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biotransformation pathway is phase Ⅰ reaction，which mainly consisted of reduction，oxidation and hydrolysis.
KEYWORDS Laportea bulbifera；Isolated human intestinal flora；Metabolism；UPLC-Q-TOF/MS；Identification

红禾麻为荨麻科艾麻属植物珠芽艾麻[Laportea 有限公司）；Buchi R-200 型旋转蒸发仪（瑞士 Buchi 公
bulbifera（Sieb. et Zucc.）Wedd.]的新鲜或干燥全草，又名 司）；KQ-2200DE型超声波清洗机（昆山舒美超声仪器有
红活麻、野绿麻、华中艾麻等，为贵州苗族常用药材，具 限公司）；AnaeroPack-Anaero型厌氧产气袋、厌氧培养罐
有祛风除湿、活血化瘀之功效，对风湿麻木、类风湿性关 （日本 MGC 公司）；MTN-2800D 型氮吹浓缩装置（天津
节炎、风湿性关节炎、跌扑损伤以及骨折等症有独特疗 奥特塞恩斯仪器有限公司）；YXQ-LS-18SI 型手提式压
效 [1-2] 。根据有关文献报道，红禾麻中主要含有黄酮类、 力蒸汽灭菌器（上海博迅实业有限公司）。
内酯类、糖类及鞣质等成分，具有抗炎、镇痛、免疫抑制、 1.2 药品与试剂
抗类风湿性关节炎等药理作用 [3-7] 。本课题组前期考察 红禾麻药材于2017年采收自贵州地区，经贵阳中医
了红禾麻提取物在大鼠体内的原型入血成分，结果发现 学院药学院生药学教研室孙庆文副教授鉴定为荨麻科
其主要为黄酮类和酚酸类：5个黄酮类原型成分为芦丁、 艾麻属植物珠芽艾麻[L. bulbifera（Sieb. et Zucc.）Wedd.]
槲皮苷、异槲皮苷、木犀草苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷，3 的干燥全草；芦丁、异槲皮苷、木犀草苷、山柰酚-3-O-芸
个酚酸类原型成分为3-O-咖啡酰基奎宁酸、4-O-咖啡酰 香糖苷、槲皮苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号
基奎宁酸、5-O-咖啡酰基奎宁酸；进一步的药动学与药 分别为 100080-201610、112007-201602、111720-201408、
效学研究显示，上述入血成分的药效发挥时间均滞后于 111809-201403、111538-201606，纯度均不低于 98％）；
其血药浓度达峰时间，分析原因可能是入血的原型成分 5-O-咖啡酰基奎宁酸、3-O-咖啡酰基奎宁酸、4-O-咖啡酰
在大鼠体内发生了生物转化，其代谢产物与原型成分共 基奎宁酸对照品（江西佰草源生物科技有限公司，批号
[8]
同发挥了药理作用 。 分别为 BCY-0921、BCY-0414、BCY-0920，纯度均不低于
人体肠道中栖息着最主要和最多样的微生物，这些 98％）；亮 氨 酸 脑 啡 肽 液（美 国 Waters 公 司 ，批 号 ：
微生物被统称为肠道菌群。肠道菌群作为人体“隐形器 W29061508）；厌氧培养液粉末（青岛高科技工业园博海
官”，在药物的药效、毒性、生物利用度及代谢方面发挥 生物技术有限公司，批号：20161025）；氯化钠注射液（贵
着重要作用 [9-10] 。传统中药大多数是通过口服吸收而发 州科伦药业有限公司，规格：250 mL∶ 2.25 g；作生理盐水
挥药效，而药物在生物体内不可避免地会与肠道菌群接 用）；乙腈、甲酸均为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为
[11]
触 ，因此中药的药效成分可能在吸收入血之前就已经 纯净水。
在肠道内与肠道菌群发生了相互作用，这可能导致其成 1.3 人体粪便
分活性、毒性以及生物利用度的改变等 [12-13] 。基于此，本 人体粪便均来自于贵州医科大学附属医院招募的
课题组在前期研究的基础上，将苗药红禾麻提取物与离 健康成年志愿者的新鲜粪便样本。
体人肠道菌群共同进行厌氧培养，模拟该提取物在人体 2 方法与结果
肠道中的代谢过程；同时，通过超高效液相色谱-四极杆- 2.1 红禾麻提取物的制备
飞行时间质谱联用技术（UPLC-Q-TOF/MS）对代谢后的 根据文献方法 ，称取红禾麻药材 5 kg，先后加入
[14]
产物进行定性分析，以明确红禾麻提取物的代谢产物及 10、8、8 倍量（L/kg，下同）70％乙醇加热回流提取，每次
代谢途径，旨在为阐明该药材中各化学成分在肠道中的 分别提取2、1.5、1.5 h，滤过；合并滤液，水浴下减压旋转
代谢规律提供依据。 蒸发浓缩至无醇味。将上述醇提物浓缩液用水稀释至
1 材料 1 g/mL（以原药材量计），加入等体积水饱和正丁醇萃
1.1 仪器 取，共萃取3次；合并正丁醇萃取液，水浴下减压旋转蒸
G2-XS Q-TOF 型 UPLC-Q-TOF/MS 仪，包括四元梯 发回收正丁醇，残留物进行真空干燥，得红禾麻正丁醇
度泵、真空脱气机、自动进样器、柱温箱、电喷雾四极杆 萃取物，即为红禾麻提取物（以原药材质量计算其提取
串联飞行时间质谱仪、MassLynx V4.1质谱工作站（美国 率为4.03％）。
Waters 公司）；DK-98-ⅡA 型恒温水浴锅、CDH6000BⅡ 2.2 红禾麻提取物在离体人肠道菌群中的代谢反应
型电热恒温培养箱（天津市泰斯特仪器有限公司）；Al- 2.2.1 红禾麻提取物药液制备 取“2.1”项下所制备的
legra 64R 型低温高速离心机（美国 Beckman Coulter 公 红禾麻提取物 1 g，加入 50％甲醇 100 mL，超声（功率：
司）；EL204 型电子分析天平[梅特勒-托利多仪器（上海） 100 W，频率：40 kHz，下同）30 min 使充分溶解，然后以
有限公司]；DZF-6050型真空干燥箱（上海一恒科学仪器 8 000 r/min 离心 5 min，取上清液，水浴挥干，粉碎，得挥

·1684 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 14 中国药房 2020年第31卷第14期