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3.3.3 高脂饮食与GPs对Mups基因表达影响的差异分 3.4 RT-qPCR验证结果
析结果 以 HFD 组与 ND 组表达量差异倍数的对数值 采用RT-qPCR法对RNA-seq数据进行验证，结果见
（log2FC）为横坐标、GP 组与 HFD 组的 log2FC 为纵坐标 表 4。由表 4 可见，与 ND 组比较，HFD 组小鼠肝组织中
绘制散点图，对 21 个 Mups 基因进行分析，详见图 4[图 Mup4、Mup5、Mup21基因mRNA的相对表达量均显著升
中，▲表示在ND组与HFD组、HFD组与GP组中表达变 高（P＜0.05），与前文结果基本一致。
化趋势相反且差异显著的 mRNA（P＜0.05），■表示仅 表4 RT-qPCR法验证结果（x±±s，n＝4）
在 ND 组与 HFD 组表达显著变化的 mRNA（P＜0.05）， Tab 4 Verification results of RT-qPCR assay（x ±± s，
◆表示仅在 HFD 组与 GP 组表达显著变化的 mRNA n＝4）
（P＜0.05），●表示变化无统计学意义的 mRNA（P＞ 组别 Mup4 Mup5 Mup21
0.05）]。由图4可见，Mups基因主要分布于第4象限内， ND组 7.33±0.88 0.03±0.00 12.42±0.62
HFD组 22.49±2.92 ＊ 0.09±0.01 ＊ 16.18±1.26 ＊
提示高脂饮食可上调 Mups 基因 mRNA 的表达；经 GPs
注：与ND组比较，P＜0.05
＊
干预后，Mups基因mRNA的表达被显著回调。同时，该 Note：vs. ND group，P＜0.05
＊
散点图显示，在ND组与HFD组、HFD组与GP组中表达 3.5 差异基因与药效学指标相关性分析结果
发 生 显 著 改 变 且 趋 势 相 反 的 基 因 为 Mup4、Mup5、 相关性分析结果显示，小鼠 Mup5 基因 mRNA 表达
Mup21，即高脂饮食可显著上调 Mup4、Mup5、Mup21 基 量与血清 TC、BG 水平（r 分别为 0.727 1、0.670 6）以及
因mRNA的表达，而GPs可显著回调上述基因mRNA的 Mup4、Mup21基因mRNA表达量与血清BG水平（r分别
表达。此外，以 mRNA 表达量（即经 FPKM 进行标准化 为0.737 8、0.721 5）均成正相关（P＜0.05），详见图5。
的Reads值）为指标的分析也得出了相同的结果：与对照 4 讨论
组比较，HFD 组小鼠肝组织中 Mup4、Mup5、Mup21 基因 脂质代谢紊乱是高胆固醇血症的主要病理因素，也
mRNA 的表达被显著上调（P＜0.05）；给予 GPs 干预后， 是引起机体糖脂代谢紊乱的关键因素之一。本课题组
Mup4、Mup5、Mup21 基因 mRNA 的表达均被显著下调 前期研究发现，GPs可显著降低高胆固醇血症模型小鼠
（P＜0.05），详见表3。 血清 TC、LDL-C、BG 水平，具有降低血脂和血糖的作
3 用 [17-18] 。Mups是脂质运载蛋白家族成员，在啮齿动物肝
脏中表达并通过尿液排泄到体外，可通过结合的方式运
2 输脂肪酸、视黄醇、类固醇等脂质，从而参与调节机体糖
（ GP组 vs. HFD组 ） －5 －3 －1 1 0 1 3 5 脂代谢 [4-5，20] 。研究表明，脂质运载蛋白家族成员Lcn2在

妊娠期糖尿病患者体内的表达增加，可导致其血脂代谢
[21]
log2FC －1 Mups5 紊乱 。因此，笔者推测调控脂质运载家族Mups基因的
表达可能与血脂水平调节有关。已有研究表明，GPs可
Mups4
Mups21
－2
调节脂质代谢，具有良好的降血糖、降血脂、保肝和抗炎
等药理作用 [22-24] 。本研究在前期药效学研究的基础上，
－3
log2FC（HFD组 vs. ND组）
借助 RNA-Seq 测序技术初步探讨了 GPs 对小鼠肝组织
图 4 高脂饮食与 GPs 对 Mups 基因表达影响的散点图
中 Mups 基因表达的影响，旨在挖掘 GPs 通过调控 Mups
（n＝5）
基因表达从而降低血脂的可能机制。
Fig 4 Scatter plot of the effects of high-lipid diet and
本研究从整体层面分析发现，GPs 对高胆固醇血症
GPs on Mups genes expression（n＝5）
模型小鼠肝组织中Mups基因mRNA的表达具有显著的
表 3 高脂饮食与 GPs 对 Mups4、Mups5、Mups21 基因 回调作用，表明 GPs 改善高胆固醇血症的作用可能与
mRNA表达的调控作用（x±±s，n＝5） Mups基因有关。有研究报道指出，胰岛素与Mups基因
Tab 3 Regulative effects of high-lipid diet and GPs on 有密切的联系，在 1 型糖尿病模型大鼠肝组织中，Mups
Mups4，Mups5，Mups21 gene expression（x±±s， 基因的表达水平显著降低；给予胰岛素后，肝组织中
n＝5） Mups 基因的表达水平显著升高，且有随胰岛素水平升
组别 Mup4 Mup5 Mup21 高而上升的趋势 [25-26] 。由此可见，长期高脂饮食导致的
ND组 2.77±1.20 3.99±1.49 290.69±67.00 高血糖和胰岛素抵抗可使机体代偿性分泌过量的胰岛
HFD组 5.07±1.49 ＊ 7.97±1.57 ＊ 368.55±27.32 ＊
[27]
GP组 2.98±1.15 # 4.67±2.22 # 142.29±33.41 # 素，从而引起Mups基因表达水平升高 。本研究结果发
＊
#
注：与ND组比较，P＜0.05；与HFD组比较，P＜0.05 现，高脂饮食诱导可导致小鼠 BW 和血清 BG、TC、
＊
Note：vs. ND group，P＜0.05；vs. HFD group，P＜0.05 LDL-C 水 平 以 及 肝 组 织 中 Mup4、Mup5、Mup21 基 因
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中国药房 2020年第31卷第15期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 15 ·1813 ·