Page 91 - 202004

[21]
海藻富含多种功效性成分，如多糖、无机元素、氨基 黍子 的干燥藻体。样品信息详见表1。
酸、脂肪酸、蛋白质、维生素、甾体等 [7-11] ，具有抗肿瘤、抗 表1 样品信息
[12]
凝血、抗氧化、增强免疫等药理作用 。2015年版《中国 Tab 1 Sample information
药典》中海藻含量测定项下收载了以岩藻糖为对照品、 编号 种源 拉丁名 来源
[2]
用紫外分光光度法测定海藻中海藻多糖含量的方法 。 S1 海蒿子（真品） S. pallidum（Turn.）C. Ag. 日常监督检验
S2 海蒿子（真品） S. pallidum（Turn.）C. Ag. 大连调研收集
研究表明，海藻中粗蛋白含量为 8.00％ 。考虑到氨基
[11]
S3 海蒿子（真品） S. pallidum（Turn.）C. Ag. 青岛调研收集
酸作为组成蛋白质的基本单位，且有文献研究表明，甘 S4 羊栖菜（真品） S. fusiforme（Harv.）Setch. 日常监督检验
氨酸、精氨酸等与心血管系统健康密切相关 [13-14] ，海藻中 S5 羊栖菜（真品） S. fusiforme（Harv.）Setch. 日常监督检验
S6 羊栖菜（真品） S. fusiforme（Harv.）Setch. 评价性检验
[15]
的氨基酸与其生物活性也具有一定相关性 ，因此拟将
S7 铜藻（混伪品） S. horneri（Turn.）C. Ag. 大连调研收集
该类成分含量作为海藻药材的质量评价指标之一。此 S8 铜藻（混伪品） S. horneri（Turn.）C. Ag. 评价性检验
外，国内目前有关于海藻中海藻多糖提取及含量测定的 S9 铜藻（混伪品） S. horneri（Turn.）C. Ag. 日常监督检验
[17]
[9]
研究 ，以及藻类产品中植物激素 、微量元素 、脂肪 S10 亨氏马尾藻（混伪品） S. henslowianum C. Ag. 评价性检验
[16]
S11 亨氏马尾藻（混伪品） S. henslowianum C. Ag. 评价性检验
[19]
[18]
酸 、外源性有害物质重金属 、农药残留量 等的研 S12 亨氏马尾藻（混伪品） S. henslowianum C. Ag. 评价性检验
[20]
究，但尚未见从中药材真伪鉴别角度对海藻及其混伪品 S13 瓦氏马尾藻（混伪品） S. vachellianum Grev. 评价性检验
中所含氨基酸类成分进行分析的研究报道。基于此，本 S14 瓦氏马尾藻（混伪品） S. vachellianum Grev. 评价性检验
S15 瓦氏马尾藻（混伪品） S. vachellianum Grev. 评价性检验
试验采用阳离子交换色谱柱结合柱后衍生法，对海藻及
S16 海黍子（混伪品） S. kjellmanianum Yendo. 日常监督检验
混伪品中的17种氨基酸含量进行测定，并采用聚类分析 S17 海黍子（混伪品） S. kjellmanianum Yendo. 评价性检验
方法对样品进行统计分类，以期为海藻药材的质量控制 S18 海黍子（混伪品） S. kjellmanianum Yendo. 评价性检验
及深入研究提供参考。 2 方法与结果
1 材料 2.1 溶液的制备
1.1 仪器 2.1.1 试液 （1）缓冲液 A：分别称取柠檬酸三钠 11.8
S-433D型氨基酸全自动分析仪（包括S5200型全自 g、柠檬酸6 g，置于1 L量瓶中，加适量水溶解，再加甲醇
动进样器、S4300型氨基酸反应模块、S7130型溶剂存放 65 mL 和浓盐酸 6 mL，加水定容，摇匀，用浓盐酸调节
单元、S2100型梯度泵等）、LCAK06/Na型磺酸基强酸性 pH 至 3.45，经 0.45 μm 滤膜滤过，即得。（2）缓冲液 B：分
阳离子交换树脂分离柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）均购自 别称取柠檬酸三钠19.6 g、氢氧化钠3.1 g、硼酸5.0 g，置
德国Sykam公司；ME204/02型万分之一天平、S220-K型 于 1 L 量瓶中，加适量水溶解并定容，摇匀，用浓盐酸调
酸 度 计 [ 梅 特 勒 - 托 利 多 仪 器（上 海）有 限 公 司]； 节pH至10.85，经0.45 μm滤膜滤过，即得。（3）再生液C：
DHG-9070A 型电热恒温鼓风干燥箱（上海一恒科学仪 分别称取氢氧化钠 20.0 g、乙二胺四乙酸 0.2 g，置于 1 L
器 有 限 公 司）；N-WVAP112 型 氮 吹 仪（美 国 Or- 量瓶中，加适量水溶解并定容，摇匀，经 0.45 μm 滤膜滤
ganomation公司）；Milli-Q IQ7000型超纯水系统[密理博 过，即得。（4）样品稀释液：称取柠檬酸三钠 11.8 g，置于
（中国）有限公司]。 1 L 量瓶中，加入浓盐酸 10.4 mL，用水溶解并稀释至 1
1.2 药品与试剂 L，摇匀，用浓盐酸调节pH 至2.20，经0.45 μm 滤膜滤过，
氨基酸混合标准溶液（H型）：含有天冬氨酸（Asp）、 即得。（5）钾钠缓冲液：量取水 500 mL，加入醋酸钾
苏氨酸（Thr）、丝氨酸（Ser）、谷氨酸（Glu）、丙氨酸（Ala）、 196.0 g、三水乙酸钠272.0 g后，缓缓搅拌使溶解，再加入
甘 氨 酸（Gly）、胱 氨 酸（Cys）、缬 氨 酸（Val）、蛋 氨 酸 乙酸 200 mL，用水定容至 1 L，经 0.45 μm 滤膜过滤，即
（Met）、异亮氨酸（Ile）、亮氨酸（Leu）、酪氨酸（Tyr）、苯丙 得。（6）茚三酮溶液：量取甲醇600 mL，加入茚三酮20 g、
氨酸（Phe）、组氨酸（His）、赖氨酸（Lys）、精氨酸（Arg）、 苯酚 2 g，不断搅拌至茚三酮完全溶解，经 0.45 μm 有机
脯氨酸（Pro）等 17 种氨基酸混合对照品（德国 Sykam 公 滤膜滤过，然后向滤液中加入钾钠缓冲液 400 mL，并转
司，批号：09070113，每种氨基酸浓度均为2.5 μmol/mL）； 移至棕色试剂瓶中，从底部吹入氮气约3～5 min，即得。
甲醇为色谱纯，茚三酮、柠檬酸、柠檬酸三钠、硼酸、乙 2.1.2 混合对照品溶液 精密吸取氨基酸标准溶液0.4
醇、浓盐酸、氢氧化钠及其他试剂均为优级纯，水为超 mL至10 mL量瓶中，加样品稀释液稀释并定容，作为混
纯水。 合对照品溶液（单个氨基酸浓度均为100 μmol/L）。
1.3 药材 2.1.3 供试品溶液 称取样品粉末（过三号筛）约0.5 g，
海藻及其混伪品样品来源于兰州市食品药品检验 精密称定，置于20 mL水解管中（切勿沾壁），精密加入6
所日常监督检验、2017年甘肃省中药饮片专项抽验评价 mol/L 盐酸 10 mL，真空脱气，在充氮气状态下封口，置
性检验以及项目组产地调研收集的样品，经兰州市食品 于 110 ℃电热鼓风干燥箱中水解 20 h；取出，摇匀，放冷
药品检验所张彩霞副主任中药师鉴定，分别为马尾藻属 至室温；打开水解管，精密移取 1 mL 水解液置于 25 mL
植物海蒿子、羊栖菜、铜藻、亨氏马尾藻、瓦氏马尾藻、海 烧杯中，80 ℃水浴蒸干，残渣以 15 mL 样品稀释液溶解

中国药房 2020年第31卷第4期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4 ·469 ·