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样品的 HPLC 指纹图谱中 5 个共有峰峰面积（即按称样 据关联序结果可知，抗炎效果较强的是3号峰和2号峰，
量和出膏得率折算成相等生药量后对应的峰面积）和上 两者关联度均大于0.8。
述样品对小鼠耳肿胀的抑制率建立数据集，结果见表2。 表5 藤茶不同极性部位的共有峰与肿胀抑制率的关联
表2 藤茶不同极性部位的HPLC指纹图谱共有峰面积 度和关联序
和抑制率 Tab 5 Correlation degree and order between com-
Tab 2 Common peak area of HPLC fingerprints and mon peaks and swelling inhibition rate of dif-
inhibition rate of different polar parts of A. ferent polar parts of A. grossedentata
grossedentata 共有峰 关联度 关联序
1号峰 0.661 3 4
共有峰峰面积
样品 耳肿胀抑制率，％ 2号峰 0.822 7 2
1号峰 2号峰 3号峰 4号峰 5号峰
Ⅰ部位 67 019.9 2 137 667.0 268 293.6 477 208.8 8 282 217.3 54.07 3号峰 0.825 2 1 3
0.774 9
4号峰
Ⅱ部位 15 911.7 11 439.4 1 363.3 3 968.7 221 537.0 9.76
Ⅲ部位 2 188.8 324 993.2 16 235.8 7 918.6 1 690 908.9 11.71 5号峰 0.616 1 5
Ⅳ部位 27 584.4 3 484 770.2 499 315.6 844 999.8 6 973 527.8 30.54 3 讨论
Ⅴ部位 23 657.2 121 459.8 22 598.4 87 189.6 301 006.5 11.51 3.1 色谱条件的选择
Ⅵ部位 75 779.7 1 234 275.5 274 353.9 270 540.6 1 883 136.2 30.45
本研究考察了多种十八烷基硅烷键合相色谱柱，发
2.4.2 数据无量纲化处理 由于表2数据中峰面积和肿胀
现 Agilent Poroshell 120 EC-C18 （4.6 mm × 250 mm，4.0
抑制率的量纲不一致，因此采用均值化法对数据进行无量
μm）的分离效果明显优于其他5.0 μm粒径的色谱柱；采
纲化处理：K′ ＝Ki（j） /Ki（j） ，K′ ＝Ki（t） /Ki（t） 。式中，K′ 为
用乙腈-0.1％磷酸水溶液进行梯度洗脱，获得的色谱图
i （j）
i （t）
i （j）
原始数据均值化处理后的数据，Ki（j） 为原始数据，Ki（j） 为
基线平稳，色谱峰峰形状佳、分离度好。
第 i 批样品第 j 个指标的均值化处理后的数据，t 为参考
3.2 藤茶不同极性部位的谱-效关系分析
序列 [11，13] ，结果见表3。
藤茶功效清热解毒、消炎利咽，民间主要用于治疗
表3 原始数据无量纲化处理结果
咽喉炎、皮肤病、感冒发烧等症，因此本研究选择抗炎活
Tab 3 Dimensionless processing results of raw data
性作为藤茶药效学指标对其药效进行评价；中药指纹图
均值化共有峰峰面积
样品 均值化耳肿胀抑制率 谱作为一种综合的可量化的检测手段，可以反映中药中
1号峰 2号峰 3号峰 4号峰 5号峰
Ⅰ部位 1.896 1.753 1.488 1.692 2.568 2.192 化学成分的构成和含量，故本研究选择HPLC指纹图谱
Ⅱ部位 0.450 0.009 0.008 0.014 0.069 0.396 作为检测藤茶中化学成分的手段。灰色关联法是根据
Ⅲ部位 0.062 0.267 0.090 0.028 0.524 0.475 因素之间发展趋势的相似或相异程度，作为衡量因素间
Ⅳ部位 0.780 2.858 2.768 2.997 2.162 1.238 关联程度的一种方法，该方法对样本数量和数据规律性
Ⅴ部位 0.669 0.100 0.125 0.309 0.093 0.467
Ⅵ部位 2.143 1.012 1.521 0.959 0.584 1.234 的要求较低，适用于评价中药化学成分与药效之间的关
2.4.3 关联系数的计算 以藤茶不同极性部位（Ⅰ～ 联程度，筛选功效成分 [11，13] 。本研究采用灰色关联分析
Ⅵ）对小鼠耳肿胀的抑制率为参考序列（t），以峰面积为 对藤茶不同极性部位的谱-效关系进行考察，旨在筛选
比较序列（j），求参考序列与比较序列的灰色关联系数： 出藤茶中的抗炎活性物质。结果显示，藤茶不同极性部
ξi（j） ＝（minΔKi（j） ′+ρ×maxΔKi（j） ′）/（|Ki（j） ′－Ki（t） ′|+ρ× 位的 HPLC 指纹图谱中共确定了 5 个共有峰；二甲苯致
maxΔKi（j） ′），式中，分辨系数ρ取值为0.5 [11，13] ，结果见表4。 小鼠耳廓肿胀实验结果显示，70％乙醇提取总部位、乙
表4 灰色关联系数计算结果 酸乙酯萃取部位、水提取部位的抗炎作用显著；进一步
Tab 4 Calculation results of grey relation coefficient 通过灰色关联度法分析后发现，5 个共有峰对藤茶抗炎
效果的贡献均较大（关联度均大于 0.6），其中抗炎效果
共有峰
样品 较强的是3号峰（未知成分）和2号峰（二氢杨梅素）。
1号峰 2号峰 3号峰 4号峰 5号峰
Ⅰ部位 0.677 0.815 0.716 0.752 0.610 综上所述，藤茶对二甲苯致小鼠耳肿胀的抗炎作用
Ⅱ部位 1.000 0.851 0.912 0.822 0.647 是多组分协同作用的结果；HPLC 指纹图谱中的 3 号峰
Ⅲ部位 0.586 1.000 0.915 0.782 1.000
Ⅳ部位 0.557 0.419 0.458 0.393 0.369 未知成分和二氢杨梅素是藤茶抗炎作用的主要活性成
Ⅴ部位 0.774 0.865 0.951 1.000 0.611 分。其中，3 号峰对应的未知成分尚需进一步进行结构
Ⅵ部位 0.373 0.987 1.000 0.899 0.459
分析。
2.4.4 关联度和关联序的计算 分别计算各参考序列 参考文献
与比较序列之间的灰色关联系数的均值，即关联度，并 [ 1 ] 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴：补编第
对其进行排序，组成关联序，结果见表5。由表5可见，5 二册[M].北京：科学出版社，1983：349.
个共有峰峰面积与小鼠耳肿胀抑制率的关联度均大于 [ 2 ] 王婉莹.藤茶传统药物学及抗氧化活性的初步研究[D].
[9]
0.6，说明藤茶抗炎作用是多组分协同作用的结果 。根 北京：北京协和医学院药用植物研究所，2014.

中国药房 2020年第31卷第19期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 19 ·2385 ·