Page 49 - 《中国药房》2021年第9期

min，取上层血清，于－20 ℃保存，备测。取血后，各组小 表3 各组小鼠胃溃疡指数的测定结果（x±±s，n＝10）
鼠均脱颈椎处死，剖腹取全胃，沿胃大弯剪开，用生理盐 Tab 3 Determination results of gastric ulcer index in
水洗净，备用。 mice of each group（x±±s，n＝10）
2.5.4 小 鼠 胃 组 织 观 察 和 胃 溃 疡 指 数 的 测 定 取 组别 溃疡指数 组别 溃疡指数
空白组 良附丸高剂量组 10.98±5.29 ##
“2.5.3”项下各组小鼠的胃组织进行肉眼观察，并计算其
模型组 23.15±6.87 良附丸中剂量组 12.98±6.83 #
胃溃疡指数。采用 GraphPad Prime 8.0.1 软件对数据进 雷尼替丁组 9.98±2.29 ## 良附丸低剂量组 15.28±5.51
行统计分析，计量资料以 x±s 表示，组间比较采用非配 注：与空白组比较， P＜0.05， P＜0.01；与模型组比较，P＜
#
＊ ＊
＊
##
对 t 检验；P＜0.05 为差异具有统计学意义（以下各项测 0.05，P＜0.01
Note：vs. control group， P＜0.05， P＜0.01；vs. model group，
＊
＊ ＊
定的统计学方法相同）。结果，空白组小鼠胃黏膜完整，
##
# P＜0.05，P＜0.01
无黏膜糜烂迹象；模型组小鼠胃组织可见出血性坏死和
钠-聚丙烯酰胺电泳，然后转膜，以 5％脱脂牛奶室温封
溃疡性血斑；与模型组比较，雷尼替丁组和良附丸各剂
闭 1.5 h；以 TBST 洗 涤 3 次 ，分 别 加 入 TP53、c-Jun、
量组小鼠胃黏膜损伤均减轻，溃疡指数均显著降低（P＜
p38 MAPK、Akt、p-Akt、TNF-α、GAPDH 一抗（稀释度均
0.05或P＜0.01，低剂量组除外），详见图5、表3。
为1 ∶ 1 000），4 ℃下孵育过夜；以TBST洗涤3次，加入二
抗（稀释度为1∶6 000），室温孵育2 h；以TBST洗涤3次，
经 ECL 化学发光液显色后，于凝胶成像分析系统上成
像。使用 Image J 1.8.0 软件分析，以目标蛋白与内参
（GAPDH）蛋白条带的灰度值的比值作为目标蛋白的表
达水平。上述操作重复3次。结果，与空白组比较，模型
组小鼠胃组织中 TP53、c-Jun、p38 MAPK、Akt、p-Akt 和
A.空白组 B.雷尼替丁组
TNF-α 蛋 白 的 表 达 水 平 均 显 著 升 高（P＜0.05 或 P＜
0.01）；与模型组比较，雷尼替丁组和良附丸高剂量组小
鼠胃组织中上述 5 种蛋白的表达水平均显著降低（P＜
0.05或P＜0.01），详见图6、表4。

Akt 60 kDa

p-Akt 56 kDa
C.模型组 D.良附丸高剂量组

TP53 53 kDa

p38-MAPK 40 kDa

c-Jun 37 kDa

TNF-α 17 kDa
E.良附丸中剂量组 F.良附丸低剂量组
图5 各组小鼠胃组织观察结果
GADPH 36 kDa
Fig 5 Results of observation of gastric tissue in mice
空白组 模型组 雷尼替丁组 良附丸高剂量组
of each group
图 6 各 组 小 鼠 胃 组 织 中 TP53、c-Jun、p38 MAPK、
2.5.5 小 鼠 胃 组 织 中 TP53、c-Jun、p38 MAPK、Akt、 Akt、p-Akt和TNF-α蛋白表达的电泳图
p-Akt和TNF-α蛋白表达水平的检测 采用Western blot Fig 6 Electrophoretogram of protein expression of
TP53，c-Jun，p38 MAPK，Akt，p-Akt and
法检测。取“2.5.3”项下的小鼠胃组织（良附丸组只测定
TNF-α in gastric tissues of mice in each group
高剂量组）适量，于冰上研碎至匀浆后，在4 ℃条件下以
13 000 r/min离心10 min，取部分上清液，用BCA试剂盒 3 讨论
测定蛋白浓度。蛋白经煮沸变性后，进行十二烷基硫酸 良附丸能够治疗肝郁气滞、胃有寒凝、脘腹疼痛、胸

中国药房 2021年第32卷第9期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 9 ·1067 ·