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范围内，各个因素对女贞子总三萜纯化结果的影响顺序
60 综合评分
为复溶乙醇用量＞析晶乙醇体积分数＞活性炭用量。 50 6.00
40
表7 Box-Behnken响应面试验设计和结果 综合评分 30 5.00
Tab 7 Design and results of Box-Behnken response 20 活性炭用量 4.00
surface test 6.00 1.30 3.00
4.00 0.90 2.00
试验序号 活性炭用量 2.00 0.50 乙醇用量 0.50 0.70 0.90 1.10 1.30 1.50
乙醇用量
标化值 随机值 A B C 综合评分
16 1 1.00 4.00 80.00 53.12 A.因素A-B交互作用
8 2 1.50 4.00 90.00 40.36 综合评分
60 90.00
7 3 0.50 4.00 90.00 29.35 50
10 4 1.00 6.00 70.00 40.99 综合评分 40 85.00
6 5 1.50 4.00 70.00 46.91 30 乙醇体积分数 80.00
20
13 6 1.00 4.00 80.00 54.17 75.00
3 7 0.50 6.00 80.00 30.34 90.00 1.30
80.00 0.90 70.00
5 8 0.50 4.00 70.00 25.97
70.00 0.50 乙醇用量 0.50 0.70 0.90 1.10 1.30 1.50
1 9 0.50 2.00 80.00 30.92 乙醇用量
乙醇体积分数
9 10 1.00 2.00 70.00 45.50 B.因素A-C交互作用
4 11 1.50 6.00 80.00 49.67 综合评分
60
15 12 1.00 4.00 80.00 54.75 50 90.00
11 13 1.00 2.00 90.00 39.81 综合评分 40 85.00
12 14 1.00 6.00 90.00 40.58 30 乙醇体积分数 80.00
17 15 1.00 4.00 80.00 52.25 20 75.00
14 16 1.00 4.00 80.00 51.86 90.00 6.00
80.00
2 17 1.50 2.00 80.00 47.04 乙醇体积分数 4.00 70.00
70.00 2.00 活性炭用量 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00
表 8 Box-Behnken 响应面试验回归模型的方差分析 活性炭用量
C.因素B-C交互作用
结果
图3 各因素交互作用对女贞子总三萜纯化工艺影响的
Tab 8 Variance analysis of regression model for
响应面及等高线图
Box-Behnken response surface test
Fig 3 Response surface and contour maps of the
变异来源 平方和 自由度 均方 F P
模型 1 408.01 9 156.45 85.30 ＜0.000 1 effect of interaction of various factors on the
A 567.85 1 567.85 309.61 ＜0.000 1 purification technology of total triterpenoids
B 0.36 1 0.36 0.19 0.672 4 from L. lucidum
C 10.74 1 10.74 5.86 0.046 1
AB 2.58 1 2.58 1.40 0.274 6 6 女贞子总三萜最佳纯化工艺验证
AC 24.65 1 24.65 13.44 0.008 0 根据上述优化工艺参数，精密量取“2.2”项下女贞子
BC 6.97 1 6.97 3.80 0.092 2 药材提取浓缩液3份，每份500 mL，加4倍量水，加热至
A 2 413.09 1 413.09 225.24 ＜0.000 1
B 2 61.84 1 61.84 33.72 0.000 7 沸腾后，在0 ℃下静置2 h，离心，取下层沉淀，冷冻干燥；
C 2 248.19 1 248.19 135.32 ＜0.000 1 干燥沉淀物中加入1.0倍量乙醇复溶，加热回流0.5 h后，
残差 12.84 7 1.83 离心，取上清液，以乙醇定容至500 mL；加入4％的活性
失拟项 6.79 3 2.26 1.50 0.343 1
纯误差 6.04 4 1.51 炭除杂，振摇 10 min，抽滤，滤液加乙醇定容至 500 mL；
综合 1 430.85 16 加水调节乙醇体积分数为80％，4 ℃下冷藏静置12 h析
根据上述拟合的二项式方程，采用 Design-Expert 晶；离心，取沉淀，冷冻干燥。取干燥产物，分别按“2.3”
8.0.6软件分别绘制三维效应图，考察各自变量对女贞子 “3”项下方法制备供试品溶液、测定齐墩果酸和熊果酸
总三萜纯化工艺的影响，结果见图3。由图3可知，因素 含量并计算其转移率和纯度，结果见表9。结果显示，齐
A、C的交互作用对女贞子总三萜纯化工艺的影响较大， 墩果酸的平均转移率和纯度分别为 61.11％、53.44％，
其次是因素B、C的交互作用，而因素A、B的交互作用影 RSD分别为1.33％、1.34％（n＝3）；熊果酸的平均转移率
响最不显著。 和纯度分别为 65.78％、19.79％，RSD 分别为 2.44％、
运用 Design-Expert 8.0.6 软件优化所得女贞子总三 2.43％（n＝3）；综合评分均大于66，RSD为0.73％（n＝3）。
萜纯化的最佳工艺参数为：1.22倍的乙醇用量、3.98％的 7 讨论
活性炭、78.53％的乙醇体积分数；按此最佳纯化工艺制 女贞子具有一定的抗氧化、延缓衰老的作用，研究
得的女贞子总三萜产物的综合评分为55.18。为后续方 证明其三萜类成分能够增强人体对氧自由基的抵抗力，
便工业大生产操作，将各参数分别取整，以乙醇用量1.0 具有清除1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的能
[14]
倍、活性炭4％、乙醇体积分数80％进行工艺验证。 力 。女性在绝经后易患骨质疏松，而现有研究已明确

·2200 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 18 中国药房 2020年第31卷第18期