Page 55 - 202018
P. 55
chinensis. The components of S. sphenanthera and S. chinensis were different,schisanolrin A is differential marker.
KEYWORDS Schisandra sphenanthera; Schisandra chinensis; HPLC; Fingerprint; HCA; PCA; OPLS-DA; Differential
markers
五味子为木兰科植物五味子[Schisandra chinesis 分析(HCA)、无监督模式主成分分析(PCA)、有监督模
(Turcz.)Baill.]的干燥成熟果实,习称“北五味子”;南五 式正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)筛选影响
味子为木兰科植物华中五味子(S. sphenanthera Rehd. et 南、北五味子药材质量的差异标志物,以期为其质量控
Wils.)的干燥成熟果实。两者在 2015 年版《中国药典》 制及药效研究提供参考。
(一部)中均有记载,其质量标准虽有不同,但性味、归 1 材料
[1]
经、功能主治的表述却完全相同 。历代本草典籍中,有 1.1 仪器
关两种五味子的产地、名称、功效等记载不一,如《本草 LC 20AD 型 HPLC 仪(包括二元泵、可制冷自动进
图经》中记载,“五味子,生齐山山谷及代郡,今河东、陕 样器、二极管阵列检测器、柱温箱、Labsulotions Version
[2]
西州郡尤多,而杭越间亦有”。根据其产地查阅《中药 5.87 色谱工作站)、AUW-120D 型十万分之一电子天平
材产销》 可推断,此处“齐山山谷及代郡”为北五味子产 均购自日本 Shimadzu 公司;1260 型 HPLC 仪(包括四元
[3]
区,“河东、陕西州郡、杭越”为南五味子产区,由此可见 泵、紫外检测器、柱温箱、自动进样器、Open LABA.01.05
两种五味子在产区分布上存在差异。《本草蒙筌》中记 色谱工作站)购自美国 Agilent 公司;DHG-9070 型电热
载,“南北各有所长,藏留切勿相混,风寒咳嗽南五味为 鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司);SB25-12D
[4]
奇,虚损劳伤北五味最妙”;《本草纲目》中记载,“五味, 型超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司);
今有南北之分,南产者,色红;北产者,色黑,入滋补药必 5810R 型高速离心机(德国 Eppendorf 公司);Milli-Q 超
用北产者乃良”。由此可知,南、北五味子在功效、名 纯水机(美国Millipore公司);FW-80型微型高速万能试
[5]
称、性状等方面的记载也不尽相同,其中北五味子质量 样粉碎机(天津市静海县工兴电器厂)。
较优。 1.2 药品与试剂
随着现代研究的深入,南、北五味子药材间的鉴别 五味子醇甲对照品(批号:MUST-19031905,纯度:
技术不断优化,除常见的性状、显微、薄层色谱鉴别等 99.46%)、五味子醇乙对照品(批号:MUST-19042307,纯
外 [6-8] ,还有 DNA 条形码技术等鉴定手段 。由于南、北 度 :99.88%)、五 味 子 酯 甲 对 照 品(批 号 :MUST-
[9]
五味子药材产地较多,在现代临床应用中普遍存在混用 19062302,纯度:99.38%)、五味子甲素对照品(批号:
[10]
的现象 ;加之学者对两者的认知存在一些偏差,故常 MUST-19092908,纯度:99.35%)均购自成都曼斯特生物
将南五味子视为五味子的伪品 。因此,如何正确区分 科技有限公司;五味子乙素对照品(中国食品药品检定
[11]
南、北五味子,并对其进行准确鉴别并发掘不同功效的 研究院,批号:110765-201512,纯度:99.00%);乙腈为色
物质基础对确保临床疗效具有重要的意义。 谱纯,甲醇为分析纯,水为超纯水。
南、北五味子的化学成分有所不同,李昕等 采用 南、北五味子药材各 10 批(编号分别为 N1~N10、
[12]
气质联用法(GC-MS)对南、北五味子挥发油化学成分进 S1~ S10),分别购自全国部分连锁药店、医药公司及药
行鉴定,结果发现北五味子中的依兰烯含量高于南五味 材市场,经郑州大学药学院贾陆教授鉴定为木兰科植物
[13]
子;李晓亮等 建立了南、北五味子醇提物的高效液相 五味子[S. chinensis(Turcz.)Baill.]的干燥成熟果实、木
色谱(HPLC)指纹图谱,并发现南五味子中五味子酯甲、 兰科植物华中五味子(S. sphenanthera Rehd. et Wils.)的
五味子甲素的含量相对较高,而北五味子中五味子醇甲 干燥成熟果实。药材样品信息来源见表1。
的含量相对较高,但未深入挖掘两种五味子指纹图谱中 2 方法与结果
涵盖的化学信息,也未筛选出导致南、北五味子差异的 2.1 南、北五味子HPLC指纹图谱的建立
标志性成分。 2.1.1 色谱条件 色谱柱:Aglient Zobax SB C18 (250
中药化学成分的复杂性和多样性是其发挥疗效的 mm×4.6 mm,5 µm);流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱
基础,亦是评价药材质量的难点和重点 。指纹图谱可 (0~5 min,51%A;5~20 min,51%A→60%A;20~35
[14]
完整、系统地表征药材样品中主要化学成分的相似性特 min,60%A;35~40 min,60%A→85%A;40~45 min,
[15]
征 ;化学模式识别可鉴别药材样品间的差异,以综合 85%A;45~48 min,85%A→51%A);流速:0.8 mL/min;
评估中药质量 [16-17] 。基于此,本研究分别建立了南、北五 检测波长:220 nm;柱温:30 ℃;进样量:5 µL。
味子药材的 HPLC 指纹图谱,并结合相似度评价、聚类 2.1.2 供试品溶液的制备 称取南、北五味子药材,粉
中国药房 2020年第31卷第18期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 18 ·2225 ·