Page 40 - 202015

2.6 大鼠肠道菌群OTU与血脂、血糖的关联分析 TC、TG、LDL-C 水平均显著升高（P＜0.05 或 P＜0.01），
应用 R 语言（https：//www.r-project.org/）执行 Two- 模型组、辛伐他汀组和葛根芩连汤低剂量组大鼠血清中
[15]
part 模型算法 ，得到大鼠 TG、TC、FBG 表型与肠道菌 HDL-C 水平均显著降低（P＜0.05）；各组大鼠血清中
群OTU之间的关联分析结果，以获得葛根芩连汤降脂和 FBG 水平差异均无统计学意义（P＞0.05）。给药 11 周
预防血糖升高的目标菌群。分析过程中根据Z分布计算 后，与空白对照组比较，模型组大鼠血清中TC、TG、FBG
关联 Z 得分：如果 Z 得分为负值，则呈负相关；如果 Z 得 水平均显著升高（P＜0.05或P＜0.01），HDL-C水平显著
分为正值，则呈正相关。由于关联P值的分布可能会出 降低（P＜0.01），LDL-C 水平差异无统计学意义（P＞
现偏差，为此执行表型 1 000 次重排测试来控制错误发 0.05）；与模型组比较，葛根芩连汤中剂量组大鼠血清中
现率（FDR，该值设置为0.05）。 TC 水平显著降低（P＜0.05），各给药组大鼠血清中 TG
2.7 统计学方法 水平均显著降低（P＜0.05或P＜0.01），葛根芩连汤高剂
采用 GraphPad Prism 7.0 软件对实验数据进行统计 量组大鼠FBG水平显著降低（P＜0.05）。给药前后各组
分析。试验结果以 x±s 表示，数据经正态性检验后，符 大鼠血清中血脂、血糖水平测定结果见表2。
合正态性检验的数据，组间比较采用单因素方差分析和 表 2 给药前后各组大鼠血清中血脂、血糖水平测定结
t 检验；不符合正态分布的数据则采用 Kolmogorov- 果（x±±s，n＝6，mmol/L）
Smirnov检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。 Tab 2 Serum levels of blood lipid and blood glucose
3 结果 of rats in each group before and after admini-
3.1 大鼠体质量、体长和Lee’s指数测定结果 stration（x±±s，n＝6，mmol/L）
给药前（造模5周后），与空白对照组比较，其余各组 时段 组别 TC TG HDL-C LDL-C FBG
大鼠的体质量、体长和 Lee’s 指数均显著增加或升高 给药前 空白对照组 1.45±0.14 1.16±0.16 0.63±0.06 0.29±0.10 5.25±0.97
模型组 1.92±0.44 ＊＊ 2.01±1.23 0.50±0.03 ＊ 0.51±0.16 ＊＊ 5.87±1.61
＊＊
（P＜0.01），并 且 体 质 量 超 过 了 正 常 大 鼠 体 质 量 的 辛伐他汀组 1.95±0.37 ＊＊ 1.44±0.44 0.53±0.10 ＊ 0.76±0.38 ＊＊ 5.95±1.59
＊＊
53％。给药 11 周后，与空白对照组比较，模型组大鼠体 葛根芩连汤高剂量组 1.99±0.15 ＊＊ 1.22±0.57 0.57±0.07 0.86±0.23 ＊＊ 5.42±1.02
＊
＊
质量、体长和 Lee’s 指数依然显著增加或升高（P＜ 葛根芩连汤中剂量组 1.96±0.45 ＊＊ 1.28±0.28 0.56±0.14 0.82±0.36 ＊＊ 5.32±1.12
＊＊
葛根芩连汤低剂量组 1.81±0.28 ＊＊ 1.35±0.61 0.52±0.10 ＊ 0.68±0.23 ＊＊ 5.90±1.33
0.01）；与模型组比较，葛根芩连汤高剂量组大鼠体质量 给药11周后 空白对照组 1.73±0.11 0.58±0.05 0.69±0.06 0.78±0.06 4.32±0.58
和 Lee’s 指数均显著降低（P＜0.05），并且葛根芩连汤 模型组 2.14±0.09 ＊＊ 1.49±0.17 0.52±0.04 ＊＊ 0.94±0.11 5.03±0.54 ＊
＊＊
#
辛伐他汀组 2.00±0.30 1.21±0.24 0.48±0.08 0.97±0.24 4.43±1.35
中、低剂量组大鼠体质量也有降低的趋势。给药前后各
葛根芩连汤高剂量组 1.88±0.16 0.99±0.16 0.54±0.08 0.90±0.12 4.32±0.42 #
##
组大鼠的体质量、体长和Lee’s指数测定结果见表1。 葛根芩连汤中剂量组 1.78±0.35 # 1.00±0.18 0.51±0.11 0.82±0.31 4.42±0.51
##
##
表 1 给药前后各组大鼠的体质量、体长和 Lee’s 指数 葛根芩连汤低剂量组 1.88±0.15 0.88±0.15 0.49±0.03 0.99±0.11 5.20±0.92
#
＊
＊＊
测定结果（x±±s，n＝6） 注：与空白对照组比较，P＜0.05， P＜0.01，与模型组比较，P＜
##
0.05，P＜0.01
Tab 1 Results of body mass，body length and Lee’s in-
＊
Note：vs. blank control group， P＜0.05， ＊ ＊ P＜0.01；vs. model
dex of rats in each group before and after ad-
group，P＜0.05，P＜0.01
#
##
ministration（x±±s，n＝6）
3.3 大鼠盲肠内容物DNA 16S rRNA测序及质控结果
时段 组别 体质量，g 体长，cm Lee’s指数，g/cm 36 个样品经测序、质控后共计得到 1 930 744 条有
给药前 空白对照组 218.00±16.17 20.60±0.33 291.98±3.76
模型组 336.17±26.02 ＊＊ 22.78±0.39 ＊＊ 305.00±3.62 ＊＊ 效序列，平均序列长度434 bp。在97％的相似度水平下
辛伐他汀组 330.17±24.38 ＊＊ 22.63±0.23 ＊＊ 305.20±6.46 ＊＊ 对序列进行聚类，共获得991个OTU。稀释性曲线和香
葛根芩连汤高剂量组 323.83±10.72 ＊＊ 22.67±0.45 ＊＊ 303.00±3.80 ＊＊ 农指数曲线（用于验证测序数据量是否足以反映样品中
葛根芩连汤中剂量组 351.83±32.93 ＊＊ 23.02±0.49 ＊＊ 306.45±5.36 ＊＊
葛根芩连汤低剂量组 328.50±25.38 ＊＊ 22.63±0.43 ＊＊ 304.67±2.42 ＊＊ 的微生物多样性）结果显示，随着测序量增加，曲线趋向
给药11周后 空白对照组 275.50±27.46 22.10±0.31 294.11±7.65 平坦，各组样本菌种并不会随测序数量的增加而显著增
模型组 544.17±48.42 ＊＊ 25.73±0.40 ＊＊ 316.99±4.85 ＊＊
辛伐他汀组 513.00±58.18 25.42±0.42 314.50±7.29 多，这表明本研究所有样品测序数据量足够，测序条数
葛根芩连汤高剂量组 477.67±48.10 # 25.42±0.50 307.20±5.89 # 覆盖样品中的大部分微生物，可用于后续数据分析。稀
葛根芩连汤中剂量组 504.17±54.84 25.48±0.43 311.90±6.41 释性曲线和香农指数曲线见图1。
葛根芩连汤低剂量组 501.50±49.21 25.43±0.51 312.05±4.83
3.4 肠道菌群OTU与血糖、血脂的关联分析结果
注：与空白对照组比较， P＜0.01，与模型组比较，P＜0.05
＊＊
#
Note：vs. blank control group， P＜0.01；vs. model group，P＜ 3.4.1 肠道菌群 OUT 与 TC 的关联分析结果 共鉴定
#
＊ ＊
0.05 出 23 个与 TC 显著相关的 OTU（14 个与 TC 呈正相关，9
3.2 大鼠血脂、血糖水平测定结果 个与 TC 呈负相关）。其中，有 20 个来自厚壁菌门（Fir-
给药前，与空白对照组比较，其余各组大鼠血清中 micutes）：10个注释到瘤胃菌科（Ruminococcaceae），4个
·1826 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 15 中国药房 2020年第31卷第15期