Page 68 - 《中国药房》2021年第9期

IRS-1 mRNA，MGF各剂量组Akt mRNA，以及阳性对照
p-AMPK 62 kDa
组和MGF低、中剂量组GLUT4 mRNA的相对表达量均
显著升高（P＜0.05或P＜0.01），详见表4。 AMPK 62 kDa
表3 MGF对IR-HepG2细胞中APN、AdipoR2、APPL1、 β-actin 45 kDa
AMPK mRNA相对表达量的影响（x±±s，n＝3） 正常组 模型组 阳性对照 MGF高 MGF中 MGF低
组组 剂量组 剂量组 剂量组
Tab 3 Effects of MGF on mRNA expression of APN， 图 1 MGF 对 IR-HepG2 细胞 AMPK 蛋白磷酸化水平
AdipoR2，APPL1 and AMPK in IR-HepG2 影响的电泳图
cells（x±±s，n＝3） Fig 1 Electrophoretogram of the effects of MGF on
组别 APN AdipoR2 APPL1 AMPK the phosphorylation level of AMPK protein in
正常组 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.00 IR-HepG2 cells
模型组 0.33±0.01 ＊＊ 0.83±0.03 ＊＊ 0.43±0.05 ＊＊ 0.44±0.06 ＊
阳性对照组 0.46±0.01 ## 0.95±0.05 # 0.64±0.06 # 0.68±0.06 # 表 5 MGF 对 IR-HepG2 细胞 AMPK 蛋白磷酸化水平
MGF高剂量组 0.47±0.10 1.01±0.08 ## 0.65±0.19 # 0.60±0.26 的影响（x±±s，n＝3）
MGF中剂量组 0.51±0.11 0.96±0.07 # 0.87±0.09 ## 0.85±0.16
MGF低剂量组 0.59±0.02 ## 1.00±0.09 ## 0.85±0.13 ## 0.80±0.08 # Tab 5 Effects of MGF on the phosphorylation level of
#
＊
注：与正常组比较， P＜0.05， P＜0.01；与模型组比较，P＜ AMPK protein in IR-HepG2 cells（x±±s，n＝3）
＊ ＊
##
0.05，P＜0.01 组别 p-AMPK/AMPK比值 组别 p-AMPK/AMPK比值
Note：vs. normal group， P＜0.05， P＜0.01；vs. model group， 正常组 1.00±0.00 MGF高剂量组 1.58±0.18 ##
＊
＊ ＊
模型组 0.76±0.06 ＊＊ MGF中剂量组 1.67±0.46 ##
# ##
P＜0.05，P＜0.01
阳性对照组 1.20±0.18 # MGF低剂量组 1.78±0.23 ##
表 4 MGF 对 IR-HepG2 细 胞 中 IRS-1、Akt、GLUT4
#
＊＊
##
注：与正常组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01
mRNA相对表达量的影响（x±±s，n＝3） Note：vs. normal group， ＊ ＊ P＜0.01；vs. model group，P＜0.05，
#
Tab 4 Effects of MGF on mRNA expression of IRS-1， ## P＜0.01
Akt and GLUT4 in IR-HepG2 cells（x ±± s， 用机制的理想模型 ，故本研究参考文献[13]采用 1
[15]
n＝3） mmol/L PA+2 mmol/L OA联合培养建立IR细胞模型。
组别 IRS-1 Akt GLUT4 本课题组前期研究表明，以 DMSO 作为溶剂，MGF
正常组 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.00 最大溶解浓度为 250 mmol/L，DMSO 体积分数在 0.2％
模型组 0.74±0.04 ＊ 0.96±0.10 0.27±0.11 ＊＊
阳性对照组 0.88±0.07 # 1.01±0.13 0.66±0.14 # （即500 μmol/L）以下对细胞毒性影响小；此外与正常组
MGF高剂量组 0.77±0.10 1.22±0.11 # 0.52±0.06 比较，MGF 高、中、低剂量（500、250、125 μmol/L）对
MGF中剂量组 0.80±0.09 1.30±0.13 ## 0.69±0.24 #
MGF低剂量组 1.02±0.03 ## 1.36±0.10 ## 0.79±0.17 ## HepG2细胞的存活率均无显著影响，且细胞存活率均在
＊ ＊
＊
#
注：与正常组比较， P＜0.05， P＜0.01；与模型组比较，P＜ 90％以上，故本研究选择上述 3 个浓度进行后续实验。
0.05，P＜0.01 结果显示，MGF 高、中、低剂量均可显著提高 IR-HepG2
##
＊
＊ ＊
Note：vs. normal group， P＜0.05， P＜0.01；vs. model group， 细胞的校正葡萄糖消耗量，其中以高剂量作用效果相对
# P＜0.05，P＜0.01 最强；同时，其还可显著降低 IR-HepG2 细胞中 TG、TC
##
3.5 MGF对IR-HepG2细胞AMPK蛋白磷酸化水平的 的含量，提示MGF可调整IR-HepG2细胞的糖脂代谢异
影响 常。值得注意的是，经 MGF 干预后，各剂量组细胞 TG
与正常组比较，模型组细胞AMPK蛋白磷酸化水平 含量无明显的剂量依赖趋势，且从具体数据上看，MGF
显著降低（P＜0.01）；与模型组比较，各药物组细胞 低剂量下调 TG 含量的效果较明显。有研究指出，APN
AMPK 蛋白磷酸化水平均显著升高（P＜0.05 或 P＜ 可降低肝脏组织中 TG 的含量并上调胰岛素信号的转
0.01），详见图1、表5。 导，提示 TG 含量与 APN 的表达水平有关 。经药物干
[16]
4 讨论 预后，MGF 低剂量组细胞内 APN mRNA 的相对表达量
T2DM是一种慢性代谢性疾病，被认为是全世界第 更高，这可能是低剂量组细胞内TG含量更低的原因。
五大死亡原因，其主要表现是患者糖脂代谢紊乱 。IR AMPK是一种细胞内能量感受器和调节因子，已被
[14]
是T2DM发生的重要因素，其主要特征是胰岛素作用的 证明与 IR、肝脏脂肪病变、糖尿病肾病及糖尿病心肌病
靶组织对葡萄糖的摄取和利用减少 。肝脏作为胰岛素 的发生密切相关 [17－19] 。p-AMPK 是 AMPK 的磷酸化形
[2]
作用的主要靶组织，是维持糖脂代谢稳定的重要器 式，p-AMPK/AMPK 比值能反映 AMPK 的活化程度；
[2]
官 。HepG2细胞为人肝癌细胞，由其构建的IR细胞模 AMPK磷酸化的增加可有助于AMPK信号通路的激活，
型是学界公认的可用于研究 IR 发生机制和降糖药物作 从而有利于抗IR作用的发挥 。有研究表明，MGF对糖
[4]

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