Page 46 - 202007
P. 46

液、阴性对照溶液各适量，按“2.4.1”项下色谱条件进样
                                                            分析，记录色谱图，详见图5。

                                                               0.040         异鼠李素-3-O-新橙皮苷
                                                               0.030
                                                                                        香蒲新苷
                                                               0.020
                                                              AU
                                                               0.010
                                                               0.000
                                                              －0.010  0  5  10  15  20  25  30  35   40  45
           阴性对照  PHCJ-1 ）  PHGM-2 ）  PHGM-6 ）  PHCJ-1 ）  PHGM-2 ）  PHGM-6 ）  PHCJ-1 ）  PHGM-2 ）  PHGM-6 ）  PHGM-11 ）  PHGM-12 ）  PHGM-13 ）  蒲黄对照药材  香蒲新苷  t，min
              （ 批号：  （ 批号：  （ 批号：  （ 批号：  （ 批号：  （ 批号：  （ 批号：  （ 批号：  （ 批号：  （ 批号：  （ 批号：  （ 批号：  异鼠李素-3-O-新橙皮苷  0.08  A.混合对照品溶液

              筛上杂质  筛上杂质  筛上杂质  草蒲黄  草蒲黄  草蒲黄  筛下蒲黄花粉  筛下蒲黄花粉  筛下蒲黄花粉  草蒲黄  草蒲黄  草蒲黄  0.06  异鼠李素-3-O-新橙皮苷  香蒲新苷

                                                              AU
                                                                0.04
                                                                0.02
         图4 草蒲黄、杂质和蒲黄花粉的薄层色谱图谱（部分）                               0
        Fig 4 TLC chromatogram of S. typhae，impurity and          0    5   10  15   20  25  30  35  40   45
                                                                                     t，min
               pollen of T. angustifolia（part）                                     B.供试品溶液
            由图 4 显示，草蒲黄及其筛下蒲黄花粉和筛上杂质                            0.08
        具有一致的色谱斑点，且在与对照药材和对照品色谱相                                0.06
                                                              AU  0.04
        应位置均分别显一致的斑点，杂质的斑点与草蒲黄的斑
                                                                0.02
        点大小基本一致，均较蒲黄花粉的斑点稍小，说明杂质                                 0
        中成分与花粉的成分类别一致。                                             0   5   10  15  20  25  30   35  40  45
                                                                                     t，min
        2.4  含量测定                                                                 C.阴性对照溶液
        2.4.1  色谱条件      色谱柱：Perkin Elmer C18 （250 mm×                    图5 高效液相色谱图
                                                                       Fig 5 HPLC chromatograms
        4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.05％磷酸溶液（15 ∶ 85，
        V/V）；检测波长：254 nm；流速：1 mL/min；柱温：35 ℃；进                  由图5显示，异鼠李素-3-O-新橙皮苷和香蒲新苷分
        样量：5～20 μL（视峰面积的大小适当调整）。                            离度大于 1.5，理论板数按异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷峰
        2.4.2  供试品溶液制备         取同一批次的草蒲黄及其筛                 计为1.57×10 ；阴性对照不影响异鼠李素-3-O-新橙皮苷
                                                                       4
        下蒲黄花粉、筛上杂质样品粉末（批号：PHGM-1）各约                         和香蒲新苷的测定。
        0.5 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇                        2.4.6  线性关系考察        精密吸取“2.4.3”项下混合对照
        50 mL，称定质量，冷浸 12 h，超声（功率：250 W，频率：                  品溶液 1、5、10、15、20 μL，按“2.4.1”项下色谱条件进样
        50 kHz）提取 30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减                    测定，记录峰面积。以待测物进样量为横坐标（x，μg）、
        失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。                                 其峰面积为纵坐标（y）进行线性回归分析，得异鼠李
        2.4.3  混合对照品溶液制备           取异鼠李素-3-O-新橙皮            素-3-O-新橙皮苷的回归方程为 y＝300 000x－228 992
        苷对照品、香蒲新苷对照品各适量，精密称定，分别置于                          （r＝0.998 8），香蒲新苷的回归方程为 y＝121 260x+
        10 mL量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，制成异                        73 388（r＝0.998 4）。结果，异鼠李素-3-O-新橙皮苷、香
        鼠李素-3-O-新橙皮苷质量浓度为 0.530 mg/mL、香蒲新                   蒲新苷进样量的线性范围分别为 0.053～1.060、0.052～
        苷质量浓度为0.517 mg/mL的对照品母液。再分别精密                       1.034 μg。
        吸取上述对照品母液各 1 mL，置于同一 10 mL 量瓶中，                     2.4.7  检测限与定量限考察           精密吸取“2.4.3”项下混
        加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成异鼠李素-3-O-新橙皮苷、                        合对照品溶液适量，置于 10 mL 量瓶中，加甲醇逐级稀

        香蒲新苷质量浓度分别为 53.0、51.7 μg/mL 的混合对照                   释后，按“2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。
        品溶液。                                                当异鼠李素-3-O-新橙皮苷和香蒲新苷对照品峰面积与
        2.4.4  阴性对照溶液制备          按“2.4.2”项下方法，取除样           基线信噪比达到3 ∶ 1时即为检测限，信噪比达到10 ∶ 1时
        品外的试剂，制成阴性对照溶液。                                     即为定量限。结果，异鼠李素-3-O-新橙皮苷和香蒲新苷
        2.4.5  系统适用性试验         取供试品溶液、混合对照品溶                的检测限、定量限均分别为0.005、0.025 μg。


        ·808  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 7                                   中国药房    2020年第31卷第7期
   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51