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金银花的HPLC指纹图谱建立及其抗炎作用谱-效关系研究 Δ

缪艳燕 ，徐帮会，徐 剑，张永萍，刘 杰，刘 耀（贵州中医药大学药学院，贵阳 550025）
＊

中图分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）20-2497-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.20.12

摘 要 目的：建立金银花指纹图谱，并研究其抗炎作用的谱-效关系。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）。色谱柱为Diamonsil
C18，流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，柱温为30 ℃，检测波长为238 nm，进样量为10 μL。以绿原
酸为参照，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》建立10批不同产地金银花药材样品的HPLC指纹图谱；通过对照
品比对，指认共有峰对应的化学成分，并进行相似度分析。采用二甲苯、角叉菜胶及棉球诱导的急、慢性炎症小鼠模型评价10批
金银花药材水提物对耳、足、肉芽肿的肿胀抑制率，并计算平均值，作为综合药效指标；基于共有峰峰面积和综合药效指标，采用灰
色关联度分析法（GRA）和偏最小二乘回归分析法（PLSR）联合分析金银花指纹图谱与抗炎作用的谱-效关系，选择GRA关联度大
于0.7且PLSR模型回归系数大于0的色谱峰为特征峰，计算10批金银花药材中特征峰峰面积占共有峰峰面积总和的百分比（即
“峰占比”）。结果：10批金银花药材样品的HPLC指纹图谱中有共有峰25个，相似度为0.775～0.994；指认出其中9个成分，分别为
芦丁（峰18）、金丝桃苷（峰20）、异绿原酸B（峰22）、木犀草素（峰21）、绿原酸（峰9）、马钱苷（峰10）、新绿原酸（峰2）、异绿原酸C
（峰 25）、异绿原酸 A（峰 23）。10 批金银花对小鼠耳肿胀、足肿胀、肉芽肿均具有抑制作用，抑制率平均值为 47.95％～56.52％；
GRA 分析显示，关联度由大到小依次为峰 8＞12＞18＞16＞3＞11＞20＞22＞19＞21＞1＞9＞10＞13＞24＞14＞2＞17＞25＞
23＞5＞4＞15，且其关联度均大于0.7；峰2、4、5、7、8、10、12、13、14、15、16、17、18、20、21、22、24的PLSR模型回归系数均大于0，与
抗炎作用成正相关；除峰7外，其余均为特征峰，且峰5、8、10、16、18、20、24的变量重要性投影值均大于1。10批金银花药材特征
峰的峰占比为58.61％～71.19％。结论：成功建立金银花的HPLC指纹图谱，10批样品组分相似，抗炎成分含量相对较高；暂定金
银花特征峰峰占比不得低于51.8％。
关键词 金银花；高效液相色谱法；指纹图谱；抗炎作用；谱-效关系；灰色关联度；偏最小二乘法

Establishment of HPLC Fingerprint of Lonicera japonica and Study on Its Anti-inflammatory Spectrum-
effect Relationship
MIAO Yanyan，XU Banghui，XU Jian，ZHANG Yongping，LIU Jie，LIU Yao（School of Pharmacy，Guizhou
University of TCM，Guiyang 550025，China）

ABSTRACT OBJECTIVE：To establish fingerprint of Lonicera japonica，and to study its anti-inflammatory spectrum-effect
relationship. METHODS：HPLC was adopted. The determination was performed on Diamonsil C18 column with mobile phase
consisted of 0.1％ formic acid solution-acetonitrile（gradient elution）at the flow rate of 1.0 mL/min. The column temperature was
30 ℃，and detection wavelength was 238 nm. The sample size was 10 μL. Using chlorogenic acid as reference，HPLC fingerprint

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Δ 基金项目：国家重点研发计划子课题（No.2018YFD0700204）；贵
州省药物新剂型新工艺科技创新人才团队项目（No.黔科合平台人才 473-477.
（收稿日期：2020-06-14 修回日期：2020-09-21）
〔2017〕5655）；贵州省国内一流建设学科中药学（No.GNYL〔2017〕008）
（编辑：罗 瑞）
＊讲师，硕士。研究方向：中药制剂新技术与新剂型。E-mail：
mmyy79@163.com

中国药房 2020年第31卷第20期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 20 ·2497 ·