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2.1.4 精密度试验 取“2.1.2”项下供试品溶液适量，按 10 8.0
7.8
％ 8 ％ 7.6
“2.1.3”项下方法自“加入5％苯酚溶液1.0 mL”起进行操 6 7.4
作，重复测定其吸光度 6 次。结果，葡萄糖吸光度的 LP提取率， 4 2 LP提取率， 7.2
7.0
RSD为0.13％（n＝6），表明本方法的精密度良好。 0 6.8
6.6
1∶5 1∶10 1∶15 1∶20 1∶25 0.5 1 1.5 2 2.5
2.1.5 稳定性试验 取“2.1.2”项下供试品溶液适量，按 料液比，g/mL 提取时间，h
“2.1.3”项下方法自“加入5％苯酚溶液1.0 mL”起进行操 A.料液比 B.提取时间
20
作，并于室温放置 0、3、6、9、12、24 h 时测定其吸光度。 ％ 16
结果，葡萄糖吸光度的 RSD 为 0.87％（n＝7），表明供试 LP提取率， 12 8
品溶液显色后在室温下放置24 h内稳定。 4
0
2.1.6 重复性试验 取荔枝核药材适量，共 6 份，按 1 2 3 4 5
提取次数
“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.3”项下方法 C.提取次数
自“加入 5％苯酚溶液 1.0 mL”起进行操作，测定葡萄糖 图1 单因素试验结果
吸光度并按标准曲线法计算多糖含量（以葡萄糖计，下 Fig 1 Results of single factor tests
同）。结果，多糖含量的RSD为1.25％（n＝6），表明本方 2.3.2 响应面试验 采用响应面法对LP的水提工艺参
法的重复性良好。 数进行优化。根据“2.3.1”项下单因素试验结果，选取料
2.1.7 加样回收率试验 取“2.1.6”项下已知质量浓度 液比（A）、提取时间（B）、提取次数（C）为因素，以 LP 提
的供试品溶液适量，共6份，分别加入等质量的对照品溶 取率（Y）为响应值，采用 Design-Expert 8.0.6 软件设计 3
液，按“2.1.3”项下方法自“加入 5％苯酚溶液 1.0 mL”起 因素 3 水平响应面试验。因素与水平见表 1，试验方案
进行操作，测定吸光度并计算加样回收率。结果，各样 与结果见表2。
品的平均加样回收率为101.07％（RSD＝1.34％，n＝6）。 表1 因素与水平
2.2 LP提取率的计算 Tab 1 Factors and levels
取所制 LP 适量，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶 因素
水平
液，再按“2.1.3”项下方法自“加入 5％苯酚溶液 1.0 mL” A，g/mL B，h C，次
1 1∶10 0.5 2
起进行操作，测定吸光度，按标准曲线法计算多糖含量， 0 1∶15 1． 3
并计算多糖提取率：多糖提取率＝[（葡萄糖质量浓度× －1 1∶20 1.5 4
稀释倍数×待测样品溶液体积）/样品质量]×100％。 表2 试验方案与结果
2.3 LP水提工艺的筛选 Tab 2 Experimental design and results
2.3.1 单因素试验 取荔枝核药材，粉碎，精密称取粉 序号 A，g/mL B，h C，次 Y，％
1 1∶15 1 3 7.94
末5.0 g，置于烧杯中，采用水煎煮法以不同料液比[1 ∶ 5、
2 1∶10 0.5 3 5.45
1 ∶ 10、1 ∶ 15、1 ∶ 20、1 ∶ 25，g/mL（下同）]、提取时间（0.5、1、 3 1∶10 1.5 3 6.59
1.5、2、2.5 h）和提取次数（1、2、3、4、5次）提取，每次仅变 4 1∶15 1.5 2 6.99
5 1∶20 1 2 7.06
动 1 个因素，以 LP 提取率为指标，对各因素进行考察。 6 1∶15 1 3 8.10
（1）料液比：随提取液用量的增加，LP提取率逐渐升高； 7 1∶15 1 3 7.85
8 1∶20 1 4 7.10
当料液比达 1 ∶ 15 时，LP 提取率趋于稳定，详见图 1A。
9 1∶20 0.5 3 5.67
（2）提取时间：当煎煮时间为 0.5～2.5 h 时，LP 提取率呈 10 1∶15 1 3 7.66
波浪形变化，并于1.5 h时达到最高，详见图1B。当煎煮 11 1∶20 1.5 3 6.82
12 1∶15 0.5 2 5.57
时间超过1.5 h后，LP提取率反而下降，这可能是由于煎 13 1∶10 1 2 5.51
煮时间过长，多糖结构被部分破坏所致。故综合考虑， 14 1∶10 1 4 7.22
15 1∶15 1.5 4 7.12
本研究选择提取时间 0.5、1、1.5 h 进行后续研究。（3）提
16 1∶15 1 3 7.87
取次数：当提取次数≤3 次时，LP 提取率随着提取次数 17 1∶15 0.5 4 7.18
的增加而升高；但当继续增加提取次数时，LP提取率反 采用 Design-Expert 8.0.6 软件对表 2 试验数据进行
而略有下降，详见图 1C。故综合考虑 LP 提取率和提取 二元多次回归拟合，得二元多次回归方程 Y＝7.880+
效率，本研究选择提取次数2、3、4次进行后续研究。故 0.240A + 0.460B + 0.440C + 0.003AB － 0.420AC －
综合考虑，本研究选择料液比 1 ∶ 10、1 ∶ 15、1 ∶ 20 进行后 0.370BC－0.870A －0.880B －0.290C 。对其进行方差
2
2
2
续试验。 分析，结果见表3。
中国药房 2020年第31卷第16期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 16 ·1997 ·