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nNOS表达量；而在使用nNOS抑制剂后，细胞凋亡率及
Bcl-2
[5]
氧化应激产物水平均降低 。本研究采用与该研究相同
Bax 的方法注射甲基苯丙胺后发现，大鼠纹状体中 NO 水平
和 nNOS 蛋白表达量均显著升高，与该研究结果一致。
Cleaved
caspase-3 这表明纹状体中nNOS的过度激活与甲基苯丙胺诱导的
神经毒性密切相关。
β-actin
对照组 NC腺病 NC腺病毒+甲 NC腺病毒+ nNOS腺病毒+ 天麻素是从中药材天麻中分离提取的活性成分，已
毒组 基苯丙胺组 天麻素组 天麻素组
图7 天麻素注射液对过表达nNOS大鼠纹状体中Bcl-2、 经被证实在大脑、心肌、肝脏等组织中具有抗细胞凋亡
Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达影响的电泳图 及抗氧化作用 [13-15] 。有研究报道，天麻素对血管舒缩功
Fig 7 Electrophoretogram of the effects of Gastrodin 能异常模型大鼠的 NO 通路具有抑制作用，能显著下调
[8]
injection on the protein expression of Bcl-2， eNOS 和 iNOS 的表达 。基于此，本研究将天麻素用于
Bax and Cleaved caspase-3 in striatum of rats 甲基苯丙胺诱导的神经毒性损伤模型大鼠，结果显示，
with overexpression of nNOS 腹腔注射不同剂量天麻素注射液后，大鼠纹状体中 NO
水平和nNOS蛋白表达量均显著降低。这说明天麻素注
表5 天麻素注射液对过表达nNOS大鼠纹状体中细胞
射液对甲基苯丙胺引起的nNOS激活具有抑制作用。
凋亡率及凋亡相关因子蛋白表达量的影响（x±±s，
nNOS 激活后可导致 NO 大量产生，后者能够起到
n＝10）
促凋亡及促氧化应激的作用：其促凋亡作用与调控抗凋
Tab 5 Effects of Gastrodin injection on cell apoptosis
亡因子 Bcl-2 及促凋亡因子 Bax、Cleaved caspase-3 的表
rate and the protein expression of apoptosis-re-
[16]
lated factors in striatum of rats with overex- 达有关 ；其促氧化应激作用与自身的氧化活性有关，
pression of nNOS（x±±s，n＝10） 能够直接造成氧化产物 MDA 生成以及抗氧化酶 SOD、
凋亡相关因子蛋白表达量 GPx 消耗增加 [17-18] 。本研究通过进一步考察了 nNOS 下
组别 细胞凋亡率，％
Bax Bcl-2 Cleaved caspase-3 游凋亡相关因子及氧化应激相关因子的变化可知，甲基
对照组 0.93±0.15 0.26±0.06 0.89±0.19 0.34±0.07 苯丙胺组大鼠纹状体中的细胞凋亡率，Bax、Cleaved cas-
NC腺病毒组 1.35±0.29 0.28±0.04 0.83±0.20 0.38±0.06
NC腺病毒+甲基苯丙胺组 32.12±9.38 ＊＊ 0.91±0.17 ＊＊ 0.39±0.07 ＊＊ 0.83±0.17 ＊＊ pase-3 蛋白表达量以及 MDA 水平均显著升高，而 Bcl-2
NC腺病毒+天麻素组 12.93±3.52 ## 0.45±0.08 ## 0.77±0.15 ## 0.32±0.05 ## 蛋白表达量及 SOD、GPx 水平均显著降低，这与以往其
nNOS腺病毒+天麻素组 23.48±6.58 ΔΔ 1.21±0.34 ΔΔ 0.45±0.08 ΔΔ 0.89±0.18 ΔΔ
他学者报道的甲基苯丙胺促进细胞凋亡及氧化应激的
＊＊
注：与NC腺病毒组比较， P＜0.01；与NC腺病毒+甲基苯丙胺 [10-12]
结果 吻合，也与甲基苯丙胺致 nNOS 过度激活的生
ΔΔ
组比较，P＜0.01；与NC腺病毒+天麻素组比较，P＜0.01 物学活性吻合。在腹腔注射不同剂量天麻素注射液后，
##
Note：vs. NC adenovirus group， ＊ ＊ P＜0.01；vs. NC adenovirus +
methamphetamine group，P＜0.01；vs. NC adenovirus+gastrodin group， 大鼠纹状体中的细胞凋亡率，Bax、Cleaved caspase-3 蛋
##
ΔΔ P＜0.01 白表达量以及MDA的水平均显著降低，而Bcl-2蛋白表
表6 天麻素注射液对过表达nNOS大鼠纹状体中氧化 达量及 SOD、GPx 水平均显著升高，说明天麻素注射液
应激相关因子水平的影响（x±±s，n＝10） 对甲基苯丙胺引起的细胞凋亡及氧化应激反应过度激
Tab 6 Effects of Gastrodin injection on the levels of 活均具有抑制作用，进而也提示该注射液对甲基苯丙胺
oxidant stress factors in striatum of rats with 诱导的大鼠神经毒性损伤具有保护作用。
overexpression of nNOS（x±±s，n＝10） 在证实天麻素注射液的神经保护作用及其对nNOS
组别 MDA，μmol/mg pro SOD，U/mg pro GPx，U/mg pro 的调控作用后，本研究通过腺病毒注射的方式进一步探
对照组 6.82±1.02 31.44±7.26 18.31±3.48
NC腺病毒组 7.01±1.14 30.89±7.11 19.02±2.83 讨了天麻素注射液的上述神经保护作用是否与抑制
NC腺病毒+甲基苯丙胺组 23.14±6.14 ＊＊ 20.25±4.77 ＊＊ 9.45±1.92 ＊＊ nNOS直接相关。结果显示，在大鼠纹状体中注射NC腺
NC腺病毒+天麻素组 11.32±2.92 ## 29.38±6.68 ## 19.44±2.77 ## 病毒后，与对照组比较，其纹状体的细胞凋亡率、凋亡相
nNOS腺病毒+天麻素组 24.91±7.75 ΔΔ 18.38±3.28 ΔΔ 10.18±2.84 ΔΔ
关因子表达及氧化应激均无明显变化，说明 NC 腺病毒
注：与NC腺病毒组比较， P＜0.01；与NC腺病毒+甲基苯丙胺
＊＊
不会影响大鼠纹状体中的细胞凋亡及氧化应激反应；而
##
组比较，P＜0.01；与NC腺病毒+天麻素组比较，P＜0.01
ΔΔ
Note：vs. NC adenovirus group， ＊ ＊ P＜0.01；vs. NC adenovirus + 在纹状体中注射NC腺病毒后继续腹腔注射甲基苯丙胺
##
methamphetamine group， P＜0.01；vs. NC adenovirus + gastrodin 后发现，NC腺病毒+甲基苯丙胺组大鼠纹状体的细胞凋
ΔΔ
group， P＜0.01 亡率、凋亡相关因子表达及氧化应激相关因子的变化趋
下，NO可以成为有活性的自由基，引起细胞凋亡及氧化 势与甲基苯丙胺组一致，NC腺病毒+天麻素组大鼠纹状
应激反应的激活 。已有动物实验证实，甲基苯丙胺能 体中细胞凋亡率、凋亡相关因子表达及氧化应激相关因
[5]
够升高纹状体中的细胞凋亡率、氧化应激产物水平及 子的变化趋势与加倍剂量天麻素组一致，说明 NC 腺病
中国药房 2020年第31卷第10期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10 ·1177 ·