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substance of peak 3 and dihydromyricetin may be the main active components of A. grossedentata.
KEYWORDS Ampelopsis grossedentata;Fingerprint;Anti-inflammatory activity;Spectrum-effect relationship;Grey relational
analysis
葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄 Ampelopsis gros- (桂)2014-0002。所有动物均适应性饲养 3 天后进行药
sedentata(Hand.-Mazz.)W. T. Wang 是一种茶药两用植 效学实验。
[1]
物 ,广泛分布于我国广东、广西、湖南、湖北等长江以南 2 方法与结果
地区。藤茶是显齿蛇葡萄的干燥嫩茎叶,其味甘、性凉, 2.1 藤茶不同极性部位的提取制备
具有清热解毒、消炎利咽之功效,民间主要用于治疗咽 2.1.1 藤茶70%乙醇提取总部位 藤茶药材粉碎后,称
喉炎、皮肤病、感冒发烧等症 [2-3] 。现代研究表明,藤茶有 取粗粉 500 g,加入 70%乙醇 5 000 mL 加热回流提取 2
效成分为黄酮类物质,主要包括二氢杨梅素、杨梅素、杨 次,分别提取 1、0.5 h;合并提取液,减压浓缩至无醇味,
梅苷、芦丁、槲皮素、木犀草素等,具有抗炎、抗肿瘤、降 称定浓缩液质量后混匀。取上述浓缩液约一半量,称定
血糖等药理作用 [4-5] 。目前对于藤茶的研究主要是单方 质量,减压回收乙醇后以水浴蒸干,得藤茶 70%乙醇提
面研究其化学成分或药理作用等 [6-9] ,尚未从整体化学组 取总部位,记为“Ⅰ部位”(得率为46.01%)。
分水平研究其抗炎活性相关物质,也无法表征其抗炎物 2.1.2 藤茶不同有机溶剂萃取部位 取“2.1.1”项下剩
质基础。谱效关系研究能够表征中药化学成分-药效相 余浓缩液,加入水 1 000 mL 分散,然后依次用等体积石
关关系,可以较为快捷地从复杂体系中筛选活性化合 油醚、氯仿、乙酸乙酯、水饱和正丁醇多次萃取,每种溶
物 [10-13] 。本研究以藤茶的抗炎作用为目标,通过制备藤 剂均萃取至无色;将各溶剂萃取液分别合并,减压回收
茶不同极性部位并采集其高效液相色谱(HPLC)指纹图 溶剂后浓缩至干,称定质量,得到藤茶不同极性溶剂萃
谱,然后采用经典抗炎模型考察上述不同极性部位在小 取样品,分别记为“Ⅱ~Ⅴ部位”(得率分别为 2.15%、
鼠体内的抗炎活性,并通过灰色关联分析法 [11,13] 研究上 6.74%、14.63%、4.38%)。
述极性部位的 HPLC 指纹图谱与抗炎活性之间的关联 2.1.3 藤茶水提取部位 称取“2.1.1”项下藤茶药材粗
性,旨在探讨藤茶发挥抗炎作用的物质基础,为后期深 粉100 g,加入水1 000 mL,煎煮2次,每次1 h;合并煎煮
入开发利用藤茶资源提供理论依据。 液,水浴浓缩至干,称定质量,得藤茶水提取部位,记为
1 材料 “Ⅵ部位”(得率为33.35%)。
1.1 仪器 2.2 藤茶不同极性部位的体内抗炎活性考察
e2695 型 HPLC 仪,含四元泵、柱温箱、可变波长检 采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验考察藤茶不同极
测器(美国Waters公司);SQP型百万分之一电子分析天 性部位的体内抗炎活性。取小鼠 80 只,分为 8 组,分别
平[赛多利斯科学仪器(北京)有限公司];CW2002-Z 型 为藤茶不同极性部位组[Ⅰ~Ⅵ部位组,0.07 g/10 g(按
红外炉[艾美特电器(深圳)有限公司];HWS-26 型电热 生药量计);给药剂量根据前期样品溶解度、药液黏稠
恒温水浴锅(上海一恒科学仪器有限公司);RE-600A型 度、小鼠耐受性等因素的预实验结果进行设置]、阴性对
旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);DHG-9203A 型电 照组(生理盐水)和阳性对照组(地塞米松,0.045 mg/10 g;
[11]
热恒温鼓风干燥箱(上海齐欣科学有限公司)。 剂量参考文献方法 按人/小鼠等效剂量换算后设置),
1.2 药品与试剂 每组 10 只。Ⅰ~Ⅵ部位提取物根据其出膏得率,以
二氢杨梅素、杨梅素对照品(实验室自制,纯度均大 0.5%CMC-Na溶液配制成相应药物溶液(质量浓度均为
于99.0%);醋酸地塞米松片(浙江仙琚制药股份有限公 0.35 g/mL,按生药量计);地塞米松以 0.5%CMC-Na 溶
司,批号:170784,规格:0.75 mg);0.9%氯化钠注射液 液配制成质量浓度为0.225 mg/mL的药物溶液。各组小
(贵州科伦药业有限公司,批号:D18120504;作生理盐水 鼠分别灌胃生理盐水或相应药物溶液,每日1次,灌胃体
用);乙腈为色谱纯,石油醚(60~90 ℃)、氯仿、乙酸乙 积均为 0.2 mL/10 g,连续给药 5 d。在末次给药 30 min
酯、正丁醇、磷酸、二甲苯等试剂均为分析纯,水为纯 后,于各组小鼠右耳的内外两侧均匀涂抹二甲苯 10 μL
净水。 进行致炎。1 h 后处死小鼠,用打孔器在其左右耳相同
藤茶药材产自湖南张家界,由广西中医药大学中药 位置处打孔,称量并记录其左、右耳片的质量,计算小鼠
鉴定学教研室谭勇教授鉴定为葡萄科蛇葡萄属植物显 的耳肿胀度及肿胀抑制率[耳肿胀度=右耳片质量-左
齿蛇葡萄 A. grossedentata(Hand.-Mazz.)W. T. Wang 的 耳片质量;耳肿胀抑制率=(模型组耳片肿胀度-给药
干燥嫩茎叶。 组耳片肿胀度)/模型组耳片肿胀度×100%]。采用SPSS
1.3 动物 24.0 软件对实验数据进行统计分析;数据均以 x±s 表
SPF 级昆明种小鼠,雌性,体质量 18~22 g,购自广 示,组间比较采用 t 检验;以 P<0.05 为差异有统计学
西医科大学动物实验中心,动物生产许可证号:SCXK 意义。
中国药房 2020年第31卷第19期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 19 ·2383 ·