Page 100 - 《中国药房》2021年2期
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样品粉末适量,按“2.5.2”项下方法制备供试品溶液按并                        根皮素含量偏低、总黄酮含量较高,颜色较明亮、偏黄
       “2.5.3”项下色谱条件进样测定,记录色谱图。将所有样                         白色。
        品色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统                              表8   不同产地桑白皮中桑根皮素和总黄酮的含量以及
        (2012版)》,生成叠加指纹图谱(见图3);同时以S1为参                           颜色指标的K-均值聚类分析中心值
        照,采用中位数法,设置时间窗为 0.1,经多点校正后进                         Tab 8 Central values of K-means cluster analysis on
        行匹配,生成对照图谱(R,图略);对两者进行相似度评                                 the content of morusin and total flavonoids
        价。结果,样品 S1~S20 色谱图与对照色谱(R)的相似                              and color indicators in M. alba from different
        度分别为 0.962、0.930、0.941、0.975、0.973、0.972、0.948、            producing areas
        0.972、0.883、0.952、0.968、0.978、0.975、0.969、0.983、              第Ⅰ类(S1、S7~S11、S13、S17)  第Ⅱ类(S2~S6、S12、S14~S16、S18~S20)
                                                            指标
        0.928、0.978、0.952、0.906、0.981;共标定13个共有峰,指                     中心值        变幅        中心值       变幅
                                                            桑根皮素含量    0.264 3  0.170 1~0.618 6  0.130 7  0.096 0~0.163 2
        认 1 号峰为绿原酸(绿原酸对照品溶液按“2.5.3”项下色
                                                            总黄酮含量     0.65      0.48~0.84  1.07     0.84~1.51
        谱条件进样测定所得色谱图见图4)。                                   L *       63.86    62.11~65.53  68.60   66.39~74.09
                                                            a *       6.51      6.12~6.86  5.69     5.22~6.05
                          2
           1 800    1                     8    11            *
           1 700              3  4  5 6 7    9 10  12 13    b         14.55    13.50~15.28  16.42   15.78~17.56
           1 600                                      S20    *
           1 500                                      S19   E ab      65.77    63.79~67.25  70.79   68.62~76.43
           1 400                                      S18
           1 300                                      S17                         欧氏距离
                                                      S16
           1 200                                      S15
          mV  1 100                                   S14             0     5    10    15   20    25
          U,  1 000                                   S13           S5
            900                                       S12
            800                                       S11           S20
                                                      S10
            700                                       S9            S1
            600                                       S8            S15
            500                                       S7            S19
            400                                       S6            S4
            300                                       S5            S14
                                                      S4
            200                                       S3            S12
            100                                       S2            S18
             0                                        S1
                                                                    S2
               0  4  8  12  16  20 24  28  32  36  40 44  48  52  56 60  S3
                                 t,min                              S16
                                                                    S6
               图3    20批桑白皮药材的叠加指纹图谱                                S7
                                                                    S8
         Fig 3  Superimposed fingerprint of 20 batches M. alba      S10
                                                                    S9
                                                                    S17
                                                                    S13
            70      绿原酸                                             S11
            65                                                   不同产地桑白皮指纹图谱相对峰面积的系统聚类
            60                                              图5
            55
            50                                                   分析图
            45
           mV  40                                           Tab 5 Hierarchical cluster analysis diagram of rela-
            35
           U,  30
            25                                                     tive peak area of the fingerprint of M. alba
            20
            15                                                     from different producing areas
            10
             5
             0                                        S1    3 讨论
              0  4  8  12  16  20  24  28  32  36  40 44  48  52  56  60
                                 t,min                          随着中药材基原和种类的不断增多,对其进行质量
              图4   绿原酸对照品溶液的高效液相色谱图                         监测和控制显得尤为重要,而颜色作为中药最直观的外
        Fig 4  HPLC chromatogram of chlorogenic acid con-
                                                                                          [17]
                                                            在特征之一,与中药质量密不可分 。历代关于桑白皮
               trol
                                                                                                [7]
                                                            的品质评价均以“色白,皮厚,味甘者为佳”。然而传统
        2.6 不同产地桑白皮药材的聚类分析                                  辨色方法主观性较强且易受外在因素影响,因此本研究
                                                                                                          *
            利用SPSS 21.0软件对20批不同产地桑白皮药材样                     通过色差仪将主观性指标颜色转化为客观性指标(L 、
                                                                *
                                                             *
        品中桑根皮素和总黄酮的含量、颜色指标进行K-均值聚                           a 、b ),以期通过药材外在表征来快速评价药材质量。
        类分析,对指纹图谱共有峰的相对峰面积进行系统聚类                                经前期研究发现,不同产地及批次桑白皮中二苯乙
        分析,结果见表8、图5。                                        烯苷类成分桑皮苷A的含量差异较大,且有文献表明该
            由系统聚类分析结果可知,当欧氏距离为 10 时,20                      成分易受温度、光照及pH值影响 ,故本文选择桑白皮
                                                                                         [18]
        批样品可聚为两类:S7~S11、S13、S17 聚为一类,以安                     的主要药效成分总黄酮及化学性质较为稳定的桑根皮
                                                                                                   *
                                                                                             *
                                                                                                      *
                                                                                                *
        徽产桑白皮为主,同时 K-均值聚类分析结果(该聚类结                          素进行含量测定,并将其与颜色指标L 、a 、b 、E ab值
        果同时包含 S1)表明其桑根皮素含量较高、总黄酮含量                          相关联。结果表明,桑白皮中桑根皮素和总黄酮含量均
                                                                         *
                                                                  *
                                                               *
                                                                      *
        偏低,颜色较暗、偏黄棕色;S1~S6、S12、S14~S16、                     与L 、a 、b 、E ab值呈显著相关性。其中,桑根皮素含
                                                                 *
                                                                                 *
        S18~S20 聚为一类,以四川、贵州产桑白皮为主,同时                        量与 b 值相关性最大,b 值越小则桑根皮素含量越高,
        K-均值聚类分析结果(该聚类结果不包含 S1)表明其桑                         即偏黄棕色的样品中桑根皮素含量较高;总黄酮含量与
        ·218 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2                                    中国药房    2021年第32卷第2期
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