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离子源（ESI）；采集模式：正离子；毛细管电压：1.5 kV；离                    2.4.4 血浆样品处理
        子源温度：120 ℃；溶剂气温度：400 ℃；脱溶剂气流量：                          取“2.4.2”项下样品200 μL，加入质量浓度为5 μg/mL
        800 L/h；锥孔气流量：50 L/h；扫描方式：MS Continuum              的 内 标 溶 液 400 μL，涡 旋 5 min 混 匀 ，于 4 ℃ 下 以
                                              E
        模式；扫描范围：m/z 50～1 200。                               20 000×g离心 10 min，取上清液于 37 ℃下以氮气流吹
        2.3 溶液的制备                                           干，残渣加甲醇 100 μL 复溶，涡旋 5 min 混匀，于 4 ℃
        2.3.1 Gedatolisib对照品贮备液及对照品溶液                       下以 20 000×g离心10 min，取上清液备测。
            精密称取 Gedatolisib 原料药适量，以甲醇溶解并定                  2.4.5 人工胃/肠液样品处理
        容至 5 mL 量瓶中，制成质量浓度为 1 mg/mL 的对照品                        取“2.4.3”项下样品200 μL，加入质量浓度为5 μg/mL
        贮备液，于4 ℃贮存。使用前用甲醇稀释得到相应质量                           的 内 标 溶 液 400 μL，涡 旋 5 min 混 匀 ，于 4 ℃ 下 以
        浓度的对照品溶液。                                           20 000×g离心10 min，取上清液备测。
        2.3.2 内标贮备液及内标溶液                                    2.5 生物样品定量分析方法学考察
            精密称取内标对照品适量，以甲醇溶解并定容至 5                         2.5.1 专属性考察
        mL量瓶中，制成质量浓度为1 mg/mL的内标贮备液，于                            分别取空白血浆、空白血浆+Gedatolisib 对照品
        4 ℃贮存。使用前用甲醇稀释得到相应质量浓度的内标                          （100 μg/mL）、血浆样品（10 μg/mL Gedatolisib 孵育 0.5
        溶液。                                                 h），除空白血浆不加入内标外其余均按“2.4.4”项下方法
        2.3.3 空白人工胃液的制备                                     处理，再按“2.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图；另
            按文献方法 ，取稀盐酸 16.4 mL，加水 800 mL，用                 取空白人工胃液、空白人工肠液、人工胃液、人工肠液、
                       [6]
        0.1 mol/L 盐酸溶液调 pH 至 1.3，再加水稀释并定容至                  人工胃液+Gedatolisib 对照品（100 μg/mL）、人工肠液+
        1 000 mL，即得空白人工胃液。                                  Gedatolisib 对 照 品（100 μg/mL）、人 工 胃 液 样 品（10
        2.3.4 人工胃液的制备                                       μg/mL Gedatolisib 孵育 0.5 h）、人工肠液样品（10 μg/mL
                       [6]
            按文献方法 ，取稀盐酸 16.4 mL，加水 800 mL、胃                 Gedatolisib 孵育 0.5 h），除空白人工胃肠液和人工胃肠
        蛋白酶10 g，摇匀使其溶解，用0.1 mol/L 盐酸溶液调pH                   液不加入内标外其余均按“2.4.5”项下方法处理，再按
        至1.3，再加水稀释并定容至1 000 mL，即得人工胃液。                     “2.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图。结果，在该
        2.3.5 空白人工肠液的制备                                     色谱条件下，Gedatolisib和内标均能同时被检出，保留时
                       [6]
            按文献方法 ，取磷酸二氢钾6.8 g，加水500 mL，摇                   间分别为 6.94、9.42 min，分离度良好，不受内源性物质
        匀使其溶解，用 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液调 pH 至 6.8，再                干扰，详见图2。
        加水稀释并定容至1 000 mL，即得空白人工肠液。                          2.5.2 线性关系考察
        2.3.6 人工肠液的制备                                           取大鼠空白血浆、空白人工胃液、空白人工肠液、人
            按文献方法 ，取磷酸二氢钾6.8 g，加水500 mL，摇                   工胃液和人工肠液各198 μL，分别精密加入不同质量浓
                       [6]
        匀使其溶解，用 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液调 pH 至 6.8；另                度的 Gedatolisib 对照品溶液 2 μL，制成 Gedatolisib 质量
        称取胰蛋白酶 10 g，加适量水溶解；将上述两种溶液混                         浓度依次为0.5、1、2、5、10、20、40 μg/mL的样品溶液（含
        合后，再加水稀释并定容至1 000 mL，即得人工肠液。                        醇量为1％），涡旋5 min混匀，分别按“2.4.4”“2.4.5”项下
        2.4  样品采集、配制与处理                                     方法处理，记录峰面积。以Gedatolisib峰面积与内标峰
        2.4.1 空白血浆采集                                        面积的比值为纵坐标（y）、Gedatolisib的质量浓度为横坐
            取清洁级大鼠6只，于股动脉采血，分别置于含肝素                         标（x）进行回归分析，得 Gedatolisib 在空白血浆中的回
                                                                                         2
        钠的离心管中，于4 ℃下以3 000×g离心10 min，取上层                    归方程为 y＝0.034 5x－0.008 9（R ＝0.999 6），在空白人
                                                                                                         2
        血浆于－80 ℃贮存，备用。                                      工 胃 液 中 的 回 归 方 程 为 y＝0.035 1x － 0.004 3（R ＝
        2.4.2 血浆样品配制                                        0.999 1）、在空白人工肠液中的回归方程为y＝0.033 4x－
            按文献方法 ，取大鼠空白血浆 198 μL，分别加入                      0.005 2（R ＝0.999 5）、在人工胃液中的回归方程为 y＝
                                                                    2
                       [6]
        低、中、高质量浓度（2、10、30 μg/mL）的 Gedatolisib 对照            0.034 4 x－0.008 6（R ＝0.999 3）、在人工肠液中的回归
                                                                              2
                                                                                       2
        品溶液（含醇量为 1％）2 μL，振荡混匀，在 37 ℃水浴中                     方程为 y＝0.033 8x－0.001 8（R ＝0.999 4）。结果表明，
        孵育0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 h。                          Gedatolisib检测质量浓度的线性范围均为1～40 μg/mL，
        2.4.3 人工胃/肠液样品配制                                    定量下限均为1 μg/mL。
            精密量取质量浓度为 1 mg/mL 的 Gedatolisib 对照              2.5.3 准确度、精密度、稳定性试验
        品溶液4份，每份50 μL，分别置于5 mL EP管中，分别用                         取大鼠空白血浆、空白人工胃液、空白人工肠液、人
        空白人工胃液、空白人工肠液、人工胃液、人工肠液稀释                           工胃液和人工肠液各198 μL，分别精密加入不同质量浓
        至刻度（含醇量均为 1％）；再用 EP 管分装 200 μL，振荡                   度的 Gedatolisib 对照品溶液 2 μL，制成定量下限质量
        混匀，于37 ℃水浴中孵育0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0 h。           浓度（1 μg/mL）样品溶液和低、中、高质量浓度（2、10、30


        ·1454  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 12                                中国药房    2020年第31卷第12期
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