Page 98 - 《中国药房》2021年2期

试品溶液分别按“2.2.3”项下方法显色后，在 200～600 精密加入桑根酮C对照品溶液适量，然后按“2.2.2”项下
nm 波长范围内扫描。结果，桑根酮 C 对照品溶液和供 方法制备供试品溶液。分别精密量取3 mL，按“2.2.3”项
试品溶液在484 nm波长处均有最大吸收，故选择该波长 下方法显色后，在484 nm波长处测定吸光度并计算加样
作为总黄酮含量的检测波长，详见图2。 回收率。结果，总黄酮的平均加样回收率为 98.32％，
2.400 0 RSD为2.25％（n＝6），表明方法准确度良好，详见表4。
2.200 0
2.000 0 表4 总黄酮加样回收率试验结果（n＝6）
1.800 0
1.600 0
1.400 0 Tab 4 Results of recovery test of total flavonoids
A 1.200 0
1.000 0 （n＝6）
0.800 0
0.600 0
0.400 0 取样量， 已知含量， 加入量， 测得量， 加样回收率， 平均加样回收率， RSD，
0.200 0 试验号
0 g mg mg mg ％ ％ ％
200 240 280 320 360 400 440 480 520 560 600 1 0.500 2 3.331 6 3.500 0 6.8882 101.62
λ，nm
A.桑根酮C对照品溶液 2 0.499 9 3.329 6 3.500 0 6.693 1 96.10
3 0.499 7 3.328 3 3.500 0 6.750 5 97.78
2.000 0 98.32 2.25
1.800 0 4 0.499 7 3.328 3 3.500 0 6.681 6 95.81
1.600 0 5 0.500 1 3.330 9 3.500 0 6.807 8 99.34
1.400 0
1.200 0 6 0.500 3 3.332 3 3.500 0 6.807 8 99.30
1.000 0
A 0.800 0
0.600 0 2.2.10 样品中总黄酮的含量测定 取20批桑白皮药材
0.400 0
0.200 0 粉末适量，按“2.2.2”项下制备供试品溶液。分别精密量
0
－0.200 0 取3 mL，按“2.2.3”项下方法显色后，在484 nm波长处测
200 240 280 320 360 400 440 480 520 560 600
λ，nm 定吸光度，并代入标准曲线方程计算总黄酮含量。每批
B.桑白皮供试品溶液
图 2 桑根酮 C 对照品和桑白皮紫外-可见光吸收光 样品平行测定 3 次，取平均值。结果，20 批桑白皮药材
中总黄酮的平均含量为0.48％～1.51％，详见表5。
谱图
Fig 2 UV-vis absorption spectra of sanggenone C con- 表 5 20 批桑白皮药材样品中总黄酮含量的测定结果
（n＝3）
trol and M. alba
Tab 5 Results of content determination of total flavo-
2.2.5 线性关系考察 精密移取桑根酮 C 对照品溶液
noids in 20 batches of M. alba（n＝3）
1.0、2.0、3.0、3.5、4.0、5.0 mL，按“2.2.3”项下方法反应显
编号 总黄酮，％ 编号 总黄酮，％
色后，在484 nm波长处测定吸光度。以桑根酮C质量浓 S1 0.84 S11 0.62
度（X，μg/mL）为横坐标、吸光度（Y）为纵坐标进行线性 S2 0.96 S12 1.14
回归，得回归方程Y＝0.015 4X－0.017 6（r＝0.999 2），表 S3 1.51 S13 0.63
S4 0.99 S14 1.01
明桑根酮 C 质量浓度在 8.60～43.00 μg/mL 范围内与吸
S5 1.19 S15 0.86
光度呈良好的线性关系。 S6 1.02 S16 1.38
2.2.6 精密度试验 精密移取同一份供试品溶液（编 S7 0.59 S17 0.48
S8 0.79 S18 0.84
号 S7）3 mL，共 6 份，按“2.2.3”项下方法显色后，在 484
S9 0.61 S19 0.97
nm 波长处测定吸光度。结果，吸光度的 RSD 为 3.58％ S10 0.61 S20 0.92
（n＝6），表明方法精密度良好。 2.3 桑白皮药材的颜色测定
2.2.7 重复性试验 精密称取同一批桑白皮粉末（编 采用肉眼观察并以色差仪测定桑白皮药材的颜色。
号 S7）适量，共 6 份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶 2.3.1 样品颜色观察 取桑白皮药材适量，置白板上观
液；分别精密量取 3 mL，按“2.2.3”项下方法显色后，在 察颜色，大致按浅黄白色、黄白色、浅黄棕色、黄棕色、棕
484 nm波长处测定吸光度，并代入标准曲线方程计算总 褐色等5个级别进行记录。
黄酮含量。结果，总黄酮含量的 RSD 为 4.31％（n＝6）， 2.3.2 色差仪测定条件 取桑白皮样品粉末（过四号
表明方法重复性良好。 筛，下同）适量，均匀平铺于粉末测试盒内直至装满，盖
2.2.8 稳定性试验 精密吸取桑根酮 C 对照品溶液和 好盖玻片。色差仪设置D65光源，8度视角，孔径8 mm，
供试品溶液（编号 S7）各 3 mL，按“2.2.3”项下方法显色 LED 蓝光激发，仪器误差值小于 0.4。用黑白板校正仪
后，分别于室温下放置 0、20、40、60、80、100、120 min 时 器后进行样品测定，记录色度值（L 、a 、b ，其中L 值越
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＊
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在484 nm波长处测定吸光度。结果，对照品溶液和供试 大表示颜色越亮/浅、a 值越大表示颜色越偏红、b 值越
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＊
品溶液吸光度的 RSD 分别为 0.83％、0.60％（n＝7），表 大表示颜色越偏黄 ），并计算总色差值（E ab）：E ab＝
＊
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＊
＊2
明两种溶液在显色后于室温下放置120 min内稳定。 （L +a +b ） 。
＊2
＊2 1/2
2.2.9 加样回收率试验 精密称取已知总黄酮含量的 2.3.3 精密度试验 取桑白皮样品粉末（编号S1）适量，
桑白皮粉末（编号 S7）约 0.5 g，共 6 份，均按 1 ∶ 1 质量比 按“2.3.2”项下方法连续测定6次，记录L 、a 、b 值。结
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·216 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2 中国药房 2021年第32卷第2期