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热点之一。
         CD206
                                                               黄连素是从黄连等药用植物中提取的活性生物碱
          iNOS                                             类成分，可通过抑制血小板聚集、调节一氧化氮和一氧
                                                           化氮合酶、减少活性氧、抑制炎症因子的生成等途径来
        MyD88
                                                                   [23]
                                                           保护血管 。AS的病理过程较为复杂，而近年来有关黄
         TLR4                                              连素抗 AS 的研究亦是从多机制、多靶点进行阐述：
                                                                    [24]
                                                           Wang Q等 认为，黄连素可通过激活腺苷一磷酸活化蛋
        GAPDH
                                                           白激酶（AMPK）而加速低密度脂蛋白（LDL）受体的表
              空白对    LPS诱 黄连素低 黄连素中 黄连素高 阿托伐他
                                                                                                   [25]
               照组    导组    剂量组  剂量组    剂量组   汀钙组           达，从而降低AS模型小鼠的脂质代谢；侯宏等 研究发
        图1 黄连素对RAW264.7细胞中TLR4、MyD88、iNOS、                 现，黄连素可降低机体血脂水平以减轻 AS 斑块病变程
             CD206蛋白表达影响的电泳图                               度；陈略等 研究发现，黄连素可通过促进平滑肌细胞
                                                                     [26]
        Fig 1 Electrophoretogram of the effects of berberine  在受损内膜中的增殖来延缓AS的进展；Zhu L等 研究
                                                                                                     [27]
              on protein expression of TLR4，MyD88，iNOS     发现，黄连素可通过调节肠道菌群、增加益生菌来促进
              and CD206 in RAW264.7 cells                  代谢紊乱的恢复，从而改善模型小鼠的 AS 症状。但目

        表4 黄连素对RAW264.7细胞中TLR4、MyD88、iNOS、                 前少有研究从巨噬细胞极化这一方面进行探讨。为此，
             CD206蛋白表达的影响（x±±s，n＝6）                        本研究以小鼠巨噬细胞 RAW264.7 为对象，初步探讨了
        Tab 4 Effects of berberine on protein expression of  黄连素对巨噬细胞极化的影响。
               TLR4， MyD88， iNOS        and   CD206   in       阿托伐他汀钙具有调脂、稳斑的作用，已被广泛应
               RAW264.7 cells（x±±s，n＝6）                    用于 AS 及其相关疾病的临床治疗中，且亦有研究证实
                                                           该药具抗炎、抗血小板等生物活性 ，因此本研究选用
                                                                                          [28]
        组别          TLR4     MyD88       iNOS     CD206
        空白对照组      0.48±0.20  0.67±0.28  0.46±0.26  0.52±0.18  阿托伐他汀作为阳性对照药物。LPS是一种内毒素，其
        LPS诱导组     2.88±0.53 ＊  2.33±0.32 ＊  2.68±0.24 ＊  0.67±0.24  所致炎症模型是最常见的炎症模型。LPS 可与位于细
        阿托伐他汀钙组    1.23±0.44 #  1.01±0.42 #  0.89±0.13 #  1.67±0.58 #  胞表面的TLR4结合，活化的TLR4可通过MyD88依赖途
        黄连素低剂量组    2.69±0.37  2.04±0.08  1.87±0.21 #  0.88±0.56                                         [29]
        黄连素中剂量组    1.58±0.77 #  1.85±0.43 #  1.56±0.19 #  1.05±0.69  径，激活大量的 NF-κB，进而促进巨噬细胞极化调控 ；
        黄连素高剂量组    1.19±0.34 #  0.93±0.37 #  0.98±0.12 #  1.98±0.77 #Δ  同时，LPS 还可刺激巨噬细胞分泌炎症因子 TNF-α、
           注：与空白对照组比较，P＜0.05；与 LPS 诱导组比较，P＜0.05；           IL-6，上述炎症因子的基因调控区均包含 NF-κB 的结合
                                                 #
                            ＊
                         Δ
        与阿托伐他汀钙组比较，P＜0.05                                  位点 。NF-κB 为一种蛋白因子，可多向转录以调控机
                                                                [30]
                               ＊
           Note：vs. blank control group，P＜0.05；vs. LPS induction group，
                                                           体免疫功能，其介导的炎症反应可促进 AS 的发生与发
                                  Δ
        # P＜0.05；vs. atrovastatin calcium group，P＜0.05
                                                             [31]
                                                           展 。本研究结果显示，经 LPS 诱导后，细胞培养液中
        AS 是其主要病因之一 。关于 AS 的发病机制，目前已                       TNF-α、IL-6、NF-κB含量以及细胞中TRL4、MyD88蛋白
                           [13]
        有炎症学说、脂质浸润学说、内皮损伤-反应学说、平滑                          及其mRNA的相对表达量均较空白对照组显著升高；经
        肌细胞克隆学说等多种学说             [1，14-15] 。其中，由 Ross R [1，15]  药物预处理后，阿托伐他汀钙组和黄连素中、高剂量组
        提出的炎症学说受到学者的普遍关注，现已成为学界共                           TNF-α、IL-6 含量，TRL4、MyD88 蛋白及其 mRNA 的相
          [16]
        识 。炎症反应可按致炎物质分为生物性炎症、免疫性                           对表达量以及各给药组NF-κB含量均显著降低，且高剂
        炎症和化学性炎症 。在各种炎症反应中，巨噬细胞在                           量组 NF-κB 含量显著低于阿托伐他汀钙组。这提示黄
                        [16]
        细胞因子的刺激下释放炎症因子，后者参与炎症级联反                           连素可降低炎症模型细胞的炎症因子含量，且高剂量黄
        应，与 AS 早期形成密切相关          [3，17] 。有研究指出，巨噬细         连素对NF-κB的下调作用优于阳性对照药物；该作用可
        胞在不同诱因下可被活化，生成两种极化分型，即M1型                          能与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。
        和M2型。M1型巨噬细胞主要分泌TNF-α、IL-6等促炎                          在非活化状态下，NF-κB 通常以其 p50 亚基/p65 亚
        因子，促进 AS 的发生；M2 型巨噬细胞主要产生抗炎因                       基异二聚体的形式与NF-κB抑制蛋白结合后被激活，然
        子并促进血管新生，可减轻炎症反应、增加斑块的稳定                           后与抑制蛋白解离并进入细胞 。在激活 NF-κB 的同
                                                                                       [32]
        性 [4，18-19] 。此外有研究发现，AS斑块组织中同时存在M1                 时，NF-κB 通路可启动 iNOS 转录，释放一氧化氮，故
        和M2型巨噬细胞，且两种分型细胞的比例与CHD患者                          iNOS 可作为 M1 型巨噬细胞的标志物 ；CD206 在 M2
                                                                                             [33]
        病情的严重程度相关         [20-21] 。然而，M1 和 M2 型巨噬细胞        型巨噬细胞中呈高表达，是M2型巨噬细胞的标志因子，
        的比例并非一成不变，因巨噬细胞可塑性高，即便已经                           具有较高的特异性 ；二者的表达高低反映了巨噬细胞
                                                                            [34]
        极化，不同分型之间仍可相互转化 ，故可通过调节二                           主要的极化分型。本研究结果显示，经 LPS 诱导后，细
                                      [22]
        者的比例来改善 AS 患者的转归与预后。由此可见，寻                         胞中 iNOS 蛋白的相对表达量较空白对照组显著升高。
        找可调节巨噬细胞极化的药物已成为AS防治研究的新                           经药物预处理后，各给药组细胞中 iNOS 蛋白的相对表


        中国药房    2020年第31卷第15期                                             China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 15  ·1807  ·
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