Page 36 - 《中国药房》2021年第6期

of lung tissue were observed. The viral load of influenza A virus H1N1 in lung tissue was detected（reflected by M gene mRNA
expression）；mRNA expressions of TLR3，TLR7，myeloid differentiation factor（MyD88）and Caspase-3 in cardiac tissue as well
as the activity of Cyt-CO and the content of cytochrome C （Cyt-C） were also determined. RESULTS：Compared with normal
group，initial body weight percentage and anal temperature of the model group continued to decrease（P＜0.05）；the spleen and
thymus indexes were decreased significantly（P＜0.05），while lung index was increased significantly（P＜0.05）；the lung tissue
lesions were serious. Viral load in lung tissue，mRNA expressions of TLR3，TLR7，MyD88 and Caspase-3 in cardiac tissue as well
as the content of Cyt-C were increased significantly（P＜0.05 or P＜0.01），while the activity of Cyt-CO in cardiac tissue was
significantly decreased（P＜0.01）. Compared with model group，initial body weight percentage and anal temperature of mice in
Mahuang xixin fuzi decoction group showed an increasing trend from the fourth day of administration（P＜0.05 or P＜0.01）. The
spleen and thymus indexes were increased significantly（P＜0.05），while the lung index was significantly decreased（P＜0.05）；the
pathological injury of lung tissue was significantly improved；viral load in lung tissue，mRNA expressions of TLR3 and Caspase-3
as well as the content of Cyt-C in cardiac tissue were decreased significantly（P＜0.05 or P＜0.01），while the activity of Cyt-CO
was increased significantly in cardiac tissue （P＜0.01）. CONCLUSIONS：Mahuang xixin fuzi decoction can improve influenza
disease of kidney-yang deficiency in mice，the effect may related to inhibit TLRs response and apoptosis regulation pathway
mediated by Cyt-CO.
KEYWORDS Mahuang xixin fuzi decoction；Influenza disease of kidney-yang deficiency；Cytochrome C oxidase；Cytochrome
C；Apoptosis；Toll-like receptors；Mice

麻黄细辛附子汤始载于《伤寒论》，是治疗阳虚兼外 亡 。而麻黄细辛附子汤中的附子生物碱成分能影响
[10]
感的经方，具有助阳解表、温经散寒的功效，用于治疗素 心肌细胞的线粒体凋亡途径 [13－16] 。由此，笔者推测麻黄
[1]
体阳虚、复感寒邪、恶寒发热等症，疗效显著 。该方由 细辛附子汤干预肾阳虚外感证的机制可能与缓解炎症
麻黄、细辛、制附子等 3 味中药材组成。其中，麻黄辛、 损伤及调节心肌细胞凋亡有关。因此，本研究拟建立病
温，入太阳散表寒，为君药；附子辛热、温，补少阴之阳， 证结合的肾阳虚外感复合小鼠模型，并从 TLRs 应答和
为臣药；细辛辛温，入太阳、少阴，在表可助麻黄发散风 Cyt-CO介导的凋亡调控作用出发，通过对其病毒载量、
寒，在内可助附子扶阳温肾，为佐药 [2－3] 。三药合用，补 炎症因子、凋亡基因表达等指标进行测定和评价，探讨
散兼施，使外感风寒得以表散，在内阳气得以温补，阳虚 麻黄细辛附子汤改善肾阳虚外感证模型小鼠的作用
外感可愈 [4－5] 。在临床上，该方主治少阴兼太阳表证，即 机制。
在阳气亏虚状态下感受寒邪出现邪正相争而导致的发 1 材料
[6]
热（即太少两感证），是治疗阳虚外感寒邪的经典方剂 。 1.1 主要仪器
Toll样受体（TLRs）为Ⅰ型跨膜蛋白，是先天免疫系 本研究所用主要仪器有 BX53 型光学显微镜（日本
统中的关键因子，也是炎症反应通路的重要信号转导受 Olympus公司）、CPA225D型十万分之一分析天平（德国
体 。据相关研究报道，甲型H1N1流感病毒感染心肌组 Sartorius 公司）、NJ 08818 型涡旋仪（美国 SI 公司）、SCI-
[7]
织后，心肌细胞中 TLRs 表达量增加，然后通过激活 ENTZ-50型高通量组织研磨器（宁波新芝生物科技股份
TLRs 先天免疫应答，引发机体炎症反应。在致炎因子 有限公司）、ZIL-2 型小鼠自主活动仪（北京医科院药研
的刺激下，炎症介质可诱导线粒体结构功能损伤，使线 究所）、1510 型酶标仪[赛默飞世尔科技（中国）有限公
粒体膜电位降低，并激活胱天蛋白酶（Caspase）信号转导 司]、TDZ5-WS型医用离心机（湖南平凡科技有限公司）、
途径，使该途径中作为始动因子的细胞色素 C 氧化酶 XP 型基因扩增仪（杭州博日科技有限公司）、CFX Con-
（Cyt-CO）活性下降，致使细胞色素 C（Cyt-C）被释放到 nect Real-Time System 荧光定量聚合酶链式反应（PCR）
细胞质中，然后激活凋亡执行因子 Caspase-3，进而引发 仪（美国 Bio-Rad 公司）和 UV-1780 型紫外-可见分光光
Caspase 级联反应，诱导心肌细胞凋亡 [8－11] 。此外，作为 度计（日本Shimadzu公司）等。
机体能量代谢中心的线粒体，其自身功能障碍也会直接 1.2 主要药品与试剂
[12]
诱导细胞凋亡 。 麻黄饮片（批号130315）购自泰山中药有限公司，细
近年来，对麻黄细辛附子汤干预肾阳虚外感证的研 辛饮片（批号 16050202）购自安徽协和成药业饮片有限
究多集中于药效及物质基础方面，已证实了该方对肾阳 公司，制附子饮片（批号151008）购自四川江油中坝附子
[5]
虚外感证有效，且存在量效关系 。因流感病毒侵染机 科技发展有限公司，以上饮片经山东中医药大学药学院
体后，首先激活心肌细胞内TLRs先天免疫应答，进而激 李峰教授鉴定均为真品；AB-8大孔树脂（粒径0.3～1.25
活Caspase信号转导途径，引起Cyt-CO介导的线粒体调 mm，批号 20190311）购自东鸿化工有限公司；β-环糊精
控通路发生变化，从而引发炎症反应或诱导细胞凋 （批号181029）购自曲阜市天利药用辅料有限公司；鸡胚

·670 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 6 中国药房 2021年第32卷第6期