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酯、正丁醇进行萃取。其中，乙酸乙酯萃取部位用适量 胞数分别为（2.8±1.7）、（7.4±4.1）个，即给药组小鼠的
水溶解后，采用大孔吸附树脂柱色谱进行分离，分别用 凋亡细胞明显更多。该研究表明，没食子酸可通过诱导
10％、30％、50％、95％乙醇进行梯度洗脱；取 50％乙醇 肿瘤细胞的凋亡来抑制移植性肺癌细胞的生长。
洗脱部分用硅胶柱色谱进行分离，用不同体积比的二氯 另有研究表明，绿原酸可预防结肠癌、口腔癌等疾
甲烷-甲醇混合溶液进行梯度洗脱后，依次经过 Sepha- 病的发生，并且其可促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞
dex LH-20葡聚糖凝胶柱色谱、硅胶柱色谱、聚酰胺柱色 生长 。Yamagata K 等 采用 MTT 法检测了绿原酸对
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谱并结合半制备型液相分离系统纯化得到酚酸类化合 人肺癌 A549 细胞增殖的影响，并借助聚合酶链式反应
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物单体。赵志勇等 采用同样的方法，分别用氯仿、乙 法（PCR）分析其可能机制。结果显示，经绿原酸处理后
酸乙酯和正丁醇对连翘乙醇提取物进行萃取，取乙酸乙 的肺癌细胞存活率降低，Bcl-2 基因的表达下降，Bax 基
酯萃取部位通过大孔吸附树脂以10％、30％、60％、95％ 因的表达增加，提示绿原酸可通过影响肺癌细胞相关凋
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乙醇梯度洗脱后，采用Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱色 亡基因的表达来促进肺癌细胞的凋亡。Yan Y等 研究
谱、ODS柱色谱等对上述60％乙醇洗脱部分进行分离纯 发现，绿原酸可以通过抑制人肝癌 HepG2 细胞增殖、诱
化，得到酚酸类化合物单体，最后再根据单体的理化性 导胞外信号调节激酶 1/2（ERK1/2）失活、抑制 HepG2 异
质和波谱数据鉴定其结构。 种移植组织中基质金属蛋白酶 2（MMP-2）和 MMP-9 表
4 药理作用 达等多种途径来阻止肝癌的进一步发展。Li HR等 研
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4.1 抗氧化、抗自由基作用 究发现，30、60 μmol/L 的绿原酸均能显著抑制 B16 小鼠
酚酸类成分是连翘中广泛存在的具有抗氧化活性 黑色素瘤细胞增殖。
的次生代谢产物 。有研究表明，酚酸类成分有较强的 研究表明，连翘中存在的酚酸类成分咖啡酸也具有
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抗氧化、抗自由基作用，并且其抗氧化活性与其羟基个 抗肿瘤活性。Dziedzic A等 利用流式细胞术分析了咖
数及取代基位置相关，即随着羟基个数的增加，其抗氧 啡酸对人头颈部鳞癌 Detroit 562 细胞增殖和凋亡的影
化能力逐渐增强；在取代基相同时，C6-C3型酚酸类成分 响，结果表明，50 μmol/L 的咖啡酸即可诱导 Detroit 562
的抗氧化能力强于 C6-C1型酚酸类分成，例如咖啡酸的 细胞凋亡。Brautigan DL 等 在土拨鼠 WHC-17 肝癌细
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抗氧化能力强于原儿茶酸 。酚酸的抗氧化能力还与 胞培养基中加入咖啡酸，12 h 后活细胞数明显减少，表
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总酚酸的含量成正相关。例如，王燕等 研究发现，随 明咖啡酸可通过诱导肝癌细胞凋亡来抑制肝癌细胞的
着连翘中总酚酸含量的增加，其清除1，1-二苯基-2-三硝 增殖。
基苯肼（DPPH）自由基的能力逐渐加强。酚酸的浓度对 4.3 抗炎作用
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其抗氧化活性也有影响，范金波等 采用钼酸铵法比较 相关研究发现，连翘可改善由结肠炎所引起的结肠
了不同浓度（0.02～0.1 mg/mL）咖啡酸的抗氧化能力，结 组织病理学损害，包括上皮细胞坏死、炎性细胞浸润、溃
果显示，咖啡酸的抗氧化能力随其浓度的增加而有所增 疡和黏膜下水肿等 [44-52] 。连翘可抑制结肠炎模型小鼠的
强。张飞 通过HPLC-DPPH离线法识别连翘叶中能够 肠道炎症，研究者推测连翘对结肠炎的药理作用可能源
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消除DPPH自由基的成分，发现连翘中的酚酸类成分绿 于其酚酸类成分（咖啡酸、绿原酸和原儿茶酸） 。阿魏
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原酸对 DPPH 自由基具有清除作用。Jiao J 等 从连翘 酸是连翘酚酸类成分中的一种 ，吴建良等 研究发现，
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制成的茶浸液中分离得到绿原酸，并采用DPPH法评价 阿魏酸可通过ERK信号通路抑制炎症因子表达，并且该
其抗氧化能力，发现其半数抑制浓度（IC50 ）[（0.083± 化合物具有抑制小胶质细胞活化和神经性炎症的作
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0.002）mg/mL]与阳性对照药物抗坏血酸（VC）[（0.062± 用。Su JH 等 研究发现，绿原酸不仅能显著抑制脂多
0.002）mg/mL]相似，表明该化合物具有与VC相当的抗 糖（LPS）诱导的小鼠 RAW 264.7 细胞和 BV2 小神经胶
氧化活性。 质细胞中一氧化氮（NO）的产生，而且还能显著抑制诱
4.2 抗肿瘤作用 导型一氧化氮合酶（iNOS）、环氧合酶 2（COX-2）的表
连翘中的酚酸类成分在体内外研究中均表现出一 达，减少促炎细胞因子[包括白细胞介素 1（IL-1）和肿瘤
定的抗肿瘤活性，如没食子酸、绿原酸、咖啡酸等 [33-35] 。 坏死因子α（TNF-α）]和其他炎症相关标志物（如IL-6）的
郗艳丽 采用MTT法、环境扫描电镜技术和激光共聚焦 产生，且呈剂量依赖性，提示该化合物可用于预防和治
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显微技术检测到没食子酸可抑制3种人肺癌细胞（95-D 疗炎症反应性疾病。Lee JH等 研究发现，绿原酸对由
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细胞、A549 细胞和 NCI-H460 细胞）的增殖并诱导其凋 白色念珠菌引起的败血症性关节炎模型BALB/c小鼠具
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亡。Kawada K等 将LL-2肺癌细胞移植到C57Black小 有保护作用，这种作用可能是通过抑制巨噬细胞产生
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鼠体内，并以没食子酸进行干预，利用末端脱氧核苷酸 NO 和抑制 T 细胞增殖来介导的。Chen DY 等 研究发
转移酶介导的 dUTP 生物素缺口末端标记法（TUNEL） 现，绿原酸可抑制脊髓损伤模型大鼠的炎症反应，降低
测得模型组和给药组小鼠肿瘤组织中的TUNEL阳性细 iNOS活性，抑制COX-2蛋白表达，并可通过Toll样受体
中国药房 2020年第31卷第12期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 12 ·1519 ·
