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focal cerebral ischemia model，model rats were given relevant medicine or normal saline intragastrically，twice a day，for
consecutive 3 d. The neurological deficit of rats in each group was scored；the volume of cerebral infarction was measured by 2，3，
5-triphenyltetrazolium chloride（TTC）staining；water content of cerebral tissue and the permeability of blood-brain barrier were
measured；HE staining was performed to observe the pathological change of cerebral tissue of rats；the expression of miR-141-3p
in cerebral tissue of rats was measured by qRT-PCR；the protein expression of Notch and Nrf2 in cerebral tissue of rats were
measured by Western blotting assay. RESULTS：Compared with sham operation group，the neurological deficit score，expression of
Notch-1 and Nrf2 in model group were significantly lowered（P＜0.05）；infarction volume，brain water content，the permeability
of blood-brain barrier and the expression of miR-141-3p in cerebral tissue were increased significantly（P＜0.05）；the distribution
of cortical cells was disordered，and inflammatory infiltration and necrosis were observed in a large number of nerve cells.
Compared with model group，the neurological deficit score，the protein expression of Notch-1 and Nrf2 in cerebral tissue were
significantly increased in ICSⅡgroups（P＜0.05）；infarction volume，brain water content，the permeability of blood-brain barrier
and the expression of miR-141-3p in cerebral tissue were decreased significantly（P＜0.05）；the arrangement of cortical cells was
regular，and the inflammatory infiltration and necrosis of nerve cells were decreased significantly. CONCLUSIONS：ICS Ⅱ can
promote the recovery of neurological function in focal cerebral ischemic model rats，which may be related to down-regulation of
miR-141-3p and activation of Notch/Nrf2 axis.
KEYWORDS Icariside Ⅱ；miR-141-3p；Notch；Nuclear factor erythroid-2-related factor 2；Focal cerebral ischemia model；Rats

缺血性脑卒中是一种病因复杂、危害性大的脑血管 司）；KH19 型台式高速离心机（湖南凯达科学仪器有限
疾病，临床表现为认知功能障碍、肢体残疾等症状，而且 公司）。
脑组织长期缺血缺氧还可引起永久性神经元凋亡和损 1.2 药品与试剂
伤，严重影响患者的生命健康和生活质量 [1-2] 。临床上治 ICSⅡ原料药（南京泽郎医药科技有限公司，批号：
疗缺血性脑卒中常采用调节血压、调节血脂、抗血小板 MH150601S02，纯度：98％）；甲酰胺（上海麦克林生化科
聚集、溶栓等方法，同时在该疾病早期进行神经保护也 技有限公司，批号：F809511）；RNA 提取试剂盒（北京天
十分重要 。目前，采用中药治疗缺血性脑卒中已经成 根生化科技有限公司，批号：DP430）；逆转录试剂盒（美
[3]
为研究热点，其中淫羊藿的主要活性成分淫羊藿次苷Ⅱ 国 Genecopoeia 公司，批号：C0210B）；ECL 蛋白显色试
（IcarisideⅡ，ICSⅡ）具有延缓衰老、抗疲劳、改善心脑血 剂盒（上海生工生物工程有限公司，批号：32109）；兔抗
[4]
管功能、抗氧化等药理作用 。研究还发现，ICSⅡ具有 鼠 Notch-1 单 克 隆 抗 体（美 国 Abcam 公 司 ，批 号 ：
缓解大鼠脑缺血再灌注损伤的作用 [5-6] 。微核醣核 EP1238Y）；兔抗鼠β-actin单克隆抗体（美国Sigma公司，
酸-141-3p（miR-141-3p）是非编码微小 RNA（miRNA）， 批号：A5441）；兔抗鼠 Nrf2 多克隆抗体（北京博奥森生
能够与目标mRNA的3-非编码区域碱基互补配对结合， 物技术有限公司，批号：BS-1074R）；辣根过氧化物酶
[7]
导致mRNA降解或翻译抑制 。Notch信号通路（Notch） （HRP）标记的羊抗兔IgG二抗（批号：873703275671）、伊
与神经系统疾病密切相关，在血管发育、血管损伤修复 文思蓝（EB）染色液（批号：DK0001）、苏木素-伊红（HE）
及减轻炎症反应中发挥着重要作用 。核因子 E2 相关 染色试剂盒（批号：C200201）、2，3，5-三苯基氯化四氮
[8]
因子2（Nrf2）具有抗炎和抗氧化作用，研究发现，Notch-1 唑（TTC）染色液（批号：181532）、二喹啉甲酸（BCA）蛋
能够靶向调控 Nrf2 的表达，进而参与抗氧化作用 。基 白浓度测定试剂盒（批号：20170502）均购自北京索莱宝
[9]
于此，本研究通过构建局灶性脑缺血大鼠模型并使用 科技有限公司；其余试剂均为分析纯或实验室常用规
ICSⅡ进行干预，旨在从 miR-141-3p/Notch/Nrf2 轴探讨 格，水为蒸馏水（三级）。
ICSⅡ对局灶性脑缺血模型大鼠神经功能的改善作用， 1.3 动物
为 ICSⅡ在临床上用于缺血性脑卒中的治疗提供理论 SPF 级雄性 Wistar 大鼠 130 只，7～8 周龄，体质量
依据。 220～250 g，购自四川大学实验动物中心[动物生产许可
1 材料 证号：SCXK（川）2018-026]。大鼠饲养于山东大学实验
1.1 仪器 动物中心动物房屏障环境[动物使用许可证号：SYXK
ZF-388型全自动凝胶成像分析系统（深圳三利化学 （鲁）2019-0005]，室温为 20～25 ℃，相对湿度为 50％～
品有限公司）；CFX96 型 qRT-PCR 扩增仪、Trans-Blot 60％，通风良好。大鼠自由进食饮水，适应性饲养1周后
Turbo TM 型Western转膜仪、DDY-10型电泳仪、JS680D型 进行实验。实验严格遵循“3R”原则给予实验动物人道
凝胶成像仪、蛋白凝胶成像仪（美国 Bio-Rad 公司）； 关怀。
HY704-4 型双层烘箱（上海精密仪器仪表有限公司）； 2 方法
UV-1800紫外-可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公 2.1 造模、分组与给药
司）；AB204-A型电子分析天平[梅特勒-托利多国际贸易 造模前大鼠均行神经功能评分（方法见“2.2”项），剔
[10]
（上海）有限公司]；SMZ645型光学显微镜（日本Nikon公 除异常大鼠后，采用文献方法 改良后构建局灶性脑缺

中国药房 2020年第31卷第19期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 19 ·2387 ·