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少、大小及其分布部位,测量各个溃疡面的长径,长径≤                           出现少量出血点,有较少溃疡面,无糜烂现象;艳山姜中
        1 mm者计为1分;>1~2 mm者计为2分;>2~3 mm者                     剂量组小鼠胃内壁出现较多出血点,有溃疡面和轻微糜
        计为 3 分;>3~4 mm 者计为 4 分;>4 mm 者计为 5 分,               烂现象;艳山姜低剂量组小鼠胃内壁出现大量出血点,
        各溃疡面计分之和即为溃疡指数 。                                    局部溃疡面面积较大,糜烂现象明显。与模型组比较,
                                    [13]
        2.2.4  血清和胃组织中相关指标检测                取各组小鼠血          阳性组和艳山姜高、中剂量组小鼠溃疡指数均显著降低
        清,按相应 ELISA 试剂盒说明书操作检测 GAS 水平。                     (P<0.05或P<0.01),详见表1。
        另称取各组小鼠胃溃疡组织约100 mg,剪碎,按5 mL/g的                     表 1  各组小鼠胃溃疡指数和血清中 GAS 水平测定结
        量加入预冷的生理盐水,冰浴中进行组织匀浆,在4 ℃下                               果(x±±s,n=8)
        以4 000 r/min离心10 min,取上清液,按相应ELISA试剂                Tab 1 Determination results of index of gastric ulcer
        盒说明书操作检测胃组织中MDA、SOD、NO的水平。                                 and serum level of GAS in mice of each group
        2.2.5  胃组织病理学检查          取各组小鼠约 6 mm×6 mm                 (x±±s,n=8)
        大小的溃疡面部位组织,浸泡于 10%甲醛溶液中固定                           组别                溃疡指数,分              GAS,ng/mL
        24 h以上,再进行苏木精-伊红(HE)染色,采用倒置显微                       空白组                                  25.61±1.18
                                                            模型组               20.88±7.45         30.06±1.22 **
                            [14]
        镜进行病理组织学检查 。
                                                            阳性组               12.11±2.78 ##      23.44±0.53 ##
        2.3  艳山姜提取物对阿司匹林诱导急性胃溃疡模型小                          艳山姜高剂量组           13.38±6.48 #       24.27±1.31 ##
        鼠的影响考察                                              艳山姜中剂量组           14.13±3.95 #       27.48±1.06 #
        2.3.1  分组、给药与造模         参考文献方法 ,取小鼠 48              艳山姜低剂量组           15.63±5.58         28.22±1.58
                                             [13]
                                                                                                     ##
                                                                            **
                                                                                              #
        只,按“2.2”项下方法分组、给药,每天给药 1 次,连续给                         注:与空白组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.05,P<0.01
                                                                              **
                                                               Note:vs. blank group, P<0.01;vs. model group,P<0.05,P<
                                                                                                  #
                                                                                                        ##
        药 15 d。从第 10 天起,除空白组外,其余组小鼠均灌胃
                                                            0.01
        阿司匹林溶液(20 mg/kg),连续灌胃 6 d,以诱导胃溃
                                                            3.1.2  血清和胃组织中相关指标            与空白组比较,模型
        疡。末次给药前禁食不禁水24 h,末次灌胃药物溶液或
                                                            组小鼠血清中GAS水平和胃组织中MDA、NO水平均显
        生理盐水0.5 h后,再末次灌胃阿司匹林溶液。                             著升高,胃组织中 SOD 水平显著降低(P<0.01)。与模
        2.3.2  取材   末次灌胃阿司匹林溶液后,各组小鼠继续
                                                            型组比较,阳性组和艳山姜高、中剂量组小鼠血清中
        禁食不禁水 4 h,然后按“2.2.2”项下方法取血并制备血
                                                            GAS水平,胃组织中NO水平以及各给药组小鼠胃组织
        清,于-20 ℃保存,备测;脱颈椎处死小鼠后取全胃、剪
                                                            中 MDA 水平均显著降低,各给药组小鼠胃组织中 SOD
        开、洗净,备测。
                                                            水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),详见表1、表2。
        2.3.3  胃溃疡形成情况观察及胃溃疡指数测定                      按
       “2.2.3”项下方法观察各组小鼠胃黏膜面溃疡形成情况,                         表 2  各组小鼠胃组织中 MDA、NO、SOD 水平测定结
                                                                 果(x±±s,n=8)
        测定并计算胃溃疡指数。
                                                            Tab 2  Determination results of levels of MDA,NO
        2.3.4  血清和胃组织中相关指标检测                取各组小鼠血
        清,按相应 ELISA 试剂盒说明书操作检测 GAS、TNF-α                           and SOD in gastric tissue of mice in each
                                                                   group(x±±s,n=8)
        和 IL-1β水平。另称取各组小鼠胃溃疡组织约 100 mg,
                                                            组别          MDA,μmol/g    NO,μmol/g    SOD,μmol/g
        按“2.2.4”项下方法制备组织匀浆后,按相应ELISA试剂
                                                            空白组         0.45±0.06     1.84±0.12    26.47±1.69
        盒说明书操作检测胃组织中PGE2和COX-2水平。                           模型组         1.73±0.19 **  3.83±0.14 **  20.88±2.03 **
        2.3.5  胃组织病理学检查          按“2.2.5”项下方法取各组            阳性组         1.29±1.64 #   2.17±0.16 ##  25.38±0.70 ##
        小鼠胃溃疡面部位组织,固定后行HE染色,并进行组织                           艳山姜高剂量组     1.36±0.15 #   2.42±0.17 #  23.57±2.51 #
                                                            艳山姜中剂量组     1.42±0.17 #   2.68±0.18 #  23.34±1.96 #
        病理学检查。
                                                            艳山姜低剂量组     1.51±0.18 #   2.99±0.17    22.86±1.54 #
        2.4 统计学方法
                                                               注:与空白组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.05,P<0.01
                                                                            **
                                                                                              #
                                                                                                     ##
            采用SPSS 16.0软件对数据进行统计分析。数据均                         Note:vs. blank group, P<0.01;vs. model group,P<0.05,P<
                                                                                                        ##
                                                                              **
                                                                                                  #
        以x±s表示,两组间比较采用t检验。P<0.05表示差异                        0.01
        有统计学意义。                                             3.1.3  胃组织病理学变化         镜下观察可见,空白组小鼠
        3 结果                                                胃壁组织结构致密,黏膜结构完整。模型组小鼠胃黏膜
        3.1  艳山姜提取物对无水乙醇诱导急性胃溃疡模型小                          破损、不完整,可见慢性炎症细胞浸润、核固缩、腺体结
        鼠的影响                                                构消失,胃窦部胃黏膜可见多灶性凝固性坏死,并伴有
        3.1.1  胃溃疡形成情况及溃疡指数              肉眼可见,空白组           较严重的炎症、出血和水肿。阳性组小鼠胃黏膜充血和
        小鼠胃黏膜组织颜色正常,无溃疡面或出血点;模型组                            黏膜下水肿减轻,损伤较轻。艳山姜高、中剂量组小鼠
        小鼠胃内壁出现大量出血点,形成了连片的出血面,有                            胃黏膜结构的破坏和腺体结构的消失等现象均有不同
        严重糜烂和溃疡现象;阳性组小鼠胃内壁有极少量出血                            程度改善,但核固缩以及炎症细胞浸润现象改善不明
        点,无溃疡面或糜烂现象;艳山姜高剂量组小鼠胃内壁                            显。艳山姜低剂量组小鼠胃黏膜结构破坏较严重,可见
        ·2192  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 18                                中国药房    2020年第31卷第18期
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