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和p-IκBα/IκBα比值均显著降低（P＜0.05或P＜0.01），详 表 4 GOEE 对 LPS 诱 导 的 RAW264.7 细 胞 中 p65、
见图1A、表4。 p-65、IκBα、p-IκBα、NRF2、HO-1 蛋白表达水平
的影响（x±±s，n＝3）
p-p65 Tab 4 Effects of GOEE on the protein expression of
p65，p-65，IκBα，RIκBα，NRF2 and HO-1 in
p65 LPS-induced RAW264.7 cells（x±±s，n＝3）
组别 剂量，μg/mL p-p65/p65 p-IκBα/IκBα NRF2 HO-1
p-IκBα 对照组 0.24±0.09 0.46±0.26 0.30±0.06 1.10±0.56
LPS模型组 1. 1.28±0.15 ＊＊ 1.33±0.38 ＊＊ 0.49±0.04 ＊ 1.29±0.23
DEX处理组 0.2 0.84±0.22 ## 0.64±0.34 #
IκBα
GOEE处理组 100. 0.92±0.18 # 0.80±0.36 # 0.78±0.12 ## 2.41± 0.55 #
200. 0.69±0.12 ## 0.65±0.23 # 1.05±0.11 ## 3.22±0.58 ##
300. 0.55±0.06 ## 0.38±0.06 ## 1.16±0.11 ## 4.01±0.91 ##
GAPDH
#
＊
＊＊
注：与对照组比较，P＜0.05， P＜0.01；与LPS模型组比较，P＜
对照组 LPS模 DEX处 GOEE 100 GOEE 200 GOEE 300
型组 理组 μg/mL处 μg/mL处 μg/mL处 ##
理组 理组 理组 0.05，P＜0.01
＊
A.p-p65/p65和p-IκBα/IκBα Note：vs. control group， P＜0.05， ＊ ＊ P＜0.01；vs. LPS model
#
##
group，P＜0.05， P＜0.01
NRF2
式与IκBα结合于细胞质中；LPS能够激活NF-κB信号通
路，导致 IκBα降解，之后 NF-κB 易位至细胞核诱导炎
LaminB
[15]
症 。因此，通过抑制IκBα降解来下调NF-κB的表达可
HO-1 能是抗炎药物的研究路线之一。据报道，NRF2 信号通
路与NF-κB通路具有交叉效应，炎症产生的过量ROS会
GAPDH
导致氧化应激，而 NRF2 信号通路是抗氧化应激反应中
对照组 LPS模 GOEE 100 GOEE 200 GOEE 300 最重要的途径，该通路被激活后可诱导抗氧化蛋白
型组 μg/mL处 μg/mL处 μg/mL处
理组 理组 理组
B. NRF2和HO-1 HO-1等产生，以对抗机体的氧化应激，从而保护正常细
[16]
图 1 不同剂量 GOEE 对 LPS 诱导 RAW264.7 细胞中 胞免受氧化应激的损害 。
p65、p-p65、IκBα、p-IκBα、INRF2、HO-1 蛋白表 NO 是炎症反应中传递信号的信息分子，是与炎症
[17]
达影响的电泳图 疾病有关的炎症介质之一 。本研究结果表明，GOEE
Fig 1 Electrophoresis of the effects of different does 显著抑制了 NO 的产生，表明了 GOEE 能够通过阻断炎
of GOEE on protein expression of p65，p-p65， 症 信 号 的 传 递 来 发 挥 抗 炎 作 用 。 在 LPS 诱 导 的
IκBα，p-IκBα，pNRF2 and HO-1 in LPS-in- RAW264.7 细胞炎症模型中，包括 TNF-α、IL-1β和 IL-6
duced RAW264.7 cells 在内的促炎细胞因子的水平均显著升高，提示其促进了
3.6 GOEE 对 LPS 诱导 RAW264.7 细胞 NRF2、HO-1 炎症的发展。因此抑制促炎细胞因子的产生是治疗炎
蛋白表达的影响 症性疾病的主要策略之一，这些炎症因子的表达主要受
与对照组比较，LPS 模型组细胞核中 NRF2 蛋白的 NF-κB 转录因子调控。本研究首先通过 MTT 法筛选出
表达水平显著升高（P＜0.05）；与 LPS 模型组比较， 安全剂量范围，从此范围中根据预试验结果设置给药剂
GOEE 各处理组细胞中 HO-1 蛋白和细胞核中 NRE2 蛋 量，并以 DEX 作为抗炎研究的阳性对照，以 NAC 作为
白的表达水平均显著升高（P＜0.05或P＜0.01），详见图 ROS 测定的阳性对照。由于 DEX 对 NRF2 信号通路无
1B、表4。 影响，因此在进行抗氧化研究时未设 DEX 组。本研究
4 讨论 结果表明，GOEE 可抑制 NF-κB 中的关键蛋白 IκBα和
岭南山竹子是一种民间传统用药，主要用于炎症性 p65 的磷酸化，从而抑制 NF-κB 信号通路的表达及其在
不适。其相关文献报道多集中于其树皮及树叶，但民间 下游转录的促炎细胞因子表达。有研究表明，在LPS诱
多用果皮入药。为此，本文主要研究了GOEE在LPS诱 导的肺部炎症中，NRF2基因敲除小鼠的TNF-α、IL-1β和
导 RAW264.7 细胞中的抗炎药理活性及其潜在分子 IL-6的表达高于未敲除小鼠；进一步研究表明，NRF2基
机制。 因 敲 除 小 鼠 的 NF-κ B p65 与 DNA 有 更 强 的 结 合 活
[18]
炎症反应通常由 NO、ROS 和炎症细胞因子（包括 性 。说明 NRF2 编码基因的缺失能够加重炎症反应。
TNF-α、IL-1β和IL-6）等介导，而炎症细胞因子受NF-κB HO-1的上调会促进其衍生代谢产物（如CO、胆红素等）
信号通路的调节。在正常情况下，NF-κB以异二聚体形 的产生，这些代谢产物不仅具有抗氧化活性，还具有抗

中国药房 2020年第31卷第14期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 14 ·1723 ·