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红孩儿民间习用方法为水煎煮，故本研究选择以水 40
为溶剂进行水溶性浸出物测定。按照2015年版《中国药 30
典》（四部）通则“2201 浸出物测定法”中“水溶性浸出物 mAU 20
10
[12]
测定法热浸法” 测定并计算 5 批红孩儿药材的水溶性
0
浸出物含量（％），每批药材重复测定2次，取平均值作为 0 1 2 3 4 5 6 7
t，min
结果。结果，5 批红孩儿药材的水溶性浸出物含量为 A.阴性对照溶液
16.91％～19.58％，平均值为18.09％，详见表2。以平均
40
值下浮约20％暂定本品水溶性浸出物不得低于15.0％。 30
芦丁
2.3 含量测定 mAU 20
10
2.3.1 供试品溶液的制备
0
取红孩儿药材粉末（过三号筛）约1 g，精密称定，置 0 1 2 3 4 5 6 7
t，min
于具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25 mL，密塞，称定 B.供试品溶液
质量，置于水浴中加热回流提取 1 h，放冷，再次称定质 40
量，用50％甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液， 30 芦丁
即得。 mAU 20
10
2.3.2 对照品溶液的制备 0
0 1 2 3 4 5 6 7
称取芦丁对照品适量，置于 10 mL 量瓶中，加 50％ t，min
甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得每1 mL含芦丁0.147 8 C.对照品溶液
图6 高效液相色谱图
mg 的对照品贮备液。精密量取上述对照品贮备液 5
Fig 6 HPLC chromatograms
mL，置于10 mL量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，
得每1 mL含芦丁73.90 μg的对照品溶液。 法制备供试品溶液，再按“2.3.3”项下色谱条件进样测
2.3.3 色谱条件与系统适用性试验 定，记录峰面积并按标准曲线法计算含量。结果，红孩
色谱柱为Venusil XBP C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）； 儿药材中芦丁含量的 RSD 分别为 0.2％、1.07％、1.69％
流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液（20 ∶ 80，V/V）；流速为 1 （n＝3），表明该方法重复性良好。
mL/min；检测波长为258 nm；柱温为35 ℃；进样量为10 （2）中间精密度试验。由 2 名不同的实验人员在不
同时间分别精密称取红孩儿药材粉末（批号：20170727）
μL。取阴性对照溶液（甲醇）、“2.3.1”项下供试品溶液和
1 g，各 3 份，按“2.3.1”项下方法制备供试品溶液，再按
“2.3.2”项下对照品溶液各适量，按上述色谱条件进样测
“2.3.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲
定，记录色谱图，详见图6。
线法计算含量。结果，红孩儿药材中芦丁含量的RSD为
结果显示，红孩儿药材中芦丁的保留时间约为 5.7
2.3％（n＝6），表明该方法中间精密度良好。
min，与其余色谱峰的分离度均大于 1.5，理论板数以芦
2.3.6 稳定性试验
丁峰计为 6 000。暂定红孩儿药材的理论板数以芦丁
精密称取红孩儿药材粉末（批号：20170727）1 g，按
计不得低于5 000。
“2.3.1”项下方法制备供试品溶液，分别于室温下放置
2.3.4 线性关系考察
0、1、2、4、8 h 时按“2.3.3”项下色谱条件进样测定，记录
精密量取芦丁对照品贮备液 1.25、2.5、5、7.5、10
峰面积。结果，芦丁峰面积的 RSD 为 0.58％（n＝5），表
mL，分别置于 5 个 10 mL 量瓶中，用 50％甲醇稀释至刻
明供试品溶液在室温下放置8 h内稳定。
度，摇匀，得芦丁质量浓度分别为 18.47、36.95、73.90、
2.3.7 加样回收率试验
110.8、147.8 μg/mL 的系列对照品溶液。取上述系列对 精密称取 9 份已知含量的红孩儿药材粉末（批号：
照品溶液，按“2.3.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面 20170727）0.5 g，分别按样品含量的 50％、100％、150％
积。以对照品质量浓度（x，μg/mL）为横坐标、峰面积（y） 加入芦丁对照品溶液，按“2.3.1”项下方法制备供试品溶
为纵坐标进行回归分析，得回归方程：y＝0.358 4x－ 液，再按“2.3.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并
0.100 8（r＝0.999 8）。结果表明，芦丁检测质量浓度的 计算加样回收率，结果见表3。
线性范围为18.47～147.8 μg/mL。 2.3.8 耐用性试验
2.3.5 精密度考察 称取红孩儿药材粉末（批号：20170727）1 g，精密称
（1）重复性试验。分别精密称取红孩儿药材粉末 定，按“2.3.1”项下方法制备供试品溶液，再按“2.3.3”项
（批号：20170727）0.5、1、1.5 g，各 3 份，按“2.3.1”项下方 下色谱条件进样测定，分别记录不同流动相比例[乙

中国药房 2020年第31卷第12期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 12 ·1461 ·