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180                                              条带数量增多,亮度明显增强;丹皮酚组大鼠的电泳图
           pA 160                                           中部分条带的亮度明显增强,也有部分条带的亮度有所
           电信号, 140          1  2  3  4  5  6  7            减弱;苦杏仁苷组大鼠的电泳图中条带数量明显减少,
           120
           100
            80
            60
            40
            20
            0                                               其亮度明显减弱。此外,上述现象在Eric-PCR电泳图中
                  2    4   6    8   10   12  14   16
                                时间,min
                                                            更为明显,故本研究采用Eric-PCR法对末次给药48 h后
                             A.混合对照品溶液
                                                            的大鼠粪便进行分析,发现随着给药时间的延长,模型
           250                                              组、苦杏仁苷组和丹皮酚组的条带数和条带亮度均有明
           电信号, 200         1  2  4  5                      显增多/增强的趋势,胶囊组和芍药苷组的条带数和条带
           pA
           150
           100
            50
             0                  3     6 7                   亮度则明显减少/减弱,各组间差异减小,详见图2C。
                  2    4   6    8   10   12  14   16
                                时间,min
                           B.结肠内容物样品溶液
           250
           pA
           电信号, 200
           150
           100
            50
             0                                                   正常组     模型组   胶囊组   苦杏仁苷组 丹皮酚组   芍药苷组
                  2    4   6    8   10   12  14   16                  A.给药1 h时大鼠肠道菌群的Rep-PCR电泳图
                                时间,min
                               C.空白溶剂
            注:1.乙酸;2.丙酸;3.异丁酸;4.丁酸;5.异戊酸;6.戊酸;7.内标
            Note:1. acetic acid;2. propionic acid;3. isobutyric acid;4. butyric
        acid;5. isovaleric acid;6. valeric acid;7. internal standard
                         图1   气相色谱图                              正常组     模型组   胶囊组   苦杏仁苷组 丹皮酚组   芍药苷组
                                                                      B.给药1 h时大鼠肠道菌群的Eric-PCR电泳图
                     Fig 1  GC chromatograms
        表2    6种SCFAs的回归方程、线性范围、定量下限以及
              重复性、加样回收率试验结果
        Tab 2   Results of regression equation,linear range,
                limit of quantification and test of repeatability
                                                                 正常组     模型组   胶囊组   苦杏仁苷组 丹皮酚组   芍药苷组
                and recovery for 6 kinds of SCFAs                     C.给药48 h时大鼠肠道菌群的Eric-PCR电泳图
                                      重复性(n=6)  加样回收率(n=9)     注:1~6.正常组;7~12.模型组;13~18.胶囊组;19~24.苦杏仁苷
                           线性范围,定量下限,
        SCFAs 回归方程      R 2          平均含量,RSD, 平均加样回 RSD,   组;25~30.丹皮酚组;31~36.芍药苷组;37. DL2000 DNA Marker;38.
                            mg/L  mg/L
                                       mg/g  %  收率,%  %     DL5000 DNA Marker
        乙酸   y=20.28x+0.520 1  0.999 8 5~1 000  5  0.82  4.8  113.3  9.9  Note:1-6. normal group;7-12. model group;13-18. capsule group;
        丙酸   y=35.033x+0.140 6 0.999 9 5~1 000  5  0.36  10.9  100.7  14.1  19-24. amygdalin group;25-30. paeonol group;31-36. paeoniflorin
        丁酸   y=43.968x+0.254 0 0.999 9 5~1 000  5  1.31  8.1  99.0  11.9  group;37. DL2000 DNA Marker,38. DL5000 DNA Marker
        异丁酸 y=43.521x+0.369 3 0.999 4 5~1 000  5  0.05  7.7  99.7  12.6
        戊酸   y=49.954x+0.194 2 0.999 9 5~1 000  5  0.07  5.0  101.2  9.6  图 2  各组大鼠粪便中肠道菌群 DNA 的 Rep-PCR 和
        异戊酸 y=52.42x+0.235 2  0.999 9 5~1 000  5  0.06  5.2  102.5  10.5  Eric-PCR电泳图
        表3    各组大鼠结肠内容物中SCFAs的含量比较(x±±s,                    Fig 2 Rep-PCR and Eric-PCR electrophoretograms
              n=6,mg/g)                                            of intestinal flora DNA in feces of rats in each
        Tab 3 Comparison of the contents of SCFAs in colo-         group
               nic contents of rats in each group(x±±s,n=6,
                                                            3.3.2  肠道菌群的多样性指数            给药 1 h 时,与正常组
               mg/g)
                                                            比较,模型组大鼠肠道菌群的多样性指数均显著下降
        组别      乙酸    丙酸    丁酸    戊酸   异戊酸   异丁酸   总SCFAs  (P<0.05 或 P<0.01);与模型组比较,胶囊组和芍药苷
        正常组   1.05±0.23 0.42±0.12 1.99±0.65  0.08±0.02 0.06±0.02 0.06±0.01 3.65±1.02
        模型组   0.82±0.14 0.22±0.06 1.07±0.23 **  0.07±0.02 0.07±0.02 0.06±0.02 2.22±0.64 **  组大鼠肠道菌群的多样性指数均显著升高,而丹皮酚组
                   *
                         *
                         #
        胶囊组   0.79±0.14 0.45±0.10 1.12±0.41  0.08±0.02 0.06±0.02 0.06±0.01 2.86±0.61 #  和苦杏仁苷组大鼠肠道菌群的多样性指数均显著降低
                                           #
                         #
                   #
        芍药苷组  1.03±0.13 0.39±0.06 1.51±0.26 #  0.06±0.02 0.04±0.01 0.05±0.01 3.09±0.46 ##
                         #
        丹皮酚组  0.89±0.18 0.41±0.07 1.36±0.47 #  0.08±0.01 0.06±0.01 0.06±0.01 2.87±0.67 #  (P<0.05或P<0.01)。给药48 h时,各组大鼠肠道菌群
        苦杏仁苷组 0.79±0.23 0.27±0.03 0.91±0.34  0.07±0.01 0.06±0.02 0.06±0.02 2.14±0.54  的多样性指数组间比较,差异均无统计学意义(P>
            注:与正常组比较,P<0.05, P<0.01;与模型组比较,P<0.05,          0.05),详见表4。
                                                  #
                               **
                        *
        ##
         P<0.01                                             4 讨论
            Note:vs. normal group,P<0.05, P<0.01;vs. model group,P<
                           *
                                  **
                                                     #
        0.05,P<0.01                                             痛经是最常见的妇科疾病,桂枝茯苓胶囊在治疗原
            ##
        ·1324  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 11                                中国药房    2020年第31卷第11期
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