Page 78 - 《中国药房》2021年8期
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factor level，the protein expression of p-NF-κB p65 and p-IκB were significantly reduced，while the protein expression of IκB was
        significantly increased（P＜0.05）. CONCLUSIONS：ZDS can improve CIA model rats to some extent，and its mechanism may be
        related to the inhibition of NF-κB signaling pathway.
        KEYWORDS     Rheumatoid arthritis；Codonopsis tralictrifolia；Extract；Collagen-induced arthritis；NF-κB signaling pathway；Rat


            类风湿性关节炎（RA）是一种常见的慢性、炎症性、                        授鉴定为真品；地塞米松注射液（批号 2006031，规格
        系统性自身免疫性疾病，以关节及其组织非化脓性炎症                            1 mL∶2 mg）购自西安高科陕西金方药业公司；鸡Ⅱ型胶
        为主要特征，终致关节的各种组织以及多脏器损害 。                            原 、弗 氏 完 全 佐 剂 、弗 氏 不 完 全 佐 剂（批 号 分 别 为
                                                      [1]
        RA的基本病理特征为关节慢性滑膜炎、滑膜细胞增殖、                           SLBT1422、SLBT1714、SLBV4134）均购自美国Sigma公
        炎性细胞浸润及血管翳的形成，以及可侵及下层的软骨                            司；苏木精-伊红（HE）染色试剂盒（批号MB9898Oct- 23D）
        或骨，可造成关节破坏甚至功能丧失                [2－3] 。RA的发病机       购自大连美仑生物有限公司；白细胞介素 1β（IL-1β）、
        制复杂，涉及机体的多条信号转导途径，其中核因子κB                           肿 瘤 坏 死 因 子 α（TNF-α）、IL-6 酶 联 免 疫 吸 附 测 定
        （NF-κB）被认为是重要的炎症信号通路，对 RA 的发生                      （ELISA）试剂盒和总蛋白提取试剂盒（批号分别为
                                 [4]
        与发展具有核心的调节作用 。目前，临床主要用于治                            20200512、20200516、20200601、20190816）均购自北京
        疗RA的药物包括非甾体抗炎药、抗风湿药、糖皮质激素                           索莱宝科技有限公司；兔源 NF-κB p65、磷酸化 NF-κB
        类和生物制剂类药物，这些药物虽可缓解疾病症状，但                            p65（p-NF-κB p65）、NF-κB 抑制蛋白（IκB）、磷酸化 IκB
        不能控制病情的进展，且其除了消化道、肾脏和心血管                           （p-IκB）、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）多克隆抗体
        系统副作用外，还可引发感染、免疫缺陷、高血糖症等不                          （货号分别为bs-23216R、bs-3485R、bs-10246R、bs-2513R、
                             [5]
        良反应，不宜长时间使用 。                                       bsm-0978M）均购自北京博奥森生物有限公司；辣根过
            藏党参始载于《晶珠本草》，为桔梗科植物长花党参                         氧化物酶（HRP）标记的山羊抗兔免疫球蛋白G（IgG）二
        Codonopsis thalictrifolia Wall. var. mollis Chipp.的全草，  抗（批号 2019001004）购自北京中杉金桥生物技术有限
        其味苦、辛、涩，性凉，具有消炎散肿、祛风除湿等功效，                          公 司 ；二 喹 啉 甲 酸（BCA）蛋 白 定 量 试 剂 盒（批 号
        主治风湿性关节炎、疮疖痛肿、麻风病等                 [6－7] 。藏党参的      121017200621）购自碧云天生物技术有限公司；其余试
        主要活性成分包括生物碱、酚性物质、挥发油、有机酸、                           剂均为分析纯，水为蒸馏水。
                           [8]
        甾醇和三萜类化合物 。有研究表明，以藏党参为主药                            1.3  动物
        的罗堆多吉颗粒可通过抑制黄嘌呤氧化酶的活性而降                                 健康 SPF 级 SD 大鼠 48 只，雌雄各半，5～6 周龄，体
        低血尿酸水平，从而起到治疗痛风的作用 。此外，藏党                           质量 140～170 g，购自辽宁长生生物技术有限公司，动
                                            [9]
                                               [10]
        参还是藏医药中治疗风湿性关节肿痛的要药 ，但其活                            物生产许可证号为 SCXK（辽）2020-0001。大鼠购入后
        性成分及作用机制尚未十分明确。本课题组前期研究                             分笼饲养于辽宁中医药大学实验动物中心实验室内，实
        发现，藏党参乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分对胶原诱                            验室温度为20～25 ℃、相对湿度为55％～65％，饲养期
        导性关节炎（CIA）模型大鼠具有明显的改善作用。基于                          间自由饮水、摄食。适应性饲养7天后进行实验。本研
        此，本研究拟通过建立 CIA 大鼠模型，从 NF-κB 信号通                     究中所有实验方案均得到了辽宁中医药大学实验动物
        路角度探讨藏党参提取物治疗 RA 的可能作用机制，为                          福利伦理委员会的批准。
        阐明藏党参对RA的疗效及其药效物质基础提供参考。                            2 方法
        1 材料                                                2.1 藏党参提取物的制备
        1.1 主要仪器                                                称取藏党参饮片300 g，粉碎，过40目筛，以10倍量
            Ti-S 型 荧 光 倒 置 显 微 镜 购 自 日 本 Nikon 公 司 ；       （mL/g）30％乙醇浸泡 60 min，随后加热回流提取 2 次，
        RM2235型石蜡切片机购自德国Leica公司；HBS-1096A                   每次 2 h；滤过，合并 2 次滤液，减压回收溶剂，得浸膏
        型酶标仪购自南京德铁实验设备有限公司；752型紫外-                          78.42 g，得率为26.14％。将浸膏用等量乙酸乙酯萃取2
        可见分光光度计购自上海舜宇恒平科学仪器有限公司；                            次，合并萃取液，减压回收溶剂，得浸膏19.50 g。将浸膏
        Mini-Sub Cell GT Cell型Western blot电泳仪和转膜仪购          用水溶解制成终质量浓度为1.0 g/mL（以生药量计）的药
        自美国 Bio-Rad 公司；4100 型凝胶成像系统购自上海天                    液，置于 4 ℃冰箱中保存。临用时取出，用水稀释成不
        能科技有限公司。                                            同质量浓度的药液。
        1.2  主要药品与试剂                                        2.2 分组、造模与给药
            藏党参饮片（批号201902411）购自西藏白萨工贸有                         取鸡Ⅱ型胶原20 mg溶于0.1 mol/L乙酸溶液10 mL
        限公司，经西藏自治区藏医院藏药研究所扎西次仁教                             中，使前者终质量浓度为2 mg/mL，于4 ℃下以磁力搅拌


        ·968 ·   China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 8                                   中国药房    2021年第32卷第8期
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