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CONCLUSIONS：The ethanol extracts of C. sinica，R. crataegifolius，P. wallichii，R. corchorifolius，P. hancei，H. nepalensis and
        the water extracts of H. nepalensis，P. wallichii，C. ovata show certain inhibitory activity in vitro to XO，especially ethanol extract
        of C. sinica. The ethyl acetate fraction of the ethanol extract of C. sinica has similar inhibitory activity to allopurinol but their
        inhibition types are different.
        KEYWORDS     Xanthine oxidase inhibitory activity；Gout；TCM；Extract；Root of Caragana sinica；in vitro


            痛风是由持续的高尿酸血症致尿酸盐晶体沉积在                           根、豆科植物紫藤（Wisteria sinensis Sweet）的根、蔷薇科
                                 [1]
        关节处而引发的炎性关节炎 ，现已成为除糖尿病外的                            植物牛迭肚（Rubus crataegifolius Bunge）的根、紫葳科植
        第二大代谢类疾病，严重威胁人类健康                 [2-3] 。黄嘌呤氧化      物 梓（Catalpa ovata G. Don）的 树 皮 、紫 葳 科 植 物 凌
        酶抑制剂（Xanthine oxidase inhibitor，XODI）可抑制尿酸          霄[Campsis grandiflora（Thunb.）Loisel ex Schum.]的根、
        生成的关键代谢酶黄嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase，                    胡椒科植物山蒟（Piper hancei Maxim.）的茎，饮片样品
        XO），故在痛风的治疗中意义重大。其中，别嘌醇、非布                          保存于贵州医科大学药学院天然药物化学研究组。所
        他司等是临床治疗痛风的一线药物，已使绝大多数患者                            有饮片均粉碎，过四号筛，备用。
        的症状得到了有效控制           [4-6] 。然而，现有XODI所致的不           1.3 试剂
                              [7-8]
        良反应（如肝功能损害等 ）也不容忽视，故开发更为安                               黄嘌呤（批号：20210609）、别嘌醇（阳性对照，批号：
        全有效的 XODI 已成为痛风治疗药物研发的热点之一。                         204337）、XO（批号：379122，规格：40 U/mg）等高纯试剂
                                           [8]
        诸多中草药在痛风治疗中具有疗效确切 、副作用小                      [9-10]  均购自北京百灵威科技有限公司；磷酸盐缓冲液（PBS，
        的特点，是XODI研发的重要资源 。鉴于此，本研究从                          pH 7.3）、1 mol/L 氢氧化钠（NaOH）溶液、1 mol/L 盐酸
                                     [11]
        《中华本草》中筛选出具有通络祛风且可用于治疗痛风                           （HCl）溶液均由本实验室自制；石油醚（60～90 ℃）、二
        的9种中药（三角风、石胡椒、山莓、金雀花根、紫藤根、牛                         氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、二甲基亚砜（DMSO）等试剂
        迭肚根、梓木皮、凌霄花根、爬岩香），在其现有药理活性                          均为分析纯，水为高纯水。
        报道（金雀花根同属中药具有抗类风湿性关节炎、抗炎、                           2 方法
        镇痛等作用      [12-14] ，三角风等中药具有抗炎、降压、解痉等               2.1  提取物的制备
        活性 ）的基础上，从抑制尿酸生成的角度出发，以别嘌                               称取“1.2”项下药材粉末各 2 份，每份约 10 g，分别
            [15]
        醇作为阳性对照，初步评价上述 9 种中药提取物对 XO                         用适量水和甲醇作为提取溶剂回流提取1 h×2次。合并
        的体外抑制作用，拟筛选出活性突出的中药品种，为相                            提取液，滤过，分别获得水提物和甲醇提取物（以下简称
        关中药药效物质基础的进一步研究及其应用提供参考。                           “醇提物”），共计 18 个粗品提取物（提取率见表 1）。将
        1 材料                                                上述提取物浓缩成浸膏，真空干燥后避光保存，备用。
        1.1  仪器                                                         表1   9种中药的提取率（％％）
            Varioskan LUK型全波长扫描式多功能读数仪、902                      Tab 1  Extraction rate of 9 kinds of TCM（％％）
        型－80 ℃冰箱[赛默飞世尔科技（中国）有限公司]；                                        提取率                     提取率
                                                            中药                       中药
        SW-CJ-2D 型超净工作台（苏州净化设备有限公司）；                                    水      甲醇              水       甲醇
        BS223S 型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公                          三角风        10.22   10.91  牛迭肚根     10.38  17.63
                                                            石胡椒         7.57   10.48  梓木皮      8.62    6.61
        司）；KQ5200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公                        山莓         14.81   11.61  凌霄花根     9.28    8.52
        司）；ZYCGF-Ⅱ-10T 型超纯水机（四川卓越水处理设备                      金雀花根       10.42   13.32  爬岩香      6.38    9.13
        有限公司）；DZF型真空干燥箱（北京科伟永兴仪器有限                          紫藤根         9.07   10.01
        公司）；TGL16M型台式高速离心机（湖南凯达科学仪器                         2.2 活性提取物萃取部位的制备
        有限公司）。                                                  取活性提取物[根据本课题组前期研究结果及“2.1”
        1.2 药材                                              项下各药材提取物的半数抑制浓度（IC50 ）筛选]浸膏适
            三角风、石胡椒、山莓、金雀花根、紫藤根、牛迭肚                         量，加水，超声（功率：200 W，频率：40 kHz，下同）使溶
        根、梓木皮、凌霄花根、爬岩香等9种中药饮片均购自安                           解，依次使用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇适量
        徽 益 生 源 中 药 材 饮 片 科 技 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为            萃取，得石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水部位
        180101、180101、180401、181201、181201、171101、         （以下简称 PE、DCM、EA、NB、W 部位，得率分别为
        171101、180601、180601），并经贵州医科大学药学院龙                  4.79％、6.51％、35.61％、23.17％、29.67％），减压回收溶
        庆德副教授鉴定，分别为五加科植物常春藤[Hedera                          剂后避光保存，备用。
        nepalensis K. Koch var. sinensis（Tobl.）Rehd.]的茎叶、胡  2.3 溶液的制备
        椒科植物石楠藤[Piper wallichii（Miq.）Hand.-Mazz.]的          2.3.1  底物溶液      称取黄嘌呤适量，加入 PBS，室温下
        全株、蔷薇科植物山莓（Rubus corchorifolius L. f.）的果            用 NaOH、HCl 溶液调节 pH 至 7.5，超声使溶解，制得浓
        实、豆科植物锦鸡儿[Caragana sinica（Buchoz）Rehd.]的            度分别为1 200、1 000、800、600、400 μmol/L的黄嘌呤底


        ·678  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 6                                   中国药房    2020年第31卷第6期
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