Page 55 - 《中国药房》2021年2期
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screen the antioxidant active components of G. uralensis decoction pieces. HPLC-TOF/MS was used to obtain mass spectrum data
        and Qualitive Analyst B 06.00 Build 6.0.633.0 software was used to analyze data. Through contrast analysis of UV absorption
        spectrum，online chromatogram，mass spectrum information of G. uralensis and the retention time of each compound，accurate
        molecular weight，antioxidant active components were identified by referring to relevant literature. Validation test was also
        conducted. RESULTS：DPPH free radical scavenging rate in 8 batches of G. uralensis decoction pieces ranged 55.71％-60.17％.
        Seven antioxidative active compounds，including avolomotor，8-isopentenyl naringin，yellow lupulin weitone，isoflavone B，3′，
        4′-dimethoxy3-hydroxy-6-methyl flavone，glycyrrhizin E and glycyrrhizin H，could be screened from G. uralensis decoction pieces.
        After validation，the peak area of inverted peak generated by online reaction was positively correlated with DPPH free radical
        scavenging rate. CONCLUSIONS：Established method is simple and accurate，and can be used to quickly screen and identify the
        main antioxidant components of G. uralensis decoction pieces；the peak area of inverted peak can be used to evaluate the
        antioxidant active components of G. uralensis decoction pieces.
        KEYWORDS      Glycyrrhiza  uralensis； Antioxidant  active  component； Online  HPLC-UV-DPPH； HPLC-TOF/MS； 1，
        1-diphenyl-2-trinitrobenzene hydrazine；Structural identification


            甘草为豆科植物甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch.、        步鉴定，旨在为甘草抗氧化物质基础的研究提供依据。
        胀果甘草 Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草 Glycyrrhiza     1 材料
        glabra L.的干燥根和根茎，主要分布于我国东北、华北、                     1.1 仪器
                     [1]
        甘肃、新疆等地 。甘草具有补脾益气、清热解毒、祛痰                              Agilent 1260型HPLC仪（含在线脱气机、四元泵、自
        止咳、缓急止痛、调和诸药的功效，除可用于治疗脾胃虚                          动进样器、柱温箱）和 Agilent 6230 TOF LC/MS 型四级
        弱、倦怠乏力、心悸气短、咳嗽痰多、脘腹、四肢挛急疼痛                         杆飞行时间质谱仪（含电喷雾离子源、Mass Hunter Data
                                          [2]
        等症外，还可用于缓解药物毒性和烈性 。现代药理研                           Acquisition B.06.01 在线工作站、Qualiative Analysis B
        究表明，甘草具有较强的抗氧化活性，其作为一种天然                           06.00 Build 6.0.633.0离线分析软件）均购自美国Agilent
        的抗氧化剂，已在食品、化妆品等多个领域中得到了广                           公司；ACQUITY H-Class 型 HPLC 仪（包括四元溶剂管
                                                           理 器 、样 品 管 理 器 、二 极 管 阵 列 检 测 器 、Empower
        泛应用   [3－4] ；同时，甘草的抗炎、杀菌、抗衰老等药理活性
                                                           7.20.00.00 色谱工作站）购自美国 Waters 公司；xMark 型
        均与其抗氧化性活性密切相关              [5－7] ，因此筛选甘草的抗
                                                           酶标仪购自南京德铁实验设备有限公司；XS205DU 型
        氧化活性成分可为该药药效作用物质基础研究提供数
                                                           万分之一电子天平购自瑞士 Mettler Toledo 公司；KQ-
        据支持。
                                                           300VED型三频数控超声波清洗器购自昆山市超声仪器
            有研究发现，甘草中的抗氧化活性成分主要包括黄
                                                           有限公司；DHG-9146 型电热恒温鼓风干燥箱购自上海
          [8]
                [9]
                        [10]
        酮 、多糖 和三萜 等多种化合物，但具体的抗氧化成
                                                           精宏实验设备有限公司。
        分组成尚不明确。目前，甘草化学成分的研究方法主要
                                                           1.2  药品与试剂
        有气质联用技术（GC-MS）、高效液相色谱法（HPLC）、
                                                               实验用药品和试剂有：DPPH标准品（合肥博美生物
        HPLC 指纹图谱和液质联用技术（LC-MS）等              [11－13] ，这些
                                                           科技有限责任公司，批号 464RB，纯度≥97％）等；乙腈
        方法虽然可以得到丰富的化学成分信息，但均未明确成                           为色谱纯，甲醇、甲酸、无水乙醇、石油醚、二氯甲烷、乙
        分与药效的关系，因此无法对甘草饮片的质量和药效进                           酸乙酯、正丁醇等为分析纯，水为超纯水。
        行评价。                                                   8 批甘草饮片（编号 S1～S8）经山东省中医药研究
            随着科学技术的进步，中药活性成分辨识技术得到                         院孙立立研究员鉴定为豆科植物甘草G. uralensis Fisch.
        了一定的发展，形成了以药物基本特性为基础的色谱分                           的干燥根和根茎，样本保存于本实验室，其来源信息见
        离和在线监测技术         [14－15] 。自由基是指物质分子在光或             表1。
        热等外界条件影响下因共价键均裂所形成的含有不成                                      表1 8批甘草饮片样品来源信息
        对电子的原子、分子或基团。生物体内自由基的产生和                           Tab 1 Sample source information of 8 batches of G.
        清除及氧化损伤与心血管疾病的发生发展密切相关 。                                  uralensis decoction pieces
                                                     [16]
        1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）是一种常见的自由                      编号       产地             来源                批号
                                                           S1       甘肃      甘肃中天金丹药业有限公司             1805012
        基，常用来监测物质的抗氧化活性               [17－18] 。鉴于此，本研
                                                           S2       甘肃      亳州中强中药饮片有限公司             180601
        究采用高效液相色谱-紫外-1，1-二苯基-2-三硝基苯肼法                      S3       甘肃      上海梅家坞茶业有限公司              180903
       （HPLC-UV-DPPH）对甘草提取物清除 DPPH 的活性进                    S4       内蒙      北京同仁堂（安国）中药饮片有限责任公司      1807052
                                                           S5       内蒙      河北凯达药业有限公司               20180801
        行在线检测和评价，以快速筛选甘草饮片中的抗氧化活
                                                           S6       山西      成都市齐安堂商贸有限公司             181002
        性成分；同时，结合高效液相色谱-飞行时间高分辨质谱                          S7       内蒙      济南历山药店                   1901005
        法（HPLC-TOF/MS）对筛选出的抗氧化活性成分进行初                      S8       新疆      济南海洲药房                   180501


        中国药房    2021年第32卷第2期                                               China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2  ·177 ·
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