Page 77 - 《中国药房》2021年第9期

2.4 UPLC指纹图谱研究 较好、峰形对称、峰面积较大，故以其为参照峰（S），计算
2.4.1 方法学考察 得各共有峰相对保留时间的RSD为0～0.68％（n＝20），
（1）精密度试验：精密吸取同一供试品溶液（编号 相对峰面积的 RSD 为 0～62.35％（n＝20），如表 2、表 3
S1）适量，按“2.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记 所示。
录色谱图。结果，各主要成分相对峰面积的 RSD 为 表2 20批有柄石韦指纹图谱的相对保留时间
0.15％～2.63％，相对保留时间的RSD为0.02％～0.17％， Tab 2 Relative retention time of fingerprint of 20
表明该方法精密度良好。 batches of P. petiolosa
（2）稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液（编号 编号 峰1 峰2 峰3 峰4（S） 峰5 峰6 峰7 峰8 峰9
S1）适量，按“2.1”项下色谱条件分别于室温下0、2、4、8、 S1 0.489 0.836 0.909 1.000 1.194 2.704 2.744 2.798 2.880
S2 0.487 0.834 0.912 1.000 1.195 2.733 2.775 2.830 2.914
12、24 h进样测定，记录色谱图。结果，各主要成分相对 S3 0.488 0.835 0.911 1.000 1.195 2.729 2.771 2.825 2.909
峰面积的 RSD 为 0.26％～2.92％，相对保留时间的 RSD S4 0.487 0.834 0.911 1.000 1.194 2.728 2.770 2.825 2.908
为 0.04％～0.26％，表明供试品溶液在室温下 24 h 内稳 S5 0.487 0.834 0.910 1.000 1.195 2.729 2.771 2.825 2.907
S6 0.488 0.835 0.909 1.000 1.194 2.712 2.753 2.806 2.888
定性良好。
S7 0.489 0.835 0.907 1.000 1.194 2.699 2.739 2.792 2.873
（3）重复性试验：取同一批有柄石韦样品（编号S1）6 S8 0.487 0.834 0.911 1.000 1.194 2.737 2.779 2.833 2.917
份，每份约 0.5 g，分别按“2.3”项下方法制备供试品溶 S9 0.488 0.834 0.909 1.000 1.194 2.707 2.748 2.801 2.884
S10 0.490 0.835 0.909 1.000 1.194 2.706 2.747 2.800 2.882
液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。结
S11 0.490 0.836 0.907 1.000 1.194 2.687 2.727 2.780 2.860
果，各主要成分相对峰面积的 RSD 为 0.22％～1.42％， S12 0.490 0.836 0.907 1.000 1.194 2.692 2.732 2.785 2.864
相对保留时间的 RSD 为 0.05％～0.20％，表明该方法重 S13 0.488 0.834 0.908 1.000 1.194 2.701 2.741 2.794 2.875
S14 0.488 0.835 0.909 1.000 1.195 2.701 2.742 2.795 2.876
复性良好。
S15 0.490 0.835 0.909 1.000 1.195 2.700 2.741 2.794 2.876
2.4.2 UPLC指纹图谱的建立 S16 0.488 0.835 0.907 1.000 1.193 2.685 2.725 2.777 2.857
取 20 批有柄石韦药材样品粉末，分别按“2.3”项下 S17 0.488 0.835 0.908 1.000 1.195 2.696 2.737 2.789 2.869
方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测 S18 0.489 0.834 0.908 1.000 1.194 2.695 2.735 2.787 2.868
S19 0.487 0.833 0.907 1.000 1.194 2.692 2.731 2.783 2.862
定，记录色谱图。将所得数据导入《中药色谱指纹图谱 S20 0.490 0.835 0.907 1.000 1.193 2.687 2.727 2.779 2.859
相似度评价系统》（2012版）进行分析，以编号S1的样品 平均值 0.488 0.835 0.909 1.000 1.194 2.706 2.747 2.800 2.881
图谱为参照（因其色谱峰峰形较明显、峰信号强度适 RSD，％ 0.23 0.08 0.17 0.00 0.06 0.61 0.63 0.65 0.68
中），设置时间窗宽度为0.1 s，采用多点校正法进行色谱 表3 20批有柄石韦指纹图谱的相对峰面积
峰匹配，生成 20 批样品的 UPLC 叠加指纹图谱，采用平 Tab 3 Relative peak area of fingerprint of 20 batches
均数法生成对照指纹图谱（R），如图1所示。 of P. petiolosa
4（S） 编号 峰1 峰2 峰3 峰4（S） 峰5 峰6 峰7 峰8 峰9
760
720 S1 0.165 0.031 0.010 1.000 0.160 0.041 0.078 0.028 0.072
680 1 9 S2 0.169 0.035 0.013 1.000 0.175 0.048 0.082 0.031 0.080
7
640 2 3 5 6 8 S3 0.154 0.031 0.010 1.000 0.164 0.039 0.069 0.030 0.071
600 R S4 0.261 0.032 0.015 1.000 0.249 0.076 0.095 0.040 0.091
S20
560
S19 S5 0.271 0.033 0.014 1.000 0.276 0.084 0.088 0.043 0.092
520 S18
480 S17 S6 0.267 0.031 0.014 1.000 0.241 0.068 0.093 0.038 0.082
S16
440 S15 S7 0.158 0.027 0.026 1.000 0.166 0.035 0.094 0.086 0.105
mV 400 S14 S8 0.145 0.038 0.010 1.000 0.191 0.033 0.078 0.071 0.122
U， 360 S13
320 S12 S9 0.153 0.034 0.004 1.000 0.191 0.028 0.072 0.071 0.105
S11
280 S10 S10 0.157 0.036 0.010 1.000 0.210 0.041 0.084 0.065 0.128
240 S9 S11 0.269 0.048 0.010 1.000 0.261 0.099 0.098 0.030 0.110
200 S8 S12 0.289 0.035 0.013 1.000 0.268 0.088 0.104 0.042 0.119
S7
160 S6 S13 0.287 0.041 0.033 1.000 0.311 0.104 0.113 0.039 0.139
120 S5
S4 S14 0.143 0.035 0.022 1.000 0.159 0.038 0.102 0.035 0.098
80
S3
40 S2 S15 0.129 0.034 0.031 1.000 0.149 0.034 0.113 0.045 0.108
0 S1 S16 0.185 0.032 0.026 1.000 0.200 0.065 0.095 0.052 0.107
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 S17 0.134 0.031 0.026 1.000 0.151 0.039 0.092 0.044 0.095
t，min
S18 0.162 0.031 0.040 1.000 0.200 0.055 0.090 0.078 0.134
图1 20批有柄石韦的UPLC叠加指纹图谱 S19 0.160 0.030 0.043 1.000 0.196 0.047 0.096 0.096 0.154
Fig 1 UPLC superimposed fingerprint of 20 batches S20 0.145 0.025 0.052 1.000 0.202 0.045 0.075 0.078 0.134
平均值 0.190 0.033 0.021 1.000 0.206 0.055 0.090 0.052 0.107
of P. petiolosa
RSD，％ 30.43 14.41 62.35 0.00 22.69 42.28 13.72 40.37 21.59
由图1可知，20批有柄石韦共含有9个共有峰，其峰 2.4.3 共有峰指认
面积之和占总峰面积的 90％以上。因为峰 4 的分离度 取“2.2”项下混合对照品溶液适量，按“2.1”项下色
中国药房 2021年第32卷第9期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 9 ·1095 ·