Page 55 - 《中国药房》2021年第1期

利用 Design Expert 8.0.6 软件对试验结果进行回归 由图2A可知，固定液料比时，随乙醇体积分数的升
拟合分析，得到山茱萸叶总三萜含量（Y）对乙醇体积分 高，总三萜含量先升高后降低，在乙醇体积分数达到
数（A）、液料比（B）、提取时间（C）的三元二次回归方程： 70％～74％时其含量达到最大值；固定乙醇体积分数
Y＝7.01 + 0.55A + 0.16B + 1.250 × 10 － 3 C － 0.037AB + 时，随液料比的增大，总三萜含量变化不明显。同时，等
2
2
2
0.13AC－0.043BC－1.45A －0.13B + 0.16C 。从表 3 可 高线沿 B 轴变化相对密集，明显密于 A 轴方向，表明乙
以看出，失拟项P＝0.105 1，说明残差主要由随机误差组 醇体积分数对响应值峰值的影响比液料比大。由图2B
成，对优化试验结果影响不显著；交互项AB、AC、BC的P 可知，液料比与提取次数的交互作用不显著。固定液料
2
值均大于0.05，说明其交互作用较弱；A和A 的P值均小 比时，随提取时间的变化，总三萜含量没有明显改变；固
于 0.01，说明 A 因素对总三萜含量的影响很显著；B 的 定提取时间时，随液料比的增加，总三萜含量也没有发
P＜0.05，说明B因素对总三萜含量的影响显著；C的P＞ 生明显的变化。从图2C可知，固定提取时间时，随乙醇
0.1，说明 C 因素对总三萜含量的影响不显著，对于响应 体积分数的升高，总三萜含量先升高后降低，并在乙醇
值Y的波动起次要作用。因此，因素A、B、C对山茱萸叶 体积分数达到66％～74％时其含量达到最大值；固定乙
总三萜含量的影响主次顺序为：A＞B＞C，即乙醇体积 醇体积分数时，随提取时间的增加，总三萜含量并未发
分数＞液料比＞提取时间。 生明显改变。
在其他因素不变的情况下，选取 2 个交互因素对山 综合图 2 结果可知，乙醇体积分数对总三萜含量的
茱萸叶总三萜含量进行响应面分析，利用Design Expert 影响较为显著，提取次数和液料比对总三萜含量的影响
8.0.6软件绘制响应面图和等高线图（详见图2）。结果发 不显著。这与单因素试验结论不符。究其原因，这可能
现，乙醇体积分数与液料比的交互作用显著，即这2个因 与一开始将提取次数定为3次有关。当提取次数达到一
素的交互作用对山茱萸叶总三萜含量的影响显著；此 定程度时，山茱萸叶中的总三萜基本溶出完毕，这时无
外，乙醇体积分数与提取时间的交互作用较显著，液料 论是增大液料比或者是延长提取时间，所能够提取出的
比与提取时间的交互作用不显著。 总三萜基本已达到峰值，所以才导致液料比与提取时间
Y，％
40∶1 的交互作用不显著；而乙醇体积分数对山茱萸叶溶胀度
8
35∶1 的影响较大，可在一定程度上消减提取次数带来的负面
7
％
Y， 6 影响，使得乙醇体积分数对总三萜含量仍有较为显著的
5 B 30∶1
4 90 影响。
82 25∶1
40∶1 74 最优提取工艺的确定与验证
35∶1 66 2.7
30∶1 25∶1 58 A， ％ 20∶1
B 20∶1 50 50 58 66 74 82 90 利用Design Expert 8.0.6软件进行计算，得出山茱萸
A，％
叶总三萜的最佳提取工艺为：乙醇体积分数72.67％，液
A. 因素A与B的交互作用
Y，％ 料比38.04 ∶ 1（mL/g），提取时间60 min；预测总三萜含量
120
8 108 为7.28％。
7
％ 96 结合生产实际，将该工艺简化为：乙醇体积分数
Y， 6 min
5 C， 84 73％，液料比 38 ∶ 1（mL/g），提取时间 60 min。取 5.00 g
4 40∶1
120 35∶1 72 山茱萸叶粗粉，按照该工艺条件进行提取，平行操作 3
108 30∶1
96 60
84 25∶1 B 次。结果，总三萜含量分别为6.92％、6.91％、6.84％，平
60
C， min 72 20∶1 20∶1 25∶1 30∶1 35∶1 40∶1
B 均含量为 6.89％（RSD＝0.63％），与预测值的相对误差
B. 因素B与C的交互作用
为5.36％。
Y，％
120
3 讨论
8 108
7 近年来，一直有学者进行中药非传统入药部位的开
％ 6 96
Y， min 发及药用部位的扩大研究，如杜仲叶可以在某些方面代
5 C， 84
[20]
4 90 替杜仲（树皮）进行使用 。山茱萸叶作为山茱萸的非
82 72
120 74
108 66 ％ 60 传统药用部位，虽然表现出了一定的生物活性，但是少
96
84 58 A， 50 58 66 74 82 90
60 有学者对其进行研究，对山茱萸叶总三萜的研究更是鲜
C， min 72 50
A，％
C. 因素A与C的交互作用 见。因此，笔者选用果实成熟期的山茱萸叶进行研究，
图2 各因素交互作用对总三萜含量影响的响应面图和 旨在扩大山茱萸的入药部位，为后续山茱萸的开发奠定
等高线图 基础；同时，选取果实成熟期的山茱萸叶进行研究，可以
Fig 2 Response surface and contour plot of interac- 与山茱萸干燥成熟果实中的总三萜含量作比较，为后续
tive effects on the contents of total triterpenes 研究提供参考。
中国药房 2021年第32卷第1期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 1 ·49 ·