Page 38 - 《中国药房》2021年第6期

反映各组小鼠肺组织中的病毒载量。各基因的引物序 汤组小鼠初始体质量百分率和肛温均显著升高（P＜
列及产物长度见表1。 0.05 或 P＜0.01）。给药期间各组小鼠的初始体质量百
表1 各基因的引物序列及产物长度 分率、肛温变化趋势见图1。
Tab 1 Primer sequence and amplification length of 表 2 正常组和模型组小鼠自主活动次数和 5％％负重游
each gene 泳时间比较结果（x±±s，n＝12）

基因名称 引物序列（5′→3′） 产物长度，bp Tab 2 Comparison of the times of independent activi-
GAPDH 上游：TGCACCACCAACTGCTTAG 140 ties and 5％％ weight-bearing swimming time be-
下游：GGATGCAGGGATGATGTTC
M基因 上游：CTTCTAACCGAGGTCGAAAC 189 tween normal group and model group（x ±± s，
下游：CGTCTACGCTGCAGTCCTC n＝12）
TLR3 上游：TTGTCTTCTGCACGAACCTG 204
分组 自主活动，次/10 min 5％负重游泳时间，min
下游：CGCAACGCAAGGATTTTATT
正常组 354.25±69.15 58.75±1.58
TLR7 上游：GGTGGCAAAATTGGAAGATCC 111 造模组 292.88±38.58 ＊ 31.26±3.03 ＊
下游：AGCTGTATGCTCTGGGAAAGGTT
＊
MyD88 上游：CAGCGAGGTTTGCATCTTCTT 106 注：与正常组比较，P＜0.05
＊
下游：TCACTTTCTTGGGGACTCAGG Note：vs. normal group， P＜0.05
Caspase-3 上游：GTGTCCATGCTCACGAAAGA 143 105
下游：CCAGGAGGACCGTCAGATTA 正常组
100 模型组
2.8 小鼠心脏组织中Cyt-CO活性和Cyt-C含量测定 ％ ## ## 阳性药组
2.8.1 Cyt-CO活性 取小鼠心脏组织10 mg，加入60 μL 95 ＊ ## ## 麻黄细辛附子汤组
清理液（Reagent A）清洗 1 次，移入液氮罐过夜，次日取 初始体重百分率， 90 ＊＊ ## ##
出并研磨，然后加入 预 冷 的 500 μL 裂 解 液（Reagent 85 ＊＊
B），在 4 ℃下以 13 000 r/min 离心 5 min，吸取上清液。 80 ＊＊
＊＊
采用 BCA 法测定蛋白浓度后，按照 Cyt-CO 活性测定试 75
0 1 2 3 4 5 6
剂盒方法以紫外-可见分光光度计检测小鼠心脏组织中 给药天数，d
A.初始体质量百分率
Cyt-CO的活性。
40 正常组
2.8.2 Cyt-C 含量 按每 10 mg 心脏组织加入磷酸盐缓
模型组
冲液（PBS）90 μL 的量制备组织匀浆，充分研磨后，以 38 阳性药组
3 000 r/min 离心 30 min，取上清液。按照 Cyt-C ELISA ℃ 36 ＊ ＊ # # # 麻黄细辛附子汤组
试剂盒说明书方法以酶标仪检测小鼠心脏组织中Cyt-C 肛温， 34 # # #
的含量。 ＊ ＊
32 ＊
2.9 统计学方法 ＊
采用SPSS 21.0软件对数据进行统计分析。实验数 30
0 1 2 3 4 5 6 7
据以x±s表示，造模期间正常组和造模组大鼠的自主活 给药天数，d
动次数和 5％负重游泳时间的组间比较采用独立样本 t B.肛温
#
＊ ＊
＊
检验；给药后各指标的组间比较采用单因素方差分析和 注：与正常组比较， P＜0.05， P＜0.01；与模型组比较，P＜
##
LSD检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。 0.05，P＜0.01
＊
Note：vs. normal group， P＜0.05， P＜0.01；vs. model group，
＊ ＊
3 结果 # P＜0.05，P＜0.01
##
3.1 小鼠一般情况观察结果
图 1 给药期间各组小鼠的初始体质量百分率、肛温变
3.1.1 一般体征 正常组小鼠活泼好动，皮毛光亮顺
化趋势（x±±s，n＝12）
滑，反应灵敏，精神状态良好。造模组小鼠行动迟缓，精
Fig 1 The changes trend of the percentage of initial
神倦怠，皮毛湿软，形体消瘦。与正常组比较，造模组小
body weight and anal temperature of mice in
鼠自主活动次数显著减少（P＜0.05），5％负重游泳时间
each group（x±±s，n＝12）
显著缩短（P＜0.05），详见表 2。接种病毒后，造模组小
鼠初期表现为呼吸短促、偶尔打喷嚏，后期出现静卧少 3.2 小鼠脏器指数测定结果
动、呼吸困难等现象。 与正常组比较，模型组小鼠的脾指数、胸腺指数均
3.1.2 初始体质量百分率和肛温 给药期间，与正常组 显著降低（P＜0.05），肺指数显著升高（P＜0.05）。与模
比较，模型组小鼠初始体质量百分率及肛温持续降低 型组比较，阳性药组、麻黄细辛附子汤组小鼠的脾指数、
（P＜0.05），直至解剖时均未见回升的趋势。自给药第4 胸腺指数均显著升高（P＜0.05），肺指数均显著降低
天起，各给药组小鼠的初始体质量百分率、肛温均出现 （P＜0.05）。各组小鼠的体质量和脾指数、肺指数、胸腺
回升的趋势；与模型组比较，阳性药组和麻黄细辛附子 指数测定结果见表3。

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