Page 26 - 《中国药房》2021年3期

配制 STP 定量下限和低、中、高质量浓度的脑组织匀浆 min，分离血浆，于－80 ℃保存。血浆于室温解冻后，按
样品，按“2.4”项下方法处理后，再按“2.1”项下色谱条件 “2.3”项下方法处理后进行 HPLC-FLR 分析，结果见表
进样测定，记录峰面积。采用标准曲线法计算STP的质 5。每次取血后，立即处死大鼠，心内灌注生理盐水以排
量浓度，将其与相同浓度的STP标准溶液直接进样后的 出脑中的血液，再取出大脑，用生理盐水冲洗表面后，
测定结果进行比较，计算提取回收率；将其与 STP 理论 于－80 ℃保存。脑组织于室温解冻后，按“2.4”项下方
质量浓度比较，计算方法回收率，结果见表2。 法处理后进行HPLC-FLR分析，结果见表5。
2.9 稳定性试验 表 5 大鼠灌胃给药后 0.5、1、2 h 时血浆和脑组织中
2.9.1 血浆样品 取大鼠空白血浆，按“2.6.1”项下方法 STP药物浓度的测定结果（x±±s，n＝6）
配制STP低、中、高质量浓度的血浆样品，分别于室温放 Tab 5 Results of plasma and brain concentration of
置 6 h、反复冻融（－80～20 ℃）3 次、－80 ℃冷冻保存 7 STP in rats at 0.5，1，2 h after intragastric ad-
d，按“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项下色谱条件进 ministration（x±±s，n＝6）
样测定，记录峰面积。采用标准曲线法计算STP的质量 时间，h STP-SNEDDS STP混悬液
浓度，每份样品重复检测3次。结果，各样品在上述条件 血药浓度，μg/mL 脑组织药物浓度，μg/mL 血药浓度，μg/mL 脑组织药物浓度，μg/mL
0.5 3 706.65±949.22 ＊ 1 978.69±277.36 ＊ 1 622.26±829.57 851.97±228.05
下稳定性良好，详见表3。 1 2 421.52±601.46 1 309.05±133.35 ＊ 1 294.86±881.33 559.84±37.79
表3 含STP血浆样品的稳定性试验结果（n＝3） 2 1 694.68±747.78 ＊ 722.01±77.24 652.48±333.23 604.99±167.36
＊
Tab 3 Results of stability tests of plasma samples con- 注：与STP混悬液比较，P＜0.05
Note：vs. STP suspension，P＜0.05
＊
taining STP（n＝3）
由表 5 可知，在各时间点，灌胃 STP-SNEDDS 大鼠
室温放置6 h 反复冻融3次 －80 ℃冷冻保存7 d
理论质量浓度， 的血药浓度（给药后 1 h 除外）和脑组织药物浓度（给药
μg/mL 实测质量浓度 RSD，％ 实测质量浓度 RSD，％ 实测质量浓度 RSD，％
（x±s），μg/mL （x±s），μg/mL （x±s），μg/mL 后 2 h 除外）均显著高于灌胃 STP 混悬液的大鼠（P＜
0.50 0.49±0.02 4.08 0.46±0.02 4.35 0.45±0.02 4.44 0.05）。这提示将 STP 制成 SNEDDS 后，其在血浆和脑
2.00 1.94±0.07 3.61 1.82±0.03 1.65 1.77±0.06 3.39
8.00 7.93±0.23 2.90 7.69±0.26 3.38 7.84±0.24 3.06 组织中的浓度明显提升。
2.9.2 脑组织样品 取空白脑组织，按“2.6.2”项下方法 采用Excel 2019软件，以STP-SNEDSS为对象，以其
配制STP低、中、高质量浓度的脑组织匀浆样品，分别于 血浆药物浓度为横坐标、其同时间点对应的脑组织药
室温放置6 h、反复冻融（－80～20 ℃）3次、－80 ℃冷冻 物浓度为纵坐标绘制两者关系图。结果，灌胃 STP-
保存 7 d，按“2.4”项下方法处理后，再按“2.1”项下色谱 SNEDDS后，随着血药浓度的增加，脑组织药物浓度-血
条件进样测定，记录峰面积。采用标准曲线法计算STP 浆药物浓度比值从0.39上升到0.55，且可见该曲线的横
[11]
的质量浓度，每份样品重复检测3次。结果，各样品在上 轴截距为正值，呈现出较明显的线性关系 ，详见图2。
述条件下稳定性良好，详见表4。 2 500
表4 含STP脑组织样品的稳定性试验结果（n＝3） 2 000
Tab 4 Results of stability tests of brain tissue samples c 脑，g/L μ 1 500
containing STP（n＝3） 1 000
室温放置6 h 反复冻融3次 －80 ℃冷冻保存7 d 500
理论质量浓度，
μg/mL 实测质量浓度 RSD，％ 实测质量浓度 RSD，％ 实测质量浓度 RSD，％ 0 0 1 000 2 000 3 000 4 000 5 000 6 000
（x±s），μg/mL （x±s），μg/mL （x±s），μg/mL
c 血，μg/L
0.50 0.51±0.02 3.92 0.47±0.02 4.26 0.43±0.02 4.65
2.00 1.97±0.06 3.05 1.85±0.04 2.16 1.89±0.07 3.70 图 2 STP-SNEDDS 灌胃给药后大鼠血浆和脑组织中
8.00 7.97±0.34 4.27 7.74±0.28 3.62 7.89±0.25 3.17 STP药物浓度的关系（n＝6）
2.10 大鼠血浆和脑组织中STP质量浓度的检测 Fig 2 Relationship between STP concentrations in
将36只SD大鼠禁食不禁水12 h后，随机分为STP- plasma and brain after intragastric adminis-
SNEDDS 组 和 STP 混 悬 液 组 ，每 组 18 只 。 取 STP- tration of STP-SNEDDS（n＝6）
SNEDDS、STP 对照品适量，分别用水和 0.5％羧甲基纤 3 讨论
维素钠溶液为溶剂制得质量浓度均为10 mg/mL（以STP 3.1 分析方法的选择
质量计）的药液，按40 mg/kg（剂量参考本课题组前期预 HPLC-FLR 定量分析的基础是光束经过透镜，聚集
实验结果设置）分别单次灌胃。分别于给药后0.5、1、2 h 在样品池内的组分受光源激发后发出的荧光强度与样
时（各时间点每组分别取大鼠6只）从大鼠眼眶静脉丛取 品浓度成正比。由于荧光具有高灵敏度，因此该方法适
血，并收集至肝素化的离心管中，以 4 000 r/min 离心 10 用于化合物的体内定量分析，可获得较低的定量下

·276 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 3 中国药房 2021年第32卷第3期