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少、大小及其分布部位,测量各个溃疡面的长径,长径≤ 出现少量出血点,有较少溃疡面,无糜烂现象;艳山姜中
1 mm者计为1分;>1~2 mm者计为2分;>2~3 mm者 剂量组小鼠胃内壁出现较多出血点,有溃疡面和轻微糜
计为 3 分;>3~4 mm 者计为 4 分;>4 mm 者计为 5 分, 烂现象;艳山姜低剂量组小鼠胃内壁出现大量出血点,
各溃疡面计分之和即为溃疡指数 。 局部溃疡面面积较大,糜烂现象明显。与模型组比较,
[13]
2.2.4 血清和胃组织中相关指标检测 取各组小鼠血 阳性组和艳山姜高、中剂量组小鼠溃疡指数均显著降低
清,按相应 ELISA 试剂盒说明书操作检测 GAS 水平。 (P<0.05或P<0.01),详见表1。
另称取各组小鼠胃溃疡组织约100 mg,剪碎,按5 mL/g的 表 1 各组小鼠胃溃疡指数和血清中 GAS 水平测定结
量加入预冷的生理盐水,冰浴中进行组织匀浆,在4 ℃下 果(x±±s,n=8)
以4 000 r/min离心10 min,取上清液,按相应ELISA试剂 Tab 1 Determination results of index of gastric ulcer
盒说明书操作检测胃组织中MDA、SOD、NO的水平。 and serum level of GAS in mice of each group
2.2.5 胃组织病理学检查 取各组小鼠约 6 mm×6 mm (x±±s,n=8)
大小的溃疡面部位组织,浸泡于 10%甲醛溶液中固定 组别 溃疡指数,分 GAS,ng/mL
24 h以上,再进行苏木精-伊红(HE)染色,采用倒置显微 空白组 25.61±1.18
模型组 20.88±7.45 30.06±1.22 **
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镜进行病理组织学检查 。
阳性组 12.11±2.78 ## 23.44±0.53 ##
2.3 艳山姜提取物对阿司匹林诱导急性胃溃疡模型小 艳山姜高剂量组 13.38±6.48 # 24.27±1.31 ##
鼠的影响考察 艳山姜中剂量组 14.13±3.95 # 27.48±1.06 #
2.3.1 分组、给药与造模 参考文献方法 ,取小鼠 48 艳山姜低剂量组 15.63±5.58 28.22±1.58
[13]
##
**
#
只,按“2.2”项下方法分组、给药,每天给药 1 次,连续给 注:与空白组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.05,P<0.01
**
Note:vs. blank group, P<0.01;vs. model group,P<0.05,P<
#
##
药 15 d。从第 10 天起,除空白组外,其余组小鼠均灌胃
0.01
阿司匹林溶液(20 mg/kg),连续灌胃 6 d,以诱导胃溃
3.1.2 血清和胃组织中相关指标 与空白组比较,模型
疡。末次给药前禁食不禁水24 h,末次灌胃药物溶液或
组小鼠血清中GAS水平和胃组织中MDA、NO水平均显
生理盐水0.5 h后,再末次灌胃阿司匹林溶液。 著升高,胃组织中 SOD 水平显著降低(P<0.01)。与模
2.3.2 取材 末次灌胃阿司匹林溶液后,各组小鼠继续
型组比较,阳性组和艳山姜高、中剂量组小鼠血清中
禁食不禁水 4 h,然后按“2.2.2”项下方法取血并制备血
GAS水平,胃组织中NO水平以及各给药组小鼠胃组织
清,于-20 ℃保存,备测;脱颈椎处死小鼠后取全胃、剪
中 MDA 水平均显著降低,各给药组小鼠胃组织中 SOD
开、洗净,备测。
水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),详见表1、表2。
2.3.3 胃溃疡形成情况观察及胃溃疡指数测定 按
“2.2.3”项下方法观察各组小鼠胃黏膜面溃疡形成情况, 表 2 各组小鼠胃组织中 MDA、NO、SOD 水平测定结
果(x±±s,n=8)
测定并计算胃溃疡指数。
Tab 2 Determination results of levels of MDA,NO
2.3.4 血清和胃组织中相关指标检测 取各组小鼠血
清,按相应 ELISA 试剂盒说明书操作检测 GAS、TNF-α and SOD in gastric tissue of mice in each
group(x±±s,n=8)
和 IL-1β水平。另称取各组小鼠胃溃疡组织约 100 mg,
组别 MDA,μmol/g NO,μmol/g SOD,μmol/g
按“2.2.4”项下方法制备组织匀浆后,按相应ELISA试剂
空白组 0.45±0.06 1.84±0.12 26.47±1.69
盒说明书操作检测胃组织中PGE2和COX-2水平。 模型组 1.73±0.19 ** 3.83±0.14 ** 20.88±2.03 **
2.3.5 胃组织病理学检查 按“2.2.5”项下方法取各组 阳性组 1.29±1.64 # 2.17±0.16 ## 25.38±0.70 ##
小鼠胃溃疡面部位组织,固定后行HE染色,并进行组织 艳山姜高剂量组 1.36±0.15 # 2.42±0.17 # 23.57±2.51 #
艳山姜中剂量组 1.42±0.17 # 2.68±0.18 # 23.34±1.96 #
病理学检查。
艳山姜低剂量组 1.51±0.18 # 2.99±0.17 22.86±1.54 #
2.4 统计学方法
注:与空白组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.05,P<0.01
**
#
##
采用SPSS 16.0软件对数据进行统计分析。数据均 Note:vs. blank group, P<0.01;vs. model group,P<0.05,P<
##
**
#
以x±s表示,两组间比较采用t检验。P<0.05表示差异 0.01
有统计学意义。 3.1.3 胃组织病理学变化 镜下观察可见,空白组小鼠
3 结果 胃壁组织结构致密,黏膜结构完整。模型组小鼠胃黏膜
3.1 艳山姜提取物对无水乙醇诱导急性胃溃疡模型小 破损、不完整,可见慢性炎症细胞浸润、核固缩、腺体结
鼠的影响 构消失,胃窦部胃黏膜可见多灶性凝固性坏死,并伴有
3.1.1 胃溃疡形成情况及溃疡指数 肉眼可见,空白组 较严重的炎症、出血和水肿。阳性组小鼠胃黏膜充血和
小鼠胃黏膜组织颜色正常,无溃疡面或出血点;模型组 黏膜下水肿减轻,损伤较轻。艳山姜高、中剂量组小鼠
小鼠胃内壁出现大量出血点,形成了连片的出血面,有 胃黏膜结构的破坏和腺体结构的消失等现象均有不同
严重糜烂和溃疡现象;阳性组小鼠胃内壁有极少量出血 程度改善,但核固缩以及炎症细胞浸润现象改善不明
点,无溃疡面或糜烂现象;艳山姜高剂量组小鼠胃内壁 显。艳山姜低剂量组小鼠胃黏膜结构破坏较严重,可见
·2192 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 18 中国药房 2020年第31卷第18期