Page 50 - 《中国药房》2021年第9期
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表 4   各 组 小 鼠 胃 组 织 中 TP53、c-Jun、p38 MAPK、          转移到细胞核后，主要参与机体细胞的生长、增殖分化、
              Akt、p-Akt 和 TNF-α蛋白表达水平的测定结果                  凋亡及炎症等重要过程，而且活化的p38 MAPK可以调
              （x±±s，n＝10）                                   控下游多种酶及转录因子的基因表达，促使局部组织发
        Tab 4 Protein expression of TP53， c-Jun， p38        生急性炎症、凋亡等病理改变            [22－23] 。
                MAPK，Akt，p-Akt and TNF-α in gastric tis-        相关研究发现，胃溃疡模型大鼠胃黏膜中的 PI3K、
                sues of mice in each group（x±±s，n＝10）       Akt mRNA和蛋白的表达水平均升高，经药物干预后，大
                                                                                                  [24]
         组别       TP53  c-Jun  p38 MAPK  Akt  p-Akt  TNF-α  鼠胃黏膜中的上述指标的表达水平均降低 。由此说
         空白组    0.358±0.004 0.614±0.005 0.282±0.004  0.428±0.005 0.318±0.003 0.137±0.005  明，PI3K/Akt信号通路可参与调控胃溃疡模型大鼠的胃
                                         ＊
                     ＊＊
                            ＊＊
         模型组    1.284±0.005 1.252±0.012 1.136±0.005 ＊＊  1.223±0.008 0.998±0.009 0.965±0.008 ＊＊
                                                ＊＊
                            ##
         雷尼替丁组  0.343±0.005 0.592±0.006 0.374±0.004 ##  0.536±0.006 0.369±0.004 0.256±0.004 ##  黏膜病变。
                     ##
                                                ##
                                         ##
         良附丸高剂量组 0.482±0.004 0.868±0.005 0.4213±0.003 0.678±0.006 0.497±0.004 0.298±0.005 ##  研究发现，TNF-α由巨噬细胞和淋巴细胞等产生，能
                                         ##
                                                ##
                     ##
                            #
                                   ##
            注：与空白组比较， P＜0.05， P＜0.01；与模型组比较，P＜
                                                     #
                                 ＊ ＊
                          ＊
                                                            够刺激线粒体，还可以激活黄嘌呤氧化酶产生超氧阴离
        0.05，P＜0.01
            ##
                                                            子，进而刺激TLR（Toll样受体）蛋白，激活NF-κB转录因
                            ＊
            Note：vs. control group， P＜0.05， ＊ ＊  P＜0.01；vs. model group，
                                                            子 ；活 化 的 NF-κ B 能 促 进 下 游 靶 细 胞 释 放 更 多 的
               ##
        # P＜0.05，P＜0.01
                                                            TNF-α 。在应激性状态下，TNF-α能引起大量中性粒
                                                                  [25]
        胁胀痛、痛经等疾病 ，其在临床上的疗效已被广泛认
                          [6]
                                                            细胞聚集，从而使得胃黏膜受损，进一步导致溃疡的形
        可，但其作用机制尚不明确 。为了进一步研究良附丸
                                [16]
                                                            成 。相关研究表明，胃溃疡模型大鼠胃黏膜中 NF-κB
                                                              [26]
        治疗胃溃疡的作用机制，本文先应用网络药理学方法对
                                                            和 TNF-α的蛋白的表达水平均升高；经药物干预后，大
        良附丸中的活性成分进行筛选，并预测其治疗胃溃疡的
                                                            鼠胃黏膜中的上述指标的表达水平均降低                    [27－28] 。由此
        关键靶点和信号通路；然后，基于关键靶点的筛选结果，
                                                            说明，NF-κB 或 TNF 信号通路可参与调控胃溃疡的
        通过动物实验进行验证，以期为后续良附丸作用机制的
                                                            发生。
        研究提供理论基础。
                                                                本研究对小鼠灌胃良附丸药液后，再一次性灌胃乙
            本研究结果显示，从良附丸中共筛选出 9 个活性成
                                                            醇，以复制胃溃疡模型小鼠。结果发现，与模型组比较，
        分，包括异鼠李素、山柰酚、槲皮素等。相关研究表明，                           良附丸可降低小鼠胃组织中 TP53、c-Jun、p38 MAPK、
        槲皮素和山柰酚可显著改善大鼠经乙醇、盐酸、吲哚美                            Akt、p-Akt 和 TNF-α蛋白的表达水平。这提示良附丸可
        辛、幽门结扎等因素诱导的胃溃疡，且可有效减轻其氧化                           能通过抑制 MAPK、NF-κB、TNF 和 PI3K/Akt 等多条通
        应激，减少胃酸的分泌，从而起到抗胃溃疡的作用                     [17－19] 。  路共同改善胃溃疡，由此也验证了网络药理学预测的良
        这提示黄酮类化合物对胃溃疡有一定的治疗作用。                              附丸中活性成分对于胃溃疡靶点的作用。
            本 研 究 通 过 TCMSP、OMIM、DisGeNET 和 Gene-               综上所述，本文通过网络药理学筛选出了良附丸治
        cards 等数据库共筛选出良附丸活性成分和胃溃疡的共                         疗胃溃疡的 9 个活性成分和 166 个靶点，这些靶点可通
        同基因 166 个；进一步通过 STRING 数据库和 Cytospace               过多种信号通路共同发挥治疗作用；经动物实验验证后
        软件筛选出 15 个核心靶点；然后通过 DAVIAD 网站进                      发现，良附丸可通过抑制 MAPK、NF-κB、TNF 和 PI3K/
        行 GO 功能和 KEGG 通路富集分析，构建良附丸活性成                       Akt等多条通路，抑制炎症因子的表达，从而发挥改善胃
        分-胃溃疡靶点-KEGG通路网络图；并依据Degree值，筛                      溃疡的作用。
        选 了 排 名 前 5 位 的 靶 点 ，包 括 TP53、c-Jun、Akt1、           参考文献
        MAPK1、TNF-α。                                        [ 1 ]  DARIANE T S，RENATA F R，NATALIA M M，et al. Na-
            相关研究发现，TP53蛋白表达的升高会引起胃黏膜                             tural deep eutectic solvent（NADES）-based blueberry ex-
        相关的炎症反应，从而引发溃疡；此外，TP53还可调控细                              tracts protect against ethanol-induced gastric ulcer in
                                                                 rats[J]. Food Res Int，2020，138（Pt A）：109718.
        胞周期 G1、G2期并介导凋亡，从而发挥调节细胞生长和
                                                            [ 2 ]  ALAZZOUNI A S，FATHALLA A S，GABRIM S，et al.
                   [20]
        增殖的作用 。MAPK 通路是细胞内信息传递的主要
                                                                 Role of bone marrow derived-mesenchymal stem cells
        途径，参与了细胞外信号从细胞表面到内部的信号传导
                                                                 against gastric ulceration：histological，immunohistoche-
        过程；当 MAPK 通路激活后，可促使 ERK 和 p38 MAPK
                                                                 mical and ultrastructural study[J]. Saudi J Biol Sci，2020，
                        [13]
        转移到细胞核中 。一方面，活化的 ERK1/2 可促进                              27（12）：3456-3464.
        c-Jun 的表达，进而调节 Bcl-2 家族促凋亡成员的线粒体                    [ 3 ]  李朝芬.奥美拉唑治疗胃溃疡的研究进展[J].世界最新医
        透化作用来上调黏膜细胞凋亡 ；另一方面，p38 MAPK                             学信息文摘，2017，17（41）：77.
                                   [21]
        ·1068 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 9                                   中国药房    2021年第32卷第9期
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