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F-actin、β-tubulin和Ezrin蛋白表达水平均显著降低（P＜
0.01）。各组细胞中 F-actin、β-tubulin、Ezrin 蛋白表达的
电泳图见图5，蛋白表达水平测定结果见图6。
0 h
F-actin

β-tubulin

Ezrin

24 h
β-actin
阴性对照组 柠檬酚低浓度组 柠檬酚高浓度组
图 5 各组细胞中 F-actin、β-tubulin、Ezrin 蛋白表达的
阴性对照组 柠檬酚低浓度组 柠檬酚高浓度组
电泳图
图2 各组细胞划痕试验显微图（×10） Fig 5 Electrophoretogram of the protein expression
Fig 2 Micrograph of cell scratch test in each group（×10） of F-actin，β-tubulin and Ezrin in cells of each
100 group
90
80
％ 70 ＊＊ 1.2
细胞迁移率， 50 ＊＊ 1.0 ＊＊
60
40
0.8
30
20 ＊＊ ＊＊ 阴性对照组
10 相对表达水平 0.6 ＊＊ 柠檬酚低浓度组
0 ＊＊
阴性对照组 柠檬酚低浓度组 柠檬酚高浓度组 0.4 ＊＊ 柠檬酚高浓度组
注：与阴性对照组比较， P＜0.01 0.2
＊＊
Note：vs. negative control group， P＜0.01 0 F-actin β-tubulin Ezrin
＊＊
图3 各组细胞迁移率的测定结果
＊＊
注：与阴性对照组比较， P＜0.01
Fig 3 Cell migration rate in cells of each group Note：vs. negative control group， P＜0.01
＊＊
3.3 柠檬酚对HepG2细胞骨架相关蛋白mRNA表达水 图 6 各组细胞中 F-actin、β-tubulin、Ezrin 蛋白表达水
平的影响 平测定结果
与阴性对照组比较，柠檬酚低、高浓度组细胞中 Fig 6 Protein expression of F-actin，β-tubulin and
F-actin、β-tubulin和Ezrin的mRNA表达水平均显著降低 Ezrin in cells of each group
（P＜0.05或P＜0.01）。各组细胞中F-action、β-tubulin和 3.5 分子对接试验结果
Ezrin的mRNA表达水平见图4。 柠檬酚与 F-actin、β-tubulin、Ezrin 分子对接的 2D 平
1.2 面图见图7。由图7A可知，柠檬酚C-4′位羟基与氨基酸
1.0 GLU72 的 侧 链 形 成 氢 键 ；A 环 并 吡 喃 环 与 氨 基 酸
＊
＊＊ 阴性对照组 ARG206 形成π-π共价键，与氨基酸 MET190、TYR188、
0.8
相对表达水平 0.6 ＊＊ 柠檬酚低浓度组 TYR69、MET269、ASP179、LEU180 等形成疏水键。由
柠檬酚高浓度组
0.4
＊＊
＊＊ 图 7B 可知，柠檬酚 C-5 位羟基与氨基酸 ASP128 的侧链
＊＊
0.2 形成氢键；C-4 位的羰基氧与氨基酸 LEU130 的侧链形
0 成氢键，与 CYS127、LEU130、ALA124、PHE159 等形成
F-actin β-tubulin Ezrin
疏水键。由图 7C 可知，柠檬酚 C-4′位羟基与氨基酸
注：与阴性对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊＊
＊
＊＊
Note：vs. negative control group，P＜0.05， P＜0.01 ASP261的侧链形成氢键，与ALA264等形成疏水键；C-3
＊
图 4 各组细胞中 F-actin、β-tubulin、Ezrin mRNA 表达 位羟基与氨基酸Glu244的侧链形成氢键。
水平的测定结果 4 讨论
Fig 4 mRNA expression of F-actin，β-tubulin and Ez- 柠檬酚于 1987 年在柑橘属植物酸橘（Citrus nobilis
rin in cells of each group Lour Var. sunki Hort）中首次被发现 。尚明英等 在小
[10]
[9]
3.4 柠檬酚对 HepG2 细胞骨架相关蛋白表达水平的 檗科植物鬼臼（Podophyllum ecodi Wall.）的干燥成熟果
影响 实小叶莲中也有发现该化合物。Shen CC等 在豆科植
[11]
与阴性对照组比较，柠檬酚低、高浓度组细胞中 物排钱树[Phyllodium pulchellum（L.）Desv.]中也发现有
·1852 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 15 中国药房 2020年第31卷第15期