Page 24 - 202012
P. 24

蒙药阿给(蒙文名)为菊科蒿属多年生植物冷蒿                           生产许可证号:SCXK(蒙)2016-0001。
        (Artemisia frigida Willd.)的地上部分,味苦、涩,性凉、            2 方法
        燥,临床上用于各种出血、关节肿胀、肾热、月经不调、疮                          2.1 阿给水提物药液制备
                   [1]
        疥等的治疗 。传统医学常以冷蒿全草入药,主要用于                                取阿给适量,粉碎成粗粉。称取该粗粉10.0 g,置于
        治疗黄疸型肝炎、胆囊炎、小便不利、皮肤瘙痒、湿疹、蛔                          砂锅中,加水煎煮 2 次,每次加水 100 mL,每次煎煮 1.0
                                            [2]
        虫病和蛲虫病等,可作为“茵陈”的代用品 。此外,该植                          h;趁热抽滤,并用水清洗滤渣及容器2~3次;合并滤液,
        物还有食用价值,牧民常取其嫩枝,用热水烫后和玉米                            减压旋转蒸发浓缩至浸膏状(得率为 9.98%),并在 4 ℃
                                                [3]
        面,蒸煮后食用,是一种营养价值较高的食物 。目前,                           下密封保存。临用时,取提取物浸膏,以水制成药液进
        对阿给的研究主要集中在药材质量标准 、化学成分                      [5-6] 、  行动物实验。
                                           [4]
                [7]
                                                    [10]
                                         [9]
                                   [8]
        含量测定 、有效成分积累规律 、炮制 和药理药效 等                          2.2  阿给水提物对 2,4-二硝基氯苯致小鼠耳肿胀的影
        方面。已有文献记载,阿给有止血、消肿、消“奇哈”之功
                                                            响考察
        效 ,但关于其抗炎作用及机制尚不清楚。本课题组前
          [1]
                                                                            [11]
                                                                参考文献方法 ,取小鼠 60 只,随机分为模型对照
        期通过预实验发现,阿给水提物表现出较好的抗炎活
                                                            组、阿司匹林组(0.4 g/kg,以水制成药液;剂量参照文献
        性。基于此,本研究采用2,4-二硝基氯苯致小鼠耳肿胀                              [11]
                                                            方法    设置)和阿给水提取物高、中、低剂量组[60.0、
        和角叉菜胶致大鼠足肿胀等急性炎症模型,考察阿给水
                                                            30.0、15.0 g/kg,以生药量计;剂量参照本课题组前期预
        提取物的抗炎作用并探讨其作用机制,旨在为该药材的
                                                            实验结果设置),每组 12 只。各组小鼠按 0.2 mL/10 g
        开发和临床应用提供一定的科学依据。
                                                            灌胃相应药物,模型对照组灌胃等容水,每天1次,连续
        1 材料
                                                            5 d。于末次给药0.5 h后,于小鼠右耳内、外侧各均匀涂
        1.1  仪器
                                                            抹2%的2,4-二硝基氯苯乙醇溶液0.05 mL致炎,以左耳
            NanoVue Plus 型微量紫外-可见分光光度计(美国
                                                            作为对照(涂抹生理盐水)。涂抹致炎药物1.0 h后,剪下
        GE公司);Epoch型酶标仪(美国BioTek公司);GENIUS
                                                            小鼠左右耳廓,用 8 mm 打孔器在两耳相同部位处取下
        6K-D 型台式低速自动平衡离心机(长沙市鑫奥仪器仪
                                                            耳片并称定其质量,计算耳肿胀度和肿胀抑制率:耳肿
        表有限公司);RE-52AA型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪
                                                            胀度(mg)=致炎后右耳片质量-未致炎左耳片质量;肿
        器厂)。
                                                            胀抑制率(%)=[(模型对照组平均肿胀度-给药组平
        1.2  药品与试剂
                                                            均肿胀度)/模型对照组平均肿胀度]×100%。
            阿司匹林片(阳性对照,湖南新汇制药股份有限公
                                                            2.3  阿给水提物对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响考察
        司,批号:161009,规格:50 mg);2,4-二硝基氯苯(上海
                                                                参照文献方法 ,另取小鼠60只,按“2.2”项下方法
                                                                            [11]
        瀚思化工有限公司,批号:20161113);角叉菜胶(美国
                                                            分组并给药,每天 1 次,连续 5 d。末次给药前测量并记
        Sigma公司,批号:17H1148);肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶
                                                            录各鼠右后足跖容积。末次给药30 min后,在各鼠右后
        联免疫吸附测定(ELISA)检测试剂盒、一氧化氮(NO)检
                                                            足跖皮下注射0.1%角叉菜胶溶液(以生理盐水为溶剂,
        测试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号:20150414、
                                                            临用新配)0.1 mL致炎。在末次给药前和注射角叉菜致
        20150316);大鼠前列腺素E2 (PGE2 )ELISA检测试剂盒、
                                                            炎后0.5、1.0、2.0、4.0 h时分别测量并记录小鼠右后足跖
        白细胞介素 1β(IL-1β)ELISA 检测试剂盒(武汉基因美
        生物科技有限公司,批号:2401142416、1151142416);丙                容积,并计算致炎后各时间点小鼠的足肿胀率:足肿胀
        二醛(MDA)检测试剂盒(上海江莱生物科技有限公司,                          率(%)=(致炎后右后足跖容积-致炎前右后足跖容
        批号:20170317);其余试剂均为分析纯或实验室自制,                       积)/致炎前右后足跖容积×100%。
        水为蒸馏水。                                              2.4  阿给水提物对角叉菜胶致炎小鼠足跖炎性组织中
            植物全株采自内蒙古乌兰察布市四子王旗(地理位                          TNF-α、IL-1β、PGE2含量的影响考察
        置:41 °52 ′39 ″N、111 °07 ′25 ″E,海拔:1 370 m),经内           在“2.3”项下对小鼠注射角叉菜胶致炎后 4.0 h 时
        蒙古医科大学药学院薛焱教授鉴定为菊科蒿属植物冷                            (测定右后足跖容积后),脱颈处死各组小鼠。自其踝关
        蒿(A. frigida Willd.)。取其地上部分(即阿给),于室外                节下剪下右后足跖,剥皮剪碎后放入装有冰生理盐水的
        自然晒干后,在室温下贮藏,备用。                                    试管中,匀浆处理,以3 000 r/min离心15 min,取上清液,
        1.3  动物                                             于-70 ℃冰箱保存,备测。取上述上清液,室温解冻后,
            健康昆明种小鼠,清洁级,雌雄各半,体质量为                           采用 ELISA 法以酶标仪测定 TNF-α、IL-1β、PGE2含量,
        (18±2)g,由内蒙古大学实验动物研究中心提供,动物                         均严格按照相应试剂盒说明书操作。


        ·1426  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 12                                中国药房    2020年第31卷第12期
   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29