长年限黄芪药材的质量评 H-09 内蒙古武川县 4
价提供科学参考。 2 方法与结果
1 材料 2.1 黄芪多糖的提取
1.1 主要仪器 称取黄芪药材约20 g，加10倍量（mL/g，下同）水，于
本研究所用主要仪器包括 Waters e2695 型 HPLC 100 ℃下提取 2 h，滤过；药渣加 5 倍量水同法提取 30
仪及配套的四元泵、柱温箱、自动进样器和 Empower min，滤过；合并滤液浓缩至 50 mL，再加入 Sevage 试剂
3 工作站（美国 Waters 公司），RE-52A 型旋转蒸发器（上 （氯仿-正丁醇＝4 ∶ 1，V/V）10 mL 以除去蛋白质（下层）。

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