Page 25 - 中国药房2021年11期

Effects of 4-hydroxy-2（3H）-benzoxazolone on Inflammatory and Apoptosis Signaling Pathways in Non-
alcoholic Fatty Liver Disease Model Rats
XU Wanpeng ，LIN Jun ，LIANG Yingqin ，ZHOU Huanfang ，ZHANG Hua ，HUANG Shizhen ，SUN Xuemei ，
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WEI Xiugui ，WANG Hongyuan ，LIU Lin（1. School of Pharmacy，Guangxi Medical University，Guangxi
530021；2. Neurosurgery Department，the Second People’s Hospital of Nanning，Guangxi 530031；3. Pharmacy
Department，the First People’s Hospital of Nanning，Guangxi 530022）
ABSTRACT OBJECTIVE：To investigate the effects of 4-hydroxy-2（3H）-benzoxazolone on inflammatory and apoptosis
signaling pathways in non-alcoholic fatty liver disease（NAFLD）model rats. METHODS：SD rats were divided into normal control
group（10 rats）and modeling group（50 rats）. Normal control group was given basic diet，and modeling group were given high-fat
diet to induce NAFLD model. After modeling，the rats were divided into normal control group，model group，silibinin group
（26.25 mg/kg），and 4-hydroxy-2（3H）-benzoxazolone high-dose，medium-dose and low-dose groups（100，50，25 mg/kg），with 8
rats in each group. Normal control group and modeling group were given 0.6％ CMC-Na intragastrically，and other groups were
given relevant medicine 10 mL/kg intragastrically，once a day，for consecutive 4 weeks. After last medication，the serum levels of
albumin（ALB），total protein（TP），globulin（GLB），ALB/GLB and free fatty acid（FFA）were detected；TUNEL staining was
used to observe the apoptosis of rat hepatocytes. Western blot assay was used to detect the protein expression and phosphorylation
level of inflammatory signaling pathway related proteins [Toll-like receptor 4（TLR4），myeloid differentiation factor 88（MyD88），
nuclear factor-κ B p65 （NF-κ B p65），NF-κ B inhibitor protein （I κ B α）] in liver tissue as well as the expression of apoptosis
signaling pathway related proteins [B cell lymphoma 2（Bcl-2），Bax，caspase-3]. RESULTS：Compared with model group，serum
levels of TP（except for low-dose group），GLB and FFA，the protein expression of TLR4（except for low-dose group），MyD88
（except for medium-dose group） and caspase-3，the phosphorylation levels of NF-κ B p65 and I κ B α protein were decreased
significantly（P＜0.05 or P＜0.01）. The ratio of ALB/GLB in serum and the ratio of Bcl-2/Bax in liver tissue were significantly
increased （P＜0.05 or P＜0.01），and the phenomenon of hepatocyte apoptosis was improved. CONCLUSIONS：4-hydroxy-2
（3H）-benzoxazolone can ameliorate NAFLD in rats，and the mechanism may be associated with inhibiting the expression TLR4/
MyD88/NF-κB signaling pathway-related proteins and apoptosis-related proteins in liver tissues.
KEYWORDS 4-hydroxy-2（3H）-benzoxazolone；Non-alcoholic fatty liver disease；Inflammation；Apoptosis；TLR4/MyD88/NF-
κB signaling pathway；Rats

随着经济的快速发展，人们生活节奏和饮食方式也 酮、多糖和萜类等活性成分，具有一定的药用价值 [11－12] 。
发生了变化，发生肥胖的人数越来越多，而肥胖人群也 本课题组前期从老鼠簕生物碱中分离出了单体化合物
更容易患非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic fatty liver 4-羟基-苯并噁唑-2-酮，经动物实验证明其对小鼠急、慢
disease，NAFLD） [1－2] 。NAFLD 是由肝中脂质代谢失衡 性肝损伤和大鼠肝纤维化均有较好的改善作用 [13－14] ，但
引起、超过5％肝细胞发生脂肪变性的疾病，若不进行相 其是否可改善 NAFLD 尚不明确。鉴于此，本研究拟通
应治疗，NAFLD可发展为肝硬化或肝癌 [3－4] 。NAFLD的 过高脂饮食喂养大鼠以诱导建立 NAFLD 模型，以水飞
[15]
发病机制复杂并伴随其他代谢系统的疾病，目前在临床 蓟宾为阳性对照药 ，研究 4-羟基-苯并噁唑-2-酮对
上尚无特效治疗药物 [5－6] 。因此，积极开发新型的天然 NAFLD 模型大鼠炎症和凋亡信号通路的影响，以期为
药物来缓解该疾病的发生发展，已成为当今肝病领域研 该化合物的后续开发应用提供参考。
究的热点。 1 材料
Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核 1.1 主要仪器
因子κB（NF-κB）是典型的炎症信号通路。有研究指出， 本研究所用主要仪器有：BS-2000 型全自动生化分
抑制该通路活化可减少中性粒细胞等炎症介质的释放， 析仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司），Nano-
从而改善肝损伤 [7－8] 。另有研究发现，促凋亡蛋白B细胞 drop2000 型 超 微 量 分 光 光 度 计（美 国 Thermo Fisher
淋巴瘤 2（Bcl-2）相关 X 蛋白（Bax）、胱天蛋白酶 3（cas- Scientific公司），SpectraMaxPlus384型酶标仪（香港分子
pase-3）和抑凋亡蛋白 Bcl-2 在 NAFLD 进展中扮演着不 仪器有限公司），BX53 型显微镜（日本 Olympus 公司），
可替代的角色 [9－10] 。由此推测，可通过抑制炎症和凋亡 Micro CL17R 型高速低温离心机（德国 Thermoiec 公
这两条信号通路，来改善NAFLD。 司），OdysseyClx 型双色红外荧光成像仪（美国 Licor 公
老鼠簕 Acanthus ilicifolius L.为爵床科老鼠簕属的 司），EM20-7-10 型电泳仪、SWB-20L-1 型恒温摇床（美
灌木植物，常年生长在潮间带、亚热带、海岸带和热带地 国 Major Science 公司），RM2255 型自动轮转切片机（德
区，是红树林植物群落中的重要品种之一，主要含有黄 国Leica公司）。

中国药房 2021年第32卷第11期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 11 ·1299 ·