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为 1 ∶ 10 000），室温孵育 1 h，TBST 溶液清洗 10 min×3
次，经ECL显色后运用凝胶成像分析系统成像，采用Im-
age J 1.8.0图像软件分析。以β-actin作为内参，以目标蛋
白与内参的灰度值比值作为目标蛋白的相对表达量。
上述试验重复3次。
2.9 统计学方法
A.对照组 B.齐墩果酸低剂量组
采用SPSS 13.0软件进行统计分析。计量资料均以
x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分析（One-way
ANOVA），两两比较采用t检验。P＜0.05表示差异有统
计学意义。
3 结果
3.1 不同浓度齐墩果酸对SKOV3细胞存活率的影响 C.齐墩果酸高剂量组
随着齐墩果酸浓度的增加和作用时间的延长， 图 1 齐墩果酸对 SKOV3 细胞迁移能力影响的显微图
SKOV3 细胞的增殖能力有随之减弱的趋势，齐墩果酸 （结晶紫染色，×200）
各剂量组细胞存活率均显著低于对照组（P＜0.05或P＜ Fig 1 Micrographs of the effects of oleanolic acid on
0.01），详见表2。当齐墩果酸浓度为20 μmol/L、作用24 h migration ability of SKOV3 cells（crystal violet
时，SKOV3 细胞的存活率为（79.06± 3.24）％，提示该浓 staining，×200）
度齐墩果酸对 SKOV3 细胞具有显著的细胞毒性。因
此，选择 20 μmol/L 作为齐墩果酸给药的低剂量，选择
40 μmol/L作为齐墩果酸给药的高剂量，并选择作用24 h
作为齐墩果酸的给药条件。
表 2 不同浓度齐墩果酸对 SKOV3 细胞存活率的影响
（x±±s，n＝3，％％）
A.对照组 B.齐墩果酸低剂量组
Tab 2 Effects of oleanolic acid on the survival rate of
SKOV3 cells（x±±s，n＝3，％％）
细胞存活率
组别
培养12 h 培养24 h 培养36 h 培养48 h
对照组 99.04±3.05 98.65±2.97 102.10±6.20 98.85±4.10
齐墩果酸10 μmol/L组 93.18±3.19 ＊ 91.25±5.24 ＊ 87.18±2.84 ＊＊ 85.32±4.13 ＊＊
齐墩果酸20 μmol/L组 89.70±4.78 ＊＊ 79.06±3.24 ＊＊ 77.76±4.02 ＊＊ 76.24±3.95 ＊＊ C.齐墩果酸高剂量组
齐墩果酸40 μmol/L组 83.12±3.33 ＊＊ 75.23±4.38 ＊＊ 72.10±3.32 ＊＊ 68.40±4.57 ＊＊ 齐墩果酸对 SKOV3 细胞侵袭能力影响的显微图
齐墩果酸60 μmol/L组 74.35±6.40 ＊＊ 68.15±3.51 ＊＊ 62.06±2.90 ＊＊ 58.21±2.40 ＊＊ 图 2
齐墩果酸80 μmol/L组 72.08±3.47 ＊＊ 59.25±1.91 ＊＊ 51.62±4.02 ＊＊ 46.60±2.34 ＊＊ （结晶紫染色，×200）
齐墩果酸100 μmol/L组 64.52±4.46 ＊＊ 44.20±2.35 ＊＊ 37.48±5.12 ＊＊ 26.20±3.05 ＊＊ Fig 2 Micrographs of the effects of oleanolic acid on
＊＊
＊
注：与对照组比较，P＜0.05， P＜0.01 invasion ability of SKOV3 cells（crystal violet
Note：vs. control group， P＜0.05， P＜0.01 staining，×200）
＊
＊＊
3.2 齐墩果酸对SKOV3细胞迁移和侵袭的影响
表 3 齐墩果酸对 SKOV3 细胞迁移及侵袭能力的影响
与对照组比较，齐墩果酸低、高剂量组迁移和侵袭
（x±±s，n＝3，个）
的细胞数均显著减少（P＜0.05或P＜0.01），详见图1、图
Tab 3 Effects of oleanolic acid on migration and inva-
2、表3。 sion ability of SKOV3 cells（x±±s，n＝3，cell）
3.3 齐墩果酸对 SKOV3 细胞增殖、侵袭、转移相关蛋
组别 迁移细胞数 侵袭细胞数
白表达的影响
对照组 399.5±41.4 374.3±37.6
与对照组比较，齐墩果酸低、高剂量组 NF-κB p65、 齐墩果酸低剂量组 305.8±42.5 ＊ 287.3±22.0 ＊
PRL-3、TNF-α、IL-6 的相对表达量均显著降低，E-cad- 齐墩果酸高剂量组 177.0±13.7 ＊＊ 169.5±16.7 ＊＊
＊
＊＊
herin 蛋白的相对表达量均显著升高（P＜0.05 或 P＜ 注：与对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊＊
＊
Note：vs. control group， P＜0.05， P＜0.01
0.01），详见图3、表4。
3.4 齐 墩 果 酸 对 LPS 诱 导 的 SKOV3 细 胞 NF-κ B/ 著升高，E-cadherin 蛋白及其 mRNA 的相对表达量均显
PRL-3通路相关蛋白及其mRNA表达的影响 著降低（P＜0.01）；与 LPS 模型组比较，齐墩果酸低、高
与对照组比较，LPS 模型组细胞中 NF-κB p65、 剂量组细胞中NF-κB p65、PRL-3、TNF-α、IL-6蛋白及其
PRL-3、TNF-α、IL-6蛋白及其mRNA的相对表达量均显 mRNA 相对表达量均显著降低，E-cadherin 蛋白及其
中国药房 2020年第31卷第10期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10 ·1193 ·