Page 84 - 《中国药房》2021年第4期
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三目摄像显微镜下观察，评价各组大鼠皮肤组织形态学 中剂量组大鼠伤处皮肤部分出现结痂情况，红肿消失；
变化。病理评分标准：正常组织，无明显损伤，记 0 分。 给药5～7 d愈疡胶囊高、中剂量组部分大鼠伤处出现脱
表皮层鳞状上皮层次仅局部超过 2～3 层，略有增厚；真 痂。愈疡胶囊低剂量组大鼠仅给药第7天时愈合率显著
皮层浅层有少量的炎细胞浸润；可见少量坏死区域及肉 升高（P＜0.05）。与愈疡胶囊低剂量组比较，除愈疡胶
芽组织，符合上述任一项者，记1分。表皮层鳞状上皮层 囊中剂量组大鼠给药第1天的愈合率差异无统计学意义
次明显增厚；真皮层下均有中等量炎细胞浸润；真皮层 （P＞0.05）外，其余各时间点阳性对照组和愈疡胶囊高、
可见局灶坏死区域及肉芽组织，符合上述任一项者，记2 中剂量组大鼠的皮肤愈合率均显著升高（P＜0.01）。与
分。表皮层鳞状广泛增厚并使黏膜凹凸不平；真皮层大 阳性对照组比较，愈疡胶囊高、中剂量组大鼠各时间点
量广泛的炎细胞浸润；真皮层可见大量坏死区域及肉芽 的皮肤愈合率差异均无统计学意义（P＞0.05），详见
[9]
组织，符合上述任一项者，记3分 。 表1。
2.9 大鼠皮肤组织超微结构观察 表1 愈疡胶囊对细菌感染皮炎模型大鼠皮肤愈合率的
取固定好的皮肤组织适量，使用透射电子显微镜观 影响（x±±s，n＝10，％％）
察各组大鼠成纤维细胞分布排列情况，胶原纤维分布排 Tab 1 Effects of Yuyang capsule on skin healing rate
列情况、紧密程度，上皮细胞排列分布情况、结构是否 of bacterial dermatitis model rats（x ±± s，n＝
完好。
10，％％）
2.10 大鼠皮肤组织中TLR2、TLR4、p-NF-κB p65蛋白
组别 剂，mg/kg 给药第1天 给药第3天 给药第5天 给药第7天
表达水平测定 模型组 2.60±1.36 4.13±1.34 8.18±2.84 10.61±1.11
采用 Western blotting 法进行测定。取冻存的皮肤 阳性对照组 120 7.86±1.93 ＊＊## 10.25±1.33 ＊＊## 16.93±3.30 ＊＊## 21.83±1.81 ＊＊##
愈疡胶囊高剂量组 600 8.41±1.91 ＊＊## 11.37±1.03 ＊＊## 16.15±1.51 ＊＊## 22.73±1.85 ＊＊##
组织适量，进行裂解、蛋白提取和定量。取蛋白样本，与 愈疡胶囊中剂量组 300 5.25±1.95 ＊ 6.94±1.00 ＊＊## 13.38±1.5 ＊＊## 19.37±1.54 ＊＊##
上样缓冲液混合，煮沸 10 min 进行蛋白变性；取变性蛋 愈疡胶囊低剂量组 150 2.41±1.06 3.87±1.52 9.44±2.19 15.89±0.15 ＊＊
白进行 SDS-PAGE，转膜、封闭，经 1×TBST 漂洗 1 遍后， 注：与模型组比较，P＜0.05， P＜0.01；与愈疡胶囊低剂量组比
＊＊
＊
##
分别加入 TLR2、TLR4、p-NF-κB p65 一抗（稀释比例均 较，P＜0.01
＊
为 1 ∶ 800）以及β-actin 抗体（稀释比例为 1 ∶ 1 000），于 Note：vs.model group， P＜0.05， ＊ ＊ P＜0.01；vs. Yuyang capsule
##
low-dose group， P＜0.01
4 ℃孵育过夜；加入生物素化山羊抗兔IgG二抗（稀释比
3.3 愈疡胶囊对细菌感染皮炎模型大鼠皮肤组织中炎
例为 1 ∶ 5 000），在室温下孵育 2 h；经 1×TBST 漂洗 3 遍
症因子含量的影响
后，以 ECL 显色，运用化学发光凝胶成像仪成像，采用
与模型组比较，阳性对照组和愈疡胶囊高、中、低剂
Image-Pro Plus 6.0 图像软件进行分析，以β-actin 作为内
量组大鼠皮肤组织中 IL-10、TNF-α含量，阳性对照组与
参，将目标蛋白与内参的灰度值比值作为目标蛋白的相
愈疡胶囊高、中剂量组大鼠皮肤组织中 IL-1β含量以及
对表达量，并以模型组为标准进行归一化处理。上述试
阳性对照组与愈疡胶囊高剂量组大鼠皮肤组织中 IL-6
验重复3次。
2.11 统计学方法 含量均显著降低（P＜0.05 或 P＜0.01）。与愈疡胶囊低
使用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析。数据以 剂量组比较，阳性对照组大鼠皮肤组织中 IL-1β、IL-6、
x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两 IL-10、TNF-α含量以及愈疡胶囊高剂量组大鼠皮肤组织
比较采用LSD-t检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。 中 IL-1β、TNF-α含量均显著降低（P＜0.05 或 P＜0.01）。
3 结果 与阳性对照组比较，愈疡胶囊高、中剂量组大鼠皮肤组
3.1 愈疡胶囊对金黄色葡萄球菌的MIC与MBC 织中上述 4 个炎症因子含量差异均无统计学意义（P＞
愈疡胶囊对金黄色葡萄球菌的 MIC 为 25 mg/mL， 0.05），详见表2。
MBC为50 mg/mL；后续实验中，愈疡胶囊高、中、低剂量 3.4 愈疡胶囊对细菌感染皮炎模型大鼠皮肤组织中纤
组给药剂量分别设为600、300、150 mg/kg。 维蛋白含量的影响
3.2 愈疡胶囊对细菌感染皮炎模型大鼠皮肤组织表征 与模型组比较，阳性对照组和愈疡胶囊高剂量组大
的影响 鼠皮肤组织中HYP、Col Ⅰ、Col Ⅲ含量均显著升高（P＜
与模型组比较，给药第 1、3、5、7 天时，阳性对照组 0.05或P＜0.01）。与愈疡胶囊低剂量组比较，阳性对照
和愈疡胶囊高、中剂量组大鼠伤处皮肤组织红肿、化脓 组大鼠皮肤组织中HYP、Col Ⅰ、Col Ⅲ含量以及愈疡胶
情况较轻，伤口结痂程度高，愈合速度快，愈合率均显著 囊高剂量组大鼠皮肤组织中HYP含量均显著升高（P＜
升高（P＜0.05或P＜0.01）。其中，给药3 d愈疡胶囊高、 0.05 或 P＜0.01）。与阳性对照组比较，愈疡胶囊高、中
·462 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 4 中国药房 2021年第32卷第4期
