Page 89 - 《中国药房》2021年第4期

溴苯基姜黄素对胆管癌细胞凋亡、迁移和侵袭的影响及机制研

究 Δ

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赵冀安 ，马艳荣 ，聂文佳 ，董 梁 ，刘文聪 ，谷敬锋 （1.河北医科大学第一医院普通外科，石家庄 050013；
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2.河北医科大学第一医院急诊科，石家庄 050013；3.河北医科大学第一医院医务处，石家庄 050013；4.河北
医科大学第一医院超声科，石家庄 050013）
中图分类号 R735.8；R965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）04-0467-08
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.04.13

摘 要 目的：研究溴苯基姜黄素（GL63）对人胆管癌RBE细胞凋亡、迁移和侵袭的影响，并基于Janus激酶（JAK）/信号转导及转
录激活因子（STAT）信号通路探讨其作用机制。方法：采用MTT法检测不同浓度GL63[0（空白对照，下同）、1.25、2.5、5、10、20、40
μmol/L]作用48 h对RBE细胞增殖的影响，并计算其半数抑制浓度（IC50 ）；采用结晶紫染色法检测不同浓度GL63（0、5、10、20 μmol/L）
作用48 h对细胞集落形成的影响；分别采用流式细胞术、Hoechst 33342染色法、细胞划痕实验、Transwell小室侵袭实验检测不同
浓度GL63（0、5、10、20 μmol/L）作用24 h对细胞周期分布、凋亡情况以及细胞迁移和侵袭能力的影响；采用Western blotting法检测
不同浓度GL63（0、5、10、20 μmol/L）作用24 h对细胞中JAK2/STAT3信号通路肿瘤相关蛋白表达的影响。结果：不同浓度GL63组
（1.25～40 μmol/L）RBE细胞的增殖抑制率均较空白对照组显著升高（P＜0.01），并呈剂量依赖趋势；其IC50为（8.46±1.30）μmol/L。
与空白对照组比较，不同浓度GL63组（5、10、20 μmol/L）RBE细胞的集落形成抑制率均显著降低（P＜0.01）；G0/G1期细胞占比均显
著升高，S 期细胞占比均显著降低（P＜0.01）；细胞凋亡率均显著升高（P＜0.01），且细胞核呈浓染致密的固缩形态并可见凋亡小
体；细胞迁移愈合率均显著降低（P＜0.01），穿过基底膜的侵袭细胞数均显著减少（P＜0.01）；细胞中磷酸化JAK2、磷酸化STAT3、
B 淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、基质金属蛋白酶 2（MMP-2）、MMP-9、前体胱天蛋白酶 9（Pro-caspase-9）、Pro-caspase-3 蛋白表达水平
均显著降低，Bcl-2 相关 x 蛋白（Bax）、细胞色素 C、裂解 Caspase-9（Cleaved-caspase-9）、Cleaved-caspase-3 蛋白表达水平均显著升
高（P＜0.01）。结论：GL63 能通过抑制 JAK2/STAT3 信号通路来实现对人胆管癌 RBE 细胞增殖、迁移和侵袭的抑制并诱导其
发生凋亡。
关键词 溴苯基姜黄素；胆管癌；RBE细胞；Janus激酶2/信号转导及转录激活因子3信号通路；迁移；侵袭；凋亡
Study on the Effect and Its Mechanism of Bromophenylcurcumin on Apoptosis，Migration and Invasion of
Cholangiocarcinoma Cells
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ZHAO Ji’an ，MA Yanrong ，NIE Wenjia ，DONG Liang ，LIU Wencong ，GU Jingfeng（1. Dept. of General
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Surgery，the First Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuang 050013，China；2. Dept. of Emergency，
the First Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuang 050013，China；3. Dept. of Medical Service，the
First Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuang 050013，China；4. Dept. of Ultrasonography，the First
Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuang 050013，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effects of bromophenylcurcumin（GL63）on the apoptosis，migration and invasion of
human cholangiocarcinoma RBE cells，and to investigate its mechanism based on JAK/STAT signaling pathway. METHODS：MTT
assay was used to detect the effects of different concentrations of GL63 [0（blank control，similarly hereinafter），1.25，2.5，5，10，
20，40 μ mol/L] on the proliferation of RBE cells after 48 h treatment；the IC50 was calculated. The effects of different
concentrations of GL63（0，5，10，20 μmol/L）on colony formation were detected by crystal violet staining after 48 h treatment.
Flow cytometry，Hoechst 33342 staining，cell scratch test and Transwell chamber invasion test were used to detect the effects of
different concentrations of GL63（0，5，10，20 μmol/L）on cell cycle distribution，apoptosis，migration and invasion ability after
24 h treatment. Western blotting assay was adopted to detect the effects of different concentration of GL63（0，5，10，20 μmol/L）
on the expression of JAK2/STAT3 signal pathway associated proteins. RESULTS：The proliferation inhibition rates of RBE cells in
different concentrations of GL63 groups（1.25-40 μmol/L）were significantly increased，compared with blank control group （P＜
0.01）， and showed a dose-dependent trend， with IC50 of
Δ 基金项目：河北省医学科学研究课题计划项目（No.20190485）
（8.46 ± 1.30） μ mol/L. Compared with blank control group，
＊副主任医师，博士。研究方向：肝癌基础与临床。电话：0311-
85917439。E-mail：zhaoji-an-88@163.com inhibition rates of RBE cell colony formation were
# 通信作者：副主任医师，硕士生导师，硕士。研究方向：大肠癌 significantly decreased in different concentrations（5，10，20
基础。电话：0311-85917092。E-mail：530309776@qq.com μmol/L）of GL63 groups（P＜0.01）. The percentage of RBE

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