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孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 S6）适量，按“2.1.3”项下色谱条件连续进样测定6次，以
表1 新疆紫草样品来源信息 乙酰紫草素为参照，记录各共有峰的相对保留时间和相
Tab 1 Source information of A. euchroma samples 对峰面积。结果，12个共有峰相对保留时间和相对峰面
编号 来源/产地 采集时间 编号 来源/产地 采集时间 积的RSD均小于3％（n＝6），表明方法精密度良好。
S1 新疆巴州和静县 2017年9月7日 S18 新疆伊犁州昭苏县 2018年9月17日 2.1.5 稳定性试验 取“2.1.1”项下供试品溶液（编号：
S2 新疆巴州和静县 2017年9月7日 S19 新疆伊犁州昭苏县 2018年10月30日 S6）适量，分别于室温下放置 0、4、8、12、16、24 h 时按
S3 新疆巴州和静县 2017年9月7日 S20 新疆乌鲁木齐市乌鲁木齐县 2019年1月11日
S4 新疆巴州和静县 2017年9月7日 S21 新疆乌鲁木齐市乌鲁木齐县 2019年4月3日 “2.1.3”项下色谱条件进样测定，以乙酰紫草素为参照，
S5 新疆伊犁州昭苏县 2017年7月3日 S22 新疆乌鲁木齐市乌鲁木齐县 2019年4月3日 记录各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，12
S6 新疆伊犁州昭苏县 2017年9月2日 S23 新疆乌鲁木齐市乌鲁木齐县 2019年5月25日 个共有峰相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于
S7 新疆伊犁州昭苏县 2018年4月22日 S24 新疆乌鲁木齐市乌鲁木齐县 2019年5月25日
S8 新疆伊犁州昭苏县 2018年5月22日 S25 安徽亳州药材市场 2019年3月1日 3％（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置 24 h 内稳定
S9 新疆伊犁州昭苏县 2018年5月30日 S26 安徽亳州药材市场 2019年3月1日 性良好。
S10 新疆伊犁州昭苏县 2018年9月16日 S27 新疆国医馆（乌鲁木齐） 2019年4月9日 2.1.6 重复性试验 取药材样品（编号：S6）适量，粉
S11 新疆伊犁州察布查尔锡伯自治县 2018年8月26日 S28 济康大药房（乌鲁木齐） 2019年4月9日
S12 新疆伊犁州霍尔果斯市 2018年9月16日 S29 百草堂大药房（乌鲁木齐） 2019年4月9日 碎。精密称取上述粉末 0.5 g，共 6 份，按“2.1.1”项下方
S13 新疆伊犁州尼勒克县 2018年10月3日 S30 新疆维吾尔自治区中医院 2019年4月12日 法制备供试品溶液，再按“2.1.3”项下色谱条件进样测
S14 新疆乌鲁木齐市乌鲁木齐县 2017年9月7日 S31 新疆医科大学第一附属医院 2019年4月12日 定，以乙酰紫草素为参照，记录各共有峰的相对保留时
S15 新疆巴州和静县 2017年9月7日 S32 新疆维吾尔自治区中医院 2019年4月12日 间和相对峰面积。结果，12个共有峰相对保留时间和相
S16 新疆伊犁州昭苏县 2017年9月7日 S33 乌鲁木齐市中医医院 2019年4月12日
S17 新疆伊犁州昭苏县 2017年9月7日 S34 哈萨克斯坦（进口） 2019年5月10日 对峰面积的 RSD 均小于 3％（n＝6），表明方法重复性
2.1.2 混合对照品溶液的制备 取左旋紫草素、乙酰紫 良好。
草素、β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁对照品各适量，精密称 2.1.7 指纹图谱的生成 取 34 批药材样品适量，按
定，加乙腈制成上述 3 种成分质量浓度分别为 90、410 、 “2.1.1”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.3”项下色谱
500 µg/mL的单一对照品贮备液。取各单一对照品贮备 条件进样测定，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系
液适量，置于5 mL棕色量瓶中，加乙腈定容，摇匀，即得 统（2012A 版）》，以 S13 为参照图谱，建立 34 批药材样
上述 3 种成分质量浓度分别为 36、164、333 µg/mL 的混 品的指纹图谱。叠加指纹图谱见图 1、对照指纹图谱见
合对照品溶液。 图 2。
2.1.3 色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18 （250 mm×4.6 2.1.8 共有峰的指认 34 批样品共有 12 个共有峰，与
mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）- 0.05％甲酸水溶液（B），梯 混合对照品色谱图（见图3A）进行比对，指认2号峰为左
度洗脱（0～5 min，66％A→70％A；5～20 min，70％A→ 旋紫草素、4 号峰为乙酰紫草素、11 号峰为β，β′-二甲基
80％A；20～25 min，80％A→85％A；25～38 min，85％A； 丙烯酰阿卡宁。本研究前期试验确认,新疆紫草药材中
38～40 min，85％A→66％A；40～50 min，66％A）；检测 乙酰紫草素含量较高，且出峰稳定，加之分离度较好，故
波长：275 nm；流速：0.8 mL/min；柱温：30 ℃；进样量： 以其为参照，计算其他峰的相对保留时间和相对峰面
20 μL。 积。结果，34批样品相对保留时间的RSD为0～0.79％，
2.1.4 精密度试验 取“2.1.1”项下供试品溶液（编号： 相对峰面积的RSD为0～96.41％。

1 900
1 800
1 700 R
1 600 S34
S33
S32
1 500 S31
S30
1 400 S29
S28
1 300 S27
S26
1 200 S25
S24
1 100 S23
mV 1 000 S22
S21
S20
U， 900 S19
800 S18
S17
S16
700 S15
S14
600 S13
S12
500 S11
S10
400 S9
S8
300 S7
S6
200 S5
S4
100 S3
S2
0 S1
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40
t，min
图1 34 批样品的HPLC 叠加指纹图谱
Fig 1 HPLC superimposed fingerprints of 34 batches of samples
·1734 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 14 中国药房 2020年第31卷第14期