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人们的健康。缺氧和局部缺血后会导致细胞能量供应                             参考文献
        不足，进而造成心肌损伤，此时应尽快恢复正常的血供                            [ 1 ]  翟恒博，刘俊.缺血性心脏病再认识[J].心血管病学进展，
        以使心脏损伤降至最低；然而在恢复血供的同时，再灌                                 2016，37（4）：395-400.
        注损伤亦随之出现，并有可能进一步加重病情 。有研                            [ 2 ]  吴晓燕，苗琳，郑蕊，等.心肌缺血再灌注损伤的研究进展
                                                [15]
        究发现，I/R所导致的细胞凋亡与自噬密切相关，当发生                               [J].中国临床药理学杂志，2016，32（11）：1043-1045.
        I/R 损伤后，机体可通过自噬作用来清除受损的细胞器                          [ 3 ]  YE Y，YANG M，ZHANG S，et al. Percutaneous coro-
                                        [17]
        来减少细胞凋亡，从而发挥保护作用 。自噬是细胞的                                 nary intervention versus cardiac bypass surgery for left
        一种自我降解和清除的动态过程，当机体受到外界刺激                                 main coronary artery disease：a trial sequential analysis[J].
        而导致细胞器受损时，就会激活自噬作用以清除受损细                                 Medicine，2017. DOI：10.1097/MD.0000000000008115.
        胞器和蛋白质       [18-19] 。据相关文献报道，有的中药成分可               [ 4 ]  HAUSENLOY DJ，YELLON DM. Myocardial ischemia-
        通过抑制神经元的过度自噬来协助I/R后相应脏器的功                                reperfusion injury：a neglected therapeutic target[J]. J Clin
        能恢复 。可见，自噬作为 I/R 损伤中重要的病理变化，                             Invest，2013，123（1）：92-100.
               [7]
                                                            [ 5 ]  谢凤，柳威，陈临溪.自噬参与心脏疾病调控的研究进展
        已经成为学者们研究的热点 。
                                [20]
                                                                 [J].生物化学与生物物理进展，2012，39（3）：224-233.
            有研究表明，细胞上清液中 LDH 的活性可以反映
                                                            [ 6 ]  王晓茹，安芳.自噬及其在脑缺血再灌注损伤中作用机制
        细胞自噬水平，且 LDH 活性升高，细胞自噬作用增强；
                                                                 [J].神经药理学报，2016，6（1）：41-48.
        同时，选用 MDC 法可以直观地评估药物作用后的细胞                          [ 7 ]  杨海龙，刘春萍，刘建滔，等.基于自噬探讨丹蒌片减轻心
        自噬水平，即MDC平均荧光强度升高，细胞自噬水平增
                                                                 肌缺血再灌注损伤的机制研究[J].中国中西医结合杂
          [21]
        强 。在自噬过程中，LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ是生成自噬体膜
                                                                 志，2020，6（2）：2-6.
        的必备物质，是自噬体形成的最重要分子，因此常被作                            [ 8 ]  罗慧英，杨林，杨焕，等.当归挥发油对大鼠局灶性脑缺血
        为自噬的标志蛋白，且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高时，细胞
                                                                 再灌注损伤的保护作用[J].中国临床药理学与治疗学，
        的自噬水平亦升高 ；而自噬底物蛋白 p62 可通过在 C                             2012，17（4）：387-391.
                         [22]
        端与泛素化蛋白结合，以及在 N 端与 LC3Ⅱ结合，从而                        [ 9 ]  肖军花，周健，丁丽丽，等.当归挥发油对子宫的双向作用
                       [23]
        参与自噬的降解 。因此，通过检测 LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值                             及其活性部位筛选[J].华中科技大学学报（医学版），
        和 p62 蛋白的表达水平，可以评估细胞自噬水平的高                               2003，32（6）：589-596.
        低。此外，在自噬体形成的初始阶段，Beclin-1可与Ⅲ型                       [10]  李健蕊，柳钟勋，左增艳.当归内酯对小鼠细胞免疫功能
        胞内磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、p150 蛋白结合形成Ⅲ                          的影响[J].中药药理与临床，2004，20（5）：13-14.
        型PI3K复合体，并作为该复合体的中心蛋白，主要发挥                          [11]  冯景奇，柳钟勋.当归多糖及当归内酯对小鼠细胞免疫功
                             [24]
        促使自噬体成熟的作用 ；同时，Beclin-1 还能与 Atg1、                        能的影响[J].中国免疫学杂志，1998，14（4）：279-282.
        Atg9 作用，共同参与调控吞噬泡的形成，最终促进自噬                         [12]  冯景奇，柳钟勋.当归内酯拮抗环孢菌素 A、氢化可的松
        的发生 。因此，本研究通过检测 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值                            及抗肿瘤药物的免疫抑制作用[J].中国免疫学杂志，
               [25]
        和Beclin-1、p62蛋白的表达水平来评价药物对细胞自噬                           2000，16（1）：22-24.
        水平的影响。3-MA是一种特异性针对自噬作用的常用                           [13]  肖军花，丁丽丽，周健，等.当归 A3部位对心肌生理特性
                                           [26]
        抑制剂，广泛应用于自噬诱导的研究中 ，因此笔者选                                 和动作电位的影响[J].中国药理学通报，2003，19（9）：
        用 3-MA 作为阳性对照，以对比研究当归挥发油对 H/R                            1066-1068.
        损伤H9C2细胞自噬的影响。结果显示，与空白组比较，                          [14]  李敏，孙虹，李琰，等.不同产地当归对血小板聚集及凝血
        H/R 组细胞上清液中 LDH 活性显著升高，细胞中 MDC                           时间活性的比较[J].中国中医基础医学杂志，2003，9（2）∶
        平均荧光强度显著升高，Beclin-1 表达水平和 LC3Ⅱ/                          47-50.
                                                            [15]  吴世勇.自噬在曲美他嗪保护心肌缺血再灌注损伤中的
        LC3Ⅰ比值升高，p62 表达水平降低（P＜0.05）。这表明
        发生H/R后，细胞的自噬作用增强。与H/R组比较，H/R+                            作用及机制[D].重庆：重庆医科大学，2019.
                                                            [16]  尚颖.自噬抑制剂 3-MA 增强顺铂对神经母细胞瘤化疗
        药物组细胞上清液中 LDH 活性均显著降低，且 H/R+药
                                                                 效果及其分子机制的研究[D].石家庄：河北医科大学，
        物组和 H/R+自噬抑制剂组细胞中 MDC 平均荧光强度
                                                                 2017.
        均显著降低，Beclin-1 表达水平和 LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显
                                                            [17]  王晓茹，安芳.自噬及其在脑缺血再灌注损伤中作用机制
        著减少，p62表达水平均显著升高（P＜0.05）。这表明经                            [J].神经药理学报，2016，6（1）：41-48.
        当归挥发油及自噬抑制剂干预后，细胞的自噬作用受到                            [18]  李春明，舒适，钱小路，等.自噬与脑缺血再灌注损伤的研
        了抑制。                                                     究进展[J].中国脑血管病杂志，2015，12（6）：330-333.
            综上所述，当归挥发油能显著降低H/R损伤心肌细                         [19]  KIM H，LEE MS. Autophagy：a key player in cellular and
        胞 H9C2 的自噬水平，这一作用与其可降低自噬相关蛋                              body metabolism[J]. Nat Rev Endocrinol，2014，10（6）：
        白Beclin-1、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ蛋白的表达，增加p62蛋白的                        322-337.
        表达有关。                                               [20]  WANG JF，MEI ZG，FU Y，et al. Puerarin protects rat


        ·2496 ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 20                                 中国药房    2020年第31卷第20期
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