Page 37 - 《中国药房》2021年第1期

外增殖抑制作用），将细胞置于 37 ℃、5％CO2细胞培养
100
箱中培养 24 h 待细胞贴壁后，弃上清，然后将细胞分为
80
顺铂组、柴胡桂枝汤挥发油组（分别用1块板），试验均设 ％ 丰度， 60
阴性对照组。顺铂组分别添加含 10％FBS 和不同质量 40
20
浓度顺铂（4、8、16、32、64 mg/L，剂量参考文献[11]设置） 0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130
的 DMEM 培养基，柴胡桂枝汤挥发油组分别添加含 时间，min
10％FBS 和不同质量浓度挥发油（25、50、100、200、400 图1 正构烷烃C8～C36标准品的总离子流图
mg/L，以挥发油质量计，剂量由前期试验摸索得出）的 Fig 1 TIC chromatograms of C8-C36 control
DMEM 培养基，阴性对照组仅加入含 10％FBS 和 0.1％
DMSO 的 DMEM 培养基（记为 0 mg/L 组），并另设不含 100
80
细胞但加入含10％FBS和0.1％DMSO的DMEM培养基 ％ 60
的空白对照组，每组均设置5个复孔。加药后，将各组细 丰度， 40
胞置于37 ℃、5％CO2细胞培养箱中培养48 h，再在每孔 20
0
避光加入 MTT 溶液（5 mg/mL）10 μL，继续培养 4 h，弃 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130
时间，min
上清；每孔加入 DMSO 溶液 150 μL，于摇床上振摇 15
图2 柴胡桂枝汤挥发油的总离子流图
min，采用酶标仪测定490 nm波长处各孔的吸光度（A），
Fig 2 TIC chromatograms of volatile oil from Chaihu
计算各组细胞的增殖抑制率[增殖抑制率＝（A 阴性对照－
guizhi decoction
A 挥 发 油）/（A 阴 性 对 照－A 空 白 对 照）×100％]，并采用 GraphPad
表1 柴胡桂枝汤挥发油成分鉴定和相对含量测定结果
Prism 7.00 软件计算药物的半数抑制浓度（IC50 ）。试验
Tab 1 Component identification and relative content
重复3次。
determination results of volatile oil from Chai-
2.5 统计学方法
hu guizhi decoction
采用 SPSS 22.0 软件进行统计分析。试验数据用 保留指数
x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比 序号 成分 tx，min 相对含 分子式 CAS号 KI KI ＊
量，％
较采用LSD检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。 1 芳姜黄烯 52.35 17.65 C15H22 4176-6-1 1 482 1 472
2 β-甜没药烯 55.23 9.57 C15H24 495-61-4 1 507 1 500
3 结果 3 β-罗勒烯 7.83 7.05 C10H16 13877-91-3 1 026 1 024
3.1 柴胡桂枝汤挥发油成分的GC-MS分析结果 4 α-姜黄烯 58.16 5.35 C15H22 644-30-4 1 534 1 539
在柴胡桂枝汤挥发油中共分离出71个成分，通过质 5 α-雪松烯 48.41 2.48 C15H24 50894-66-1 1 448 1 447
6 δ-杜松烯 56.36 2.07 C15H24 483-76-1 1 518 1 514
谱库检索和人工图谱解析，并结合KI值比对，初步鉴定 7 愈创木烯 66.56 1.31 C15H24 88-84-6 1 609 1 651
了其中59个挥发性成分，占挥发油总峰面积的84.99％， 8 β-花柏烯 51.28 1.12 C15H24 18431-82-8 1 473 1 474
9 α-荜澄茄油烯 39.15 0.91 17699-14-8 1 366 1 366
包括烯烃类成分（序号1～18的化合物）的相对含量总和 C15H24
10 β-榄香烯 41.32 0.83 C15H24 515-13-9 1 385 1 387
为 51.47％、醛类成分（序号 19～33 的化合物）的相对含 11 2-龙脑烯 5.29 0.63 C10H16 4501-58-1 931 932
量总和为 13.62％、醇类成分（序号 34～43 的化合物）的 12 α-葎草烯 48.86 0.56 C15H24 6753-98-6 1 451 1 454
13 β-月桂烯 5.73 0.40 123-35-3 976 979
相对含量总和为 5.29％、酯类成分（序号 44～49 的化合 C10H16
14 α-异松油烯 11.30 0.39 C10H16 586-62-9 1 087 1 078
物）的相对含量总和为6.68％、酸类成分（序号50～53的 15 β-金合欢烯 49.60 0.34 C15H24 18794-84-8 1 458 1 449
化合物）的相对含量总和为2.14％、酚类成分（序号54～ 16 （+）香橙烯 47.49 0.30 C15H24 489-39-4 1 439 1 439
17 姜烯 43.36 0.27 C15H24 495-60-3 1 403 1 492
55的化合物）的相对含量总和为0.77％、其他类成分（序
18 β-人参烯 37.55 0.27 C15H24 117-39-5 1 352 1 385
号 56～59 的化合物）的相对含量总和为 5.03％。其中， 19 2，5-二甲基苯甲醛 4.93 4.24 C9H10O 5779-94-2 946 948
含量较高的化合物为芳姜黄烯（17.65％）、β-甜没药烯 20 苯甲醛 4.53 1.86 C7H6O 100-52-7 960 982
21 α-柠檬醛 28.59 1.83 C10H16O 5392-40-6 1 272 1 249
（9.57％）、β-罗勒烯（7.05％）、α-姜黄烯（5.35％）、2，5-二
22 柠檬醛 25.21 1.38 C10H16O 5392-40-5 1 241 1 241
甲基苯甲醛（4.24％）、异丁酸芳樟酯（2.70％）、α-雪松烯 23 正己醛 2.46 0.57 C6H12O 66-25-1 803 806
（2.48％）、δ-杜松烯（2.07％）。正构烷烃混合标准品总离 24 香茅醛 18.53 0.52 C10H18O 106-23-0 1 174 1 132
25 庚醛 3.77 0.51 C7H14O 111-71-7 903 905
子流图见图 1，柴胡桂枝汤挥发油总离子流图见图 2，柴 26 3-甲氧基肉桂醛 12.09 0.41 C10H10O2 56578-36-0 1 101 1 170
胡桂枝汤挥发油成分鉴定和相对含量测定结果见表1。 27 肉桂醛 6.04 0.38 C9H8O 104-55-2 988 985
3.2 柴胡桂枝汤挥发油对 A549 细胞体外增殖的抑制 28 视黄醛 102.26 0.38 C20H28O 116-31-4 2 088 2 066
29 邻甲氧基肉桂醛 24.65 0.38 C10H10O2 1504-74-1 1 232 1 220
作用 30 十二醛 44.08 0.34 C12H24O 112-54-9 1 410 1 386
与阴性对照组比较，顺铂不同质量浓度组和柴胡桂 31 α-己基肉桂醛 83.32 0.28 C15H20O 101-86-0 1 739 1 748

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