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180 条带数量增多,亮度明显增强;丹皮酚组大鼠的电泳图
pA 160 中部分条带的亮度明显增强,也有部分条带的亮度有所
电信号, 140 1 2 3 4 5 6 7 减弱;苦杏仁苷组大鼠的电泳图中条带数量明显减少,
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0 其亮度明显减弱。此外,上述现象在Eric-PCR电泳图中
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时间,min
更为明显,故本研究采用Eric-PCR法对末次给药48 h后
A.混合对照品溶液
的大鼠粪便进行分析,发现随着给药时间的延长,模型
250 组、苦杏仁苷组和丹皮酚组的条带数和条带亮度均有明
电信号, 200 1 2 4 5 显增多/增强的趋势,胶囊组和芍药苷组的条带数和条带
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0 3 6 7 亮度则明显减少/减弱,各组间差异减小,详见图2C。
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时间,min
B.结肠内容物样品溶液
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0 正常组 模型组 胶囊组 苦杏仁苷组 丹皮酚组 芍药苷组
2 4 6 8 10 12 14 16 A.给药1 h时大鼠肠道菌群的Rep-PCR电泳图
时间,min
C.空白溶剂
注:1.乙酸;2.丙酸;3.异丁酸;4.丁酸;5.异戊酸;6.戊酸;7.内标
Note:1. acetic acid;2. propionic acid;3. isobutyric acid;4. butyric
acid;5. isovaleric acid;6. valeric acid;7. internal standard
图1 气相色谱图 正常组 模型组 胶囊组 苦杏仁苷组 丹皮酚组 芍药苷组
B.给药1 h时大鼠肠道菌群的Eric-PCR电泳图
Fig 1 GC chromatograms
表2 6种SCFAs的回归方程、线性范围、定量下限以及
重复性、加样回收率试验结果
Tab 2 Results of regression equation,linear range,
limit of quantification and test of repeatability
正常组 模型组 胶囊组 苦杏仁苷组 丹皮酚组 芍药苷组
and recovery for 6 kinds of SCFAs C.给药48 h时大鼠肠道菌群的Eric-PCR电泳图
重复性(n=6) 加样回收率(n=9) 注:1~6.正常组;7~12.模型组;13~18.胶囊组;19~24.苦杏仁苷
线性范围,定量下限,
SCFAs 回归方程 R 2 平均含量,RSD, 平均加样回 RSD, 组;25~30.丹皮酚组;31~36.芍药苷组;37. DL2000 DNA Marker;38.
mg/L mg/L
mg/g % 收率,% % DL5000 DNA Marker
乙酸 y=20.28x+0.520 1 0.999 8 5~1 000 5 0.82 4.8 113.3 9.9 Note:1-6. normal group;7-12. model group;13-18. capsule group;
丙酸 y=35.033x+0.140 6 0.999 9 5~1 000 5 0.36 10.9 100.7 14.1 19-24. amygdalin group;25-30. paeonol group;31-36. paeoniflorin
丁酸 y=43.968x+0.254 0 0.999 9 5~1 000 5 1.31 8.1 99.0 11.9 group;37. DL2000 DNA Marker,38. DL5000 DNA Marker
异丁酸 y=43.521x+0.369 3 0.999 4 5~1 000 5 0.05 7.7 99.7 12.6
戊酸 y=49.954x+0.194 2 0.999 9 5~1 000 5 0.07 5.0 101.2 9.6 图 2 各组大鼠粪便中肠道菌群 DNA 的 Rep-PCR 和
异戊酸 y=52.42x+0.235 2 0.999 9 5~1 000 5 0.06 5.2 102.5 10.5 Eric-PCR电泳图
表3 各组大鼠结肠内容物中SCFAs的含量比较(x±±s, Fig 2 Rep-PCR and Eric-PCR electrophoretograms
n=6,mg/g) of intestinal flora DNA in feces of rats in each
Tab 3 Comparison of the contents of SCFAs in colo- group
nic contents of rats in each group(x±±s,n=6,
3.3.2 肠道菌群的多样性指数 给药 1 h 时,与正常组
mg/g)
比较,模型组大鼠肠道菌群的多样性指数均显著下降
组别 乙酸 丙酸 丁酸 戊酸 异戊酸 异丁酸 总SCFAs (P<0.05 或 P<0.01);与模型组比较,胶囊组和芍药苷
正常组 1.05±0.23 0.42±0.12 1.99±0.65 0.08±0.02 0.06±0.02 0.06±0.01 3.65±1.02
模型组 0.82±0.14 0.22±0.06 1.07±0.23 ** 0.07±0.02 0.07±0.02 0.06±0.02 2.22±0.64 ** 组大鼠肠道菌群的多样性指数均显著升高,而丹皮酚组
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胶囊组 0.79±0.14 0.45±0.10 1.12±0.41 0.08±0.02 0.06±0.02 0.06±0.01 2.86±0.61 # 和苦杏仁苷组大鼠肠道菌群的多样性指数均显著降低
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#
芍药苷组 1.03±0.13 0.39±0.06 1.51±0.26 # 0.06±0.02 0.04±0.01 0.05±0.01 3.09±0.46 ##
#
丹皮酚组 0.89±0.18 0.41±0.07 1.36±0.47 # 0.08±0.01 0.06±0.01 0.06±0.01 2.87±0.67 # (P<0.05或P<0.01)。给药48 h时,各组大鼠肠道菌群
苦杏仁苷组 0.79±0.23 0.27±0.03 0.91±0.34 0.07±0.01 0.06±0.02 0.06±0.02 2.14±0.54 的多样性指数组间比较,差异均无统计学意义(P>
注:与正常组比较,P<0.05, P<0.01;与模型组比较,P<0.05, 0.05),详见表4。
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P<0.01 4 讨论
Note:vs. normal group,P<0.05, P<0.01;vs. model group,P<
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0.05,P<0.01 痛经是最常见的妇科疾病,桂枝茯苓胶囊在治疗原
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·1324 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 11 中国药房 2020年第31卷第11期