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12批藤梨根药材均于2018年10月采自于大别山地 2.6 藤梨根化学成分分析
区（编号：1801-1812），经海军军医大学药学院黄宝康教 采用 Qualitative Analysis B 10.0 定性分析软件进行
授鉴定为猕猴桃科猕猴桃属植物中华猕猴桃（A. chinen- 数据处理。首先，将所采集的藤梨根化学成分一级质谱
sis Planch.）的干燥根。标本存放于上海中医药大学科创 数据与“2.5.1”项下建立的化学成分数据库进行比对，根
中心中药资源与生物技术中心实验室。 据其匹配得分（＞90）、精确分子量的误差（±5 ppm 以
2 方法 内）以及同位素分布，初步对藤梨根药材中的成分进行
2.1 混合对照品溶液的制备 定性筛查。然后，根据各成分的保留时间和精确分子
量，与已有对照品进行对比后推测出待测成分结构；若
精 密 称 取 45 种 对 照 品 各 10.0 mg，分 别 置 于 10
无相应对照品，则通过二级质谱数据对待测成分的碎片
mL 量瓶中，加甲醇溶解并定容，制成质量浓度均为
离子进行解析，再结合相关文献推测出该成分结构。最
1.0 mg/mL 的单一对照品贮备液，于－20 ℃条件下保
后，在 MassHunter Data Acquisition 7.1 工作站的“Target
存，备用。临用前，取各对照品贮备液100 μL，置于同一
MS/MS”采集模式下采集样品和对照品的二级质谱数
10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，制成各成分质量浓度
据，对其主要碎片离子进行比对分析，推测其裂解方式，
均为10 μg/mL的混合对照品溶液。
进一步确定化学成分结构。
2.2 供试品溶液的制备 3 结果
取藤梨根药材适量，粉碎，过40目筛后，精密称取粉
3.1 化学成分的鉴定分析
末 1.0 g，置于 100 mL 具塞锥形瓶中，加入 80％甲醇 30
藤梨根供试品溶液的总离子流图见图 1。通过与
mL，超声（功率：400 W，频率：40 kHz）提取 60 min，摇
“2.5.1”“2.5.2”项下建立的数据库进行对比，结合相关文
匀，滤纸滤过后再经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，
献信息以及质谱裂解规律进行分析，鉴定出58个化学成
即得。
分，其中包括16个五环三萜类化合物、12个黄酮类化合
2.3 色谱条件
物、17 个有机酸类化合物等；有 9 个化合物为首次从藤
色谱柱：Waters XSelect HSS T3（100 mm×2.1 mm， 梨根中鉴定出来，详见表2。
2.5 μm）；流动相：0.1％甲酸乙腈溶液（A）-0.1％甲酸水 -ESI TIC 扫描 Frag＝140.0 Vtlg-h12-neg-003.d
1.6×10 8 1
溶液（B），梯度洗脱（0 min，5％A；3 min，15％A；13 min， 1.4×10 8
1.2×10 8
41％A；23 min，70％A；25～30 min，95％A）；流速：0.3 1.0×10 8
mL/min；柱温：40 ℃；进样量：3 μL。 响应度 0.8×10 8 8
0.6×10
0.4×10 8
2.4 质谱条件 0.2×10 8
0
采用ESI离子源，在负离子模式（MSI ）条件下采集
－
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28
数据，扫描范围为 m/z 50～1 500。具体质谱参数：干燥 时间，min
－
气温度为350 ℃；干燥气流速为10 L/min；雾化气压力为 图1 藤梨根供试品溶液的总离子流图（MSI 模式）
45 psi；毛细管电压为 3 500 V；鞘气温度为 350 ℃；鞘气 Fig 1 Total ion chromatogram of test solution of A.
－
流速为 11 L/min；碎裂电压为 140 V；锥孔电压为 65 V； chinensis root（MSI mode）
八极杆电压为 750 V；参比离子分别为 m/z 112.985 1、 表2 藤梨根化学成分的UHPLC-Q-TOF/MS鉴定结果
1 033.988 1；二级能量（CE）分别10、20、40 V。 Tab 2 Identification results of chemical components
2.5 藤梨根化学成分数据库和二级质谱数据库的建立 in A. chinensis root by UHPLC-Q-TOF-MS/MS
2.5.1 化 学 成 分 数 据 库 根 据 国 内 外 专 业 数 据 库 tR， m/z
序号 离子模式 碎片离子 分子式 化合物
PubMed、SciFinder、ChemSpider、中科院化学专业数据 min 实测值 理论值
1 ＊ 0.610 [M－H] － 173.104 3 173.104 4 131 C6H14N4O2 L-精氨酸
库、Sci-Hub、中国知网等平台中的国内外相关文献研 2 ＊ 0.834 [M－H] － 132.029 9 132.030 2 115、71 C4H7NO4 L-天门冬氨酸
究，收集了藤梨根中目前已经报道的 166 个化合物。同 3 ＊ 0.834 [M－H] － 179.056 0 179.056 1 137、112 C6H12O6 肌醇
4 ＊ 0.877 [M－H] － 179.055 8 179.056 1 161、109 D-无水葡萄糖
时，根据 Qualitative Analysis B 10.0 定性分析软件中的 C6H12O6
5 ＊ 0.927 [M－H] － 191.055 8 191.055 7 111 C7H12O6 奎宁酸
“Formular-database-generator”工具（含各元素精确质量 6 ＊ 1.010 [M－H] － 191.056 0 191.055 7 147、111 C6H8O7 柠檬酸
数），结合所测得的各成分所含碳、氢、氧等元素的数量， 7 ＊ 1.383 [M－H] － 130.086 6 130.087 3 115 C6H13NO2 L-亮氨酸
计算出相应的精确分子量，并建立了包括化合物名称 8 ＊ 1.394 [M+HCOO] － 312.093 8 312.095 0 134 C10H13N5O4 腺苷
9 ＊ 1.495 [M－H] － 117.019 3 117.019 5 73 C4H6O4 琥珀酸
（含英文名称）、分子式、CAS号在内的化学成分数据库。 10 ＊ 2.670 [M－H] － 121.029 1 121.029 5 77 C7H6O2 苯甲酸
2.5.2 二级质谱数据库 通过MassHunter Data Acquisi- 11 ＊ 3.064 [M－H] － 153.019 6 153.019 3 109 C7H6O4 原儿茶酸
tion 7.1工作站采集45种对照品的二级质谱数据[包含分 12 # 3.895 [M－H] － 577.134 8 577.135 1 451、425、407、 C30H26O12 原花青素B1 [13-14]
289、125
子离子、碎片离子 m/z 信息和保留时间（tR ）等]，导入 13 ＊ 4.017 [M－H] － 137.024 4 137.024 2 108 C7H6O3 原儿茶醛
PCDL Manager 8.0数据库软件中，建立二级质谱数据库。 14 ＊ 4.036 [M－H] － 137.024 5 137.024 2 108、92 C7H6O3 对羟基苯甲酸

中国药房 2020年第31卷第14期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 14 ·1727 ·