Page 99 - 《中国药房》2021年2期

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果，上述色度值的 RSD 均小于 2％（n＝6），表明方法精 则总黄酮含量越高。由于L 越大表示颜色越明亮，a ＞
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密度良好。 0 表示颜色偏红，b ＞0 表示颜色偏黄 [12－15] ，根据上述
2.3.4 重复性试验 取桑白皮样品粉末（编号S1）适量， Pearson 相关性分析结果可知：（1）桑根皮素含量与黄蓝
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共 6 份，按“2.3.2”项下方法测定 L 、a 、b 值。结果，上 值相关性最大（r 绝对值越大则相关性越大，下同），在
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述色度值的 RSD 均小于 2％（n＝6），表明方法重复性 78.1％的程度上其颜色偏黄则桑根皮素含量较低；其次
良好。 与红绿值相关性较大，在75.0％的程度上其颜色偏红则
2.3.5 稳定性试验 取桑白皮样品粉末（编号S1）适量， 桑根皮素含量较高；最后与颜色明暗程度较相关，在
按“2.3.2”项下方法平铺于粉末测试盒内并盖好盖玻片 70.0％的程度上其颜色越明亮则桑根皮素含量越低。（2）
后，分别在室温下放置0、2、4、6、8、10、12、24 h时进行测 桑白皮中总黄酮含量与颜色明暗程度相关性最大，在
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定 L 、a 、b 值。结果，上述色度值的 RSD 均小于 3％ 97.0％的程度上颜色越明亮则总黄酮含量越高；其次与
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（n＝8），表明样品在室温下放置24 h内稳定性良好。 红绿值相关性较大，在96.3％的程度上其颜色偏红则总
2.3.6 样品的颜色观察和测定 取 20 批桑白皮药材按 黄酮含量较低；最后与黄蓝值较相关，在 95.5％的程度
“2.3.1”“2.3.2”项下进行颜色观察和色度值测定并计算 上其颜色偏黄则总黄酮含量较高。
总色差值。每批样品平行测定 3 次，取平均值，结果见 2.5 桑白皮药材的指纹图谱建立
表 6。 采用HPLC法建立桑白皮药材的指纹图谱。
表6 20批桑白皮药材样品颜色观察及色度值测定结果 2.5.1 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适
（n＝3） 量，加甲醇制成质量浓度为 0.014 3 mg/mL 的对照品
Tab 6 Observation and determination results of color 溶液。
and chromaticity values of 20 batches of M. al- 2.5.2 供试品溶液的制备 精密称取桑白皮粉末（过三
ba（n＝3） 号筛，下同）1 g，置于具塞锥形瓶中，加入 70％乙醇 25
编号 颜色 L ＊ a ＊ b ＊ E ab 编号 外观颜色 L ＊ a ＊ b ＊ E ab mL，密塞后称定质量，超声（频率40 kHz，功率500 W）处
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S1 浅黄白色 65.53 6.12 15.28 67.25 S11 黄棕色 63.89 6.41 14.86 66.05 理 30 min，冷却后再次称定质量，用甲醇补足减失的质
S2 浅黄白色 67.55 5.82 15.89 69.73 S12 黄白色 69.15 5.64 16.46 71.53
S3 黄白色 74.09 5.22 17.56 76.43 S13 黄棕色 64.59 6.38 14.98 66.55 量，滤过，取续滤液，即得。
S4 浅黄白色 67.87 5.68 16.21 70.05 S14 黄白色 68.58 5.67 16.37 70.67 2.5.3 色谱条件 色谱柱为 Agilent ZORBAX Eclipse
S5 黄白色 69.25 5.49 17.05 71.72 S15 黄白色 67.03 6.04 15.80 69.00 Plus C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-甲醇[1∶1
S6 浅黄白色 68.70 5.67 16.42 70.93 S16 黄白色 69.62 5.33 17.47 71.76 （V/V），A相]-0.1％磷酸水溶液（B相），梯度洗脱（0 min，
S7 黄棕色 62.52 6.73 13.59 64.48 S17 棕褐色 62.11 6.86 13.50 63.79
S8 浅黄棕色 65.42 6.20 15.06 67.15 S18 黄白色 66.39 6.05 15.78 68.62 15％A；18 min，34％A；28 min，50％A；38 min，65％A；
S9 黄棕色 63.25 6.72 14.45 65.16 S19 黄白色 67.71 5.78 16.18 69.94 60 min，80％A）；检测波长为 320 nm；柱温为 40 ℃；流
S10 黄棕色 63.56 6.62 14.67 65.76 S20 黄白色 67.20 5.88 15.88 69.13 [16]
速为 1 mL/min；进样量为10 μL 。
2.4 桑白皮药材中有效成分含量与颜色指标的相关性
2.5.4 精密度试验 取同一份供试品溶液（编号S7），按
分析
“2.5.3”项下色谱条件连续进样 6 次，以 1 号峰（绿原酸）
利用 SPSS 21.0 软件对桑白皮中桑根皮素、总黄酮
为参照计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。
的含量与颜色指标（L 、a 、b 、E ab）进行 Pearson 相关
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结果，各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD分别
性分析，结果见表7。
小于0.14％、0.69％（n＝6），表明方法精密度良好。
表7 桑白皮药材中有效成分含量与颜色指标的Pearson
2.5.5 重复性试验 取桑白皮药材粉末（编号S7）适量，
相关性分析结果
共 6 份，按“2.5.2”项下方法平行制备供试品溶液，再按
Tab 7 Pearson correlation analysis results between
“2.5.3”项下色谱条件进样测定，以 1 号峰（绿原酸）为参
the contents of active ingredients and color in-
照计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，
dicators index in M. alba
各共有峰相对保留时间和相对峰面积的 RSD 分别小于
L ＊ a ＊ b ＊ E ab
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有效成分含量 0.52％、1.95％（n＝6），表明方法重复性良好。
r P r P r P r P
桑根皮素 －0.700 0.001 0.750 ＜0.001 －0.781 ＜0.001 －0.711 ＜0.001 2.5.6 稳定性试验 取桑白皮药材粉末（编号S7）适量，
总黄酮 0.970 ＜0.001 －0.963 ＜0.001 0.955 ＜0.001 0.968 ＜0.001 按“2.5.2”项下方法平行制备供试品溶液，分别于室温下
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由表7可知，桑白皮药材中桑根皮素含量与L 、b 、 放置 0、4、8、12、24、48 h 时按“2.5.3”项下色谱条件进样
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E ab 值以及总黄酮含量与 a 值均呈显著负相关（r＜0， 测定，以1号峰（绿原酸）为参照计算各共有峰的相对保
P＜0.01），桑根皮素含量与 a 值以及总黄酮含量与 L 、 留时间和相对峰面积。结果，各共有峰相对保留时间和
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b 、E ab值则均呈显著正相关（r＞0，P＜0.01）。这表明 相对峰面积的 RSD 均小于 0.79％、1.88％（n＝6），表明
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在一定程度上，桑白皮 L 、b 、E ab 值越小，a 值越大， 供试品溶液在室温下放置48 h内稳定性较好。
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则其桑根皮素含量越高；L 、b 、E ab值越大，a 值越小， 2.5.7 相似度评价及共有峰指认 取 20 批桑白皮药材
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中国药房 2021年第32卷第2期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2 ·217 ·