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indexes of drug group were all increased siginificantly（P＜0.01）. LC-MS chromatogram of serum samples in normal group and
model group were significantly different，and LC-MS metabonomics data of serum samples in drug group were similar to those of
normal group. Multivariate statistical analysis and correlated database analysis revealed that compared with normal group，serum
contents of 17 metabolites as L-isoleucine，eicosapentaenoic acid were increased significantly in model group，while the contents of
4 metabolites as spermidine were decreased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）. Compared with model group，Huangqi injection
could reverse the serum contents of 9 metabolites in mice， such as citric acid， L-proline， acetylcarnitine， L-isoleucine，
L-phenylalanine，sphingosine-1-phosphate，lysophosphatidylinositol，eicosapentaenoic acid and linoleic acid （P＜0.05 or P＜
0.01）， which were associated with linoleic acid metabolism， biosynthesis of phenylalanine， tyrosine and tryptophan， and
phenylalanine metabolism（metabolism pathway influential values were all higher than 0.1）. Correlation analysis showed that there
was a significant correlation between blood routine indexes and the contents of D-sphingosine，linoleic acid and citric acid in model
group（the absolute values of r were generally greater than 0.5）. CONCLUSIONS：Huangqi injection can increase the counts of
leukocytes，lymphocytes，neutrophils and monocytes in leucopenia model mice. The increase of leukocytes may be related to
linoleic acid metabolism，biosynthesis of phenylalanine，tyrosine and tryptophan，and phenylalanine metabolism.
KEYWORDS Huangqi injection；Leucopenia；Cyclophosphamide；LC-MS；Metabolomics；Mice

黄芪注射液由单味黄芪药材经水提醇沉工艺制备 菌注射用水（石家庄四药有限公司，批号：1903093205，
而成，收录于《卫生部药品标准·中药成方制剂（第 17 规格：500 mL）；甲醇、乙腈、甲酸均为色谱纯，其余试剂
册）》 ，具有益气养元、扶正祛邪、养心通脉、健脾利湿等 均为分析纯，水为超纯水。
[1]
功效，可用于治疗心气虚损、心功能不全和血脉瘀阻之 1.3 动物
病毒性心肌炎、脾虚湿困之肝炎等症 [1-4] ，在临床上亦可 SPF级昆明种小鼠24只，雄性，体质量（20±2）g，由
用于治疗消化系统疾病、呼吸系统疾病、心血管系统疾 山西医科大学实验动物中心提供，动物生产许可证号：
病、原发性肾病综合征等 [5-10] 。有研究指出，黄芪注射液 SCXK（晋）2019-0001。所有小鼠均自由摄食、饮水，适
在临床上可作为肿瘤治疗的辅助用药，具有明显的升高 应性喂养7 d后进行后续实验。
白细胞的作用 [11-14] ，但有关该作用具体机制的研究报道 2 方法与结果
较少。本课题组前期采用核磁共振（NMR）代谢组学方 2.1 分组与给药
法研究发现，黄芪注射液升高白细胞的机制可能与其调 将小鼠随机分为正常组、模型组和药物组，每组 8
控能量代谢、氨基酸代谢、氧化应激反应和胆碱代谢有 只。模型组和药物组小鼠均腹腔注射环磷酰胺（80
[15]
关 。但由于生物样本的复杂性，代谢物的 NMR 图谱 mg/kg，每日1次，连续3 d）以复制白细胞减少症模型，正
通常会出现严重的信号重叠，加之方法灵敏度相对较 常组小鼠腹腔注射等体积无菌注射用水。通过比较模
低，使得对差异代谢物的检测不够全面，故该方法并不 型组、药物组与正常组小鼠血常规指标[白细胞（WBC）、
适 用 于 分 析 低 含 量 的 代 谢 物 [16] 。 气 质 联 用 技 术 中性粒细胞（NE）、淋巴细胞（LY）、单核细胞（MO）计数]
（LC-MS）具有强大的分离能力，且灵敏度较高，现已被 是否有显著差异来判断模型是否复制成功 。造模成
[17]
广泛应用于代谢组学研究中 。基于此，本研究借助 功后，药物组小鼠腹腔注射黄芪注射液（0.04 mL/10 g，
[16]
LC-MS 代谢组学的方法对黄芪注射液升高白细胞的药 剂量设置参考本课题组前期研究结果 ），正常组和模
[15]
效作用及其具体机制进行进一步探讨，以期为该药的临 型组小鼠均腹腔注射等体积灭菌注射用水，每日1次，连
床应用提供更为充分的实验依据。 续7 d。在实验过程中，每隔2 d称定小鼠体质量1次，并
1 材料 及时根据体质量调整环磷酰胺和黄芪注射液的剂量。
1.1 仪器与软件 2.2 血样采集
HEMAVET 950FS 型动物血液分析仪（美国 Drew 各组小鼠末次给药并禁食、禁水过夜后处死，摘取
Scientific 公司）；Q Exactive 型高分辨 LC-MS 仪、Xcali- 眼球取血适量，置于含乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2 ）的
bur 3.2工作站软件、Compound Discoverer 3.0软件（美国 EP管中，用于血常规指标检测；同法取血适量，不抗凝，
Thermo Fisher Scientific 公司）；Simca-P 13.0 软件（瑞典 于 4 ℃下以 13 000 r/min 离心 15 min，分离得血清样品，
Umetrics公司）；KDC-149HR型离心机（安徽中科中佳科 于－80 ℃条件下保存，用于LC-MS代谢组学分析。
学仪器有限公司）。 2.3 小鼠血常规指标水平检测
1.2 药品与试剂 取“2.2”项下各组小鼠经抗凝处理的血样适量，使用
注射用环磷酰胺（德国 Baxter Oncology GmbH 公 动物血液分析仪检测其 WBC、NE、LY、MO 计数等指
司，批号：8J270A，规格：1.0 g）；黄芪注射液（正大青春宝 标。采用 SPSS 21.0 软件对数据进行统计分析；血常规
药业有限公司，批号：1807163，规格：每支装 10 mL）；灭 指标检测结果均以x±s表示，组间比较采用单因素方差

·2628 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 21 中国药房 2020年第31卷第21期